麦门冬汤特征图谱的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种麦门冬汤特征图谱的构建方法，其包括：以甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B为对照品，构建UPLC

【技术实现步骤摘要】
麦门冬汤特征图谱的构建方法


[0001]本专利技术涉及中药质量分析检测
，尤其涉及一种麦门冬汤特征图谱的构建方法。

技术介绍

[0002]麦门冬汤出自汉代张仲景的《金匮要略》：“大逆上气，咽喉不利，止逆下气者，麦门冬汤主之。麦门冬七升，半夏一升，人参二两，甘草二两，粳米三合，大枣十二枚。上六味，以水一斗二升，煮取六升，温服一升，日三夜一服。”现代常用于治疗慢性支气管炎、支气管扩张症、肺结核、矽肺、慢性肺纤维化、慢性咽喉炎、胃及十二指肠溃疡、慢性胃炎、糖尿病和干燥综合征等，辨证属于肺阴不足或胃阴不足者。麦门冬汤目前在国内尚未开发成为中成药，但在日本已被开发为汉方制剂使用，在日本销售额排名前列，该方已被收录在国家药品监督管理局制定并公布的《古代经典名方目录(第一批)》，具有很强的开发价值和前景。
[0003]但是，日本在售的麦门冬汤颗粒汉方药的处方剂量小，其处方组方、剂量、制法及服用方法与古籍记载不相符，治疗效果尚有待对比检验。近年来，国内许多学者对麦门冬汤中的化学成分和有效组分进行药理学、药效学和药动学等方面的研究，主要集中在药理学的研究方面，对其汤剂的物质基础、提取工艺、多指标成分含量测定及特征图谱研究较少，缺少系统性研究。且对于如何衡量大生产制剂与传统汤剂质量的一致性也研究较少。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种麦门冬汤特征图谱的构建方法，该方法可为麦门冬汤大生产质量控制提供数据基础，保证麦门冬汤产品质量的稳定性和可控性。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种麦门冬汤特征图谱的构建方法，其包括：
[0006]以甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B为对照品，构建UPLC
‑
UV特征图谱；
[0007]以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1为对照品，构建HPLC
‑
ELSD特征图谱。
[0008]作为上述技术方案的改进，所述UPLC
‑
UV特征图谱的构建方法为：
[0009](1)取甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷对照品，加入溶剂溶解或提取，制得甘草特征图谱对照品溶液；
[0010]取甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B对照品，加入溶剂溶解或提取，制得麦冬黄酮对照品溶液；
[0011](2)取麦门冬汤制剂，加提取溶剂提取，制得UPLC
‑
UV特征图谱供试品溶液；
[0012](3)取预设量的甘草特征图谱对照品溶液、麦冬黄酮对照品溶液和UPLC
‑
UV特征图谱供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，构建麦门冬汤的UPLC
‑
UV特征图谱，并
测定麦冬门汤中甲基麦冬二氢高异黄酮A对照品、甲基麦冬二氢高异黄酮B、甘草苷和甘草酸含量。
[0013]作为上述技术方案的改进，所述梯度洗脱按下述程序进行：
[0014]0～8min，流动相A从5％
→
18％，流动相B从95％
→
82％；
[0015]8～11min，流动相A从18％
→
20％，流动相B从82％
→
80％；
[0016]11～21min，流动相A从20％
→
21％，流动相B从80％
→
79％；
[0017]21～23min，流动相A从21％
→
28％，流动相B从79％
→
72％；
[0018]23～29min，流动相A从28％
→
30％，流动相B从72％
→
70％；
[0019]29～38min，流动相A从30％
→
38％，流动相B从70％
→
62％；
[0020]38～47min，流动相A从38％
→
55％，流动相B从62％
→
45％；
[0021]47～54min，流动相A从55％
→
65％，流动相B从45％
→
35％。
[0022]作为上述技术方案的改进，步骤(3)中，分别吸取甘草特征图谱对照品溶液、麦冬黄酮对照品溶液和UPLC
‑
UV特征图谱供试品溶液各1～3μL，注入液相色谱仪进行检测，所述液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，所述液相色谱仪以乙腈为流动相A，以0.08～0.12vol％的磷酸溶液为流动相B，流速为0.28～0.32mL/min；柱温为28～32℃，检测波长为250～300nm。
[0023]作为上述技术方案的改进，步骤(3)中，分别吸取甘草特征图谱对照品溶液1μL、麦冬黄酮对照品溶液1μL和UPLC
‑
UV特征图谱供试品溶液2μL，注入液相色谱仪进行检测，所述液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm；所述液相色谱仪以乙腈为流动相A，以0.1vol％的磷酸溶液为流动相B；流速为0.3mL/min；柱温为30℃，检测波长为252～296nm。
[0024]作为上述技术方案的改进，所述UPLC
‑
UV特征图谱的构建方法中，当检测时间为0～46分钟时，检测波长为252nm；检测时间为46～54分钟时，检测波长为296nm。
[0025]作为上述技术方案的改进，步骤(1)中，取甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷对照品，加甲醇制成每1mL含甘草酸20μg、甘草素35μg、甘草苷10μg、异甘草苷10μg的混合溶液，即得甘草特征图谱对照品溶液；
[0026]分别精密称取甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B对照品适量，加甲醇制成每1mL含甲基麦冬二氢高异黄酮A 5μg、甲基麦冬二氢高异黄酮B 5μg的混合溶液，即得麦冬黄酮对照品溶液。
[0027]作为上述技术方案的改进，步骤(2)中，所述提取溶剂为75vol％甲醇或50vol％乙醇，提取时间为20～40min，提取方式为超声提取或回流提取。
[0028]作为上述技术方案的改进，步骤(2)包括：
[0029]取麦门冬汤制剂1g，精密称定，置50mL离心管中，加75％甲醇25mL，超声处理30min，离心，取上清液，残渣再加75％甲醇25mL，超声处理30min，离心，合并两次提取上清液至蒸发皿中，水浴蒸至近干，加75％甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加75％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得UPLC
‑
UV特征图谱供试品溶液。
[0030]作为上述技术方案的改进，所述UPLC
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UV特征图谱包括15个特征峰；其中，峰2为甘草苷峰，峰5为异甘草本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，包括：以甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷、甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B为对照品，构建UPLC
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UV特征图谱；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1为对照品，构建HPLC
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ELSD特征图谱。2.如权利要求1所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，所述UPLC
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UV特征图谱的构建方法为：(1)取甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷对照品，加入溶剂溶解或提取，制得甘草特征图谱对照品溶液；取甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B对照品，加入溶剂溶解或提取，制得麦冬黄酮对照品溶液；(2)取麦门冬汤制剂，加提取溶剂提取，制得UPLC
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UV特征图谱供试品溶液；(3)取预设量的甘草特征图谱对照品溶液、麦冬黄酮对照品溶液和UPLC
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UV特征图谱供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，构建麦门冬汤的UPLC
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UV特征图谱，并测定麦冬门汤中甲基麦冬二氢高异黄酮A对照品、甲基麦冬二氢高异黄酮B、甘草苷和甘草酸含量。3.如权利要求2所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱按下述程序进行：0～8min，流动相A从5％
→
18％，流动相B从95％
→
82％；8～11min，流动相A从18％
→
20％，流动相B从82％
→
80％；11～21min，流动相A从20％
→
21％，流动相B从80％
→
79％；21～23min，流动相A从21％
→
28％，流动相B从79％
→
72％；23～29min，流动相A从28％
→
30％，流动相B从72％
→
70％；29～38min，流动相A从30％
→
38％，流动相B从70％
→
62％；38～47min，流动相A从38％
→
55％，流动相B从62％
→
45％；47～54min，流动相A从55％
→
65％，流动相B从45％
→
35％。4.如权利要求2所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，分别吸取甘草特征图谱对照品溶液、麦冬黄酮对照品溶液和UPLC
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UV特征图谱供试品溶液各1～3μL，注入液相色谱仪进行检测，所述液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，所述液相色谱仪以乙腈为流动相A，以0.08～0.12vol％的磷酸溶液为流动相B，流速为0.28～0.32mL/min；柱温为28～32℃，检测波长为250～300nm。5.如权利要求4所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，分别吸取甘草特征图谱对照品溶液1μL、麦冬黄酮对照品溶液1μL和UPLC
‑
UV特征图谱供试品溶液2μL，注入液相色谱仪进行检测，所述液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm；所述液相色谱仪以乙腈为流动相A，以0.1vol％的磷酸溶液为流动相B；流速为0.3mL/min；柱温为30℃，检测波长为252～296nm。6.如权利要求2所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，所述UPLC
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UV特征图谱的构建方法中，当检测时间为0～46分钟时，检测波长为252nm；检测时间为46～54分钟时，检测波长为296nm。
7.如权利要求2所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(1)中，取甘草酸铵、甘草素、甘草苷、异甘草苷对照品，加甲醇制成每1mL含甘草酸20μg、甘草素35μg、甘草苷10μg、异甘草苷10μg的混合溶液，即得甘草特征图谱对照品溶液；分别精密称取甲基麦冬二氢高异黄酮A、甲基麦冬二氢高异黄酮B对照品适量，加甲醇制成每1mL含甲基麦冬二氢高异黄酮A 5μg、甲基麦冬二氢高异黄酮B 5μg的混合溶液，即得麦冬黄酮对照品溶液。8.如权利要求2所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(2)中，所述提取溶剂为75vol％甲醇或50vol％乙醇，提取时间为20～40min，提取方式为超声提取或回流提取。9.如权利要求8所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(2)包括：取麦门冬汤制剂1g，精密称定，置50mL离心管中，加75％甲醇25mL，超声处理30min，离心，取上清液，残渣再加75％甲醇25mL，超声处理30min，离心，合并两次提取上清液至蒸发皿中，水浴蒸至近干，加75％甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加75％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得UPLC
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UV特征图谱供试品溶液。10.如权利要求2所述的麦门冬汤特征图谱的构建方法，其特征在于，所述UPLC
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UV特征图谱包括15个特征峰；其中，峰2为甘草苷峰，峰5为异甘草苷峰，峰6为甘草素峰，峰10为甘草酸峰，峰14为甲基麦冬二氢高异黄酮A峰，峰15为甲基麦冬二氢高异黄酮B峰；以峰6为S1峰，峰1～峰6与S1峰的相对保留时间在第一规定值的
±
10％之内；所述第二规定值为：峰1为0.55、峰2为0.56、峰3为0.87、峰4为...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶晨璐，吴晓纯，罗文安，朱德全，范倩，蔡盛康，何广铭，陈向东，潘礼业，孙冬梅，魏梅，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：