花生多仁型荚果数主效位点的连锁分子标记、引物组合物、鉴定方法及应用技术

本发明专利技术属于花生分子遗传育种技术领域，公开了花生多仁型荚果数主效位点的连锁分子标记、引物组合物、鉴定方法及应用。连锁分子标记位于花生第5染色体，包括分子标记Marker3423、分子标记Marker3535。所述分子标记Marker3423的DNA序列如SEQ ID No.1所示；所述分子标记Marker3535的DNA序列如SEQ ID No.3所示。所述连锁分子标记是利用引物组合物获得的。本发明专利技术公开的花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5及其连锁分子标记和鉴定方法，适用于花生多仁型荚果数基因定位和分子标记辅助选择育种，提高了花生育种效率。了花生育种效率。了花生育种效率。

【技术实现步骤摘要】
花生多仁型荚果数主效位点的连锁分子标记、引物组合物、鉴定方法及应用


[0001]本专利技术属于花生分子遗传育种
，尤其涉及一种花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记、引物组合物、鉴定方法及其应用。

技术介绍

[0002]花生(Arachis hypogaea L.)，是我国重要的油料作物和经济作物之一，每年种植面积在4.50
×
106公顷左右，总产约1.75
×
107吨，为人们提供了大量的植物性油脂、蛋白质和其他营养。目前，我国花生消费需求量不断增加，自给能力面临重大挑战。依靠品种改良提高花生单产，是在耕地资源约束的前提下提高花生总产、满足市场供需平衡的主要途径。
[0003]每荚果籽仁数，是花生品种鉴定的指标性状之一，花生品种多数为双仁型荚果，也有少数品种(如四粒红)为多仁型(每荚果籽仁数≥3)荚果。多仁型荚果数也是花生单株产量的重要构成因素之一，其遗传基础复杂，且易受环境影响。传统育种中，仅依靠表型进行选择的效率较低。因此，开展花生多仁型荚果数主效位点挖掘和连锁分子标记开发，对深入揭示花生多仁特性遗传机制和加速花生高产分子设计育种具有重要的现实意义。
[0004]目前关于花生每荚果籽仁数的遗传基础依然不明确，不同学者的研究结论存在差异：一些学者认为荚果多仁(每荚果籽仁数≥3)特性对少仁(每荚果籽仁数<3)特性为显性
[1,2]，但也有学者
[3]认为少仁特性对多仁特性表现为显性遗传。近年来，研究人员对荚果和籽仁性状进行了大量定位研究，鉴定出一批控制荚果和籽仁大小、重量等性状的QTL
[4
‑
8]。但针对花生多仁型荚果数的定位研究很少
[9,10]，尤其缺少相关主效QTL及其连锁分子标记的报道，导致分子设计育种难以有效开展。因此，筛选一个可稳定表达的花生多仁型荚果数相关主效QTL位点，对加速花生多仁型荚果数基因图位克隆和培育多仁型花生新品种具有重要意义。
[0005]参考文献
[0006][1]BADAMIVK.Arachishypogaea(theGroundnut)[D].Cambridge:CambridgeUniversity,1928.
[0007][2]BALAIAHC,REDDYPS,REDDIMV.Genicanalysisingroundnut.ProceedingsoftheIndianAcademyofSciences,1977,85:340
–
350.
[0008][3]禹山林.中国花生品种及其系谱.上海:上海科学技术出版社,2008.pp55
–
58.
[0009][4]张新友.栽培花生产量、品质和抗病性的遗传分析与QTL定位研究[D].杭州:浙江大学,2011.
[0010][5]吕维娜.花生栽培种SSR遗传连锁图谱构建及重要产量性状QTL定位分析[D].郑州:郑州大学,2014.
[0011][6]HUANGL,HEHY,CHENWG,RENXP,CHENYN,ZHOUXJ,XIAYL,WANGXL,JIANGXG,LIAOBS,JIANGHF.Quantitativetraitlocusanalysisofagronomicandquality
‑
relatedtraitsincultivatedpeanut(ArachishypogaeaL.)
.TheoreticalandAppliedGenetics,2015,128(6):1103
–
1115.
[0012][7]曾新颖,郭建斌,赵姣姣,陈伟刚,邱西克,黄莉,罗怀勇,周晓静,姜慧芳,黄家权.花生籽仁大小相关性状QTL定位.作物学报,2019,45(8):1200
–
1207.
[0013][8]周小静,雷永,夏友霖,漆燕,晏立英,任小平,黄莉,罗怀勇,刘念,陈伟刚,陈玉宁,廖伯寿,姜慧芳.花生荚果大小和重量相关性状的QTL定位分析.中国油料作物学报,2019,41(6):869
–
877.
[0014][9]CHENYN,WANGZH,RENXP,HUANGL,GUOJ,ZHAOJJ,ZHOUXJ,YANLY,LUOHY,LIUN,CHENWG,WANLY,LEIY,LIAOBS,HUAIDX,JIANGHF.IdentificationofmajorQTLforseednumberperpodonchromosomeA05oftetraploidpeanut(ArachishypogaeaL.).CropJournal,2019,7(2):238
–
248.
[0015][10]WANGL,YANGXL,CUISL,MUG,SUNXM,LIULF,LIZC.QTLmappingandQTL
×
environmentinteractionanalysisofmulti
‑
seedpodincultivatedpeanut(ArachishypogaeaL.).CropJournal,2019,7(2):249
–
260。

技术实现思路

[0016]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记及其应用。
[0017]为实现上述专利技术目的，本专利技术所采取的技术方案为：
[0018]本专利技术提供花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记，所述连锁分子标记与花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5共位于花生基因组第5染色体上，包括分子标记Marker3423、分子标记Marker3535。
[0019]进一步的，所述分子标记Marker3423的DNA序列如SEQ ID No.1所示；所述分子标记Marker3535的DNA序列如SEQ ID No.3所示。
[0020]进一步的，所述分子标记Marker3423的多态性为G/A，与其具有多态性差异的DNA序列如SEQ ID No.2所示；所述分子标记Marker3535的多态性为G/T，与其具有多态性差异的DNA序列如SEQ ID No.4所示.
[0021]本专利技术提供了一种引物组合物，所述引物组合物包括4条引物，其DNA序列分别如SEQ ID No.5
‑
SEQ ID No.8所示。
[0022]进一步的，所述引物组合物含有DNA序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的扩增分子标记Marker3423的引物、DNA序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的扩增分子标记Marker3535的引物。
[0023]本专利技术还提供了一种花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的鉴定方法，所述鉴定方法包括如下步骤：
[0024]提取待鉴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记，其特征在于，所述花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记与花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5共位于花生基因组第5染色体上；所述花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记包括分子标记Marker3423、分子标记Marker3535；所述分子标记Marker3423的DNA序列如SEQ ID No.1所示；所述分子标记Marker3535的DNA序列如SEQ ID No.3所示。2.根据权利要求1所述的花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记，其特征在于，所述分子标记Marker3423的多态性为G/A，与分子标记Marker3423具有多态性差异的DNA序列如SEQ ID No.2所示。3.根据权利要求1所述的花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记，其特征在于，所述分子标记Marker3535的多态性为G/T，与分子标记Marker3535具有多态性差异的DNA序列如SEQ ID No.4所示。4.一种用于权利要求1～3任意一项所述花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记鉴定中的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括4条引物，DNA序列分别如SEQ ID No.5
‑
SEQ ID No.8所示。5.一种用于权利要求1～3任意一项所述花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的连锁分子标记的花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的鉴定方法，其特征在于，所述花生多仁型荚果数主效QTL位点qMSP5的鉴定方法包括如下步骤：提取待鉴定花生材料的基因组DNA，并以基因组DNA为模板，利用引物组合物对模板进行PCR扩增，对扩增产物进行测序分析，根据测序结果判断所述连锁分子标记的多态性。6.根据权利要求5所述的花生多仁型荚果数主效QTL位...

【专利技术属性】
技术研发人员：张胜忠，陈静，苗华荣，胡晓辉，
申请(专利权)人：山东省花生研究所，
类型：发明
国别省市：