【技术实现步骤摘要】
包括至少一个切向流过滤步骤的产生和纯化RNA的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请是申请日为2016年05月30号、申请号为201680031561.5(PCT/EP2016/062152)、 专利技术名称为“包括至少一个切向流过滤步骤的产生和纯化RNA的方法”的分案申请。
[0003]本专利技术涉及用于产生和纯化RNA的切向流过滤(TFF)的方法。
技术介绍
[0004]RNA正在成为各种制药应用的创新候选物,但高效纯化仍然是一个挑战。这部分是由 于样品中不同类型的不需要的污染物及其组合,这些需要从所需的RNA物质中分离出来以 获得纯的RNA样品。这样的污染物通常是任何上游过程例如RNA制造的成分和副产物。 其中体外转录用于制造大RNA,在成功转录后,样品通常含有所需的RNA种类以及各种污 染物,例如不需要的RNA种类、蛋白质、亚精胺、DNA或其片段、焦磷酸盐、游离的核苷 酸、内毒素、洗涤剂和有机溶剂。
[0005]商业的下游应用(例如作为药物组合物和/或疫苗的制剂和用途)造成进 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种产生和纯化RNA的方法,包括以下步骤:A)提供编码所述RNA的DNA;B)体外转录所述DNA以产生包含转录出的RNA的溶液;和C)通过一个或多个切向流过滤(TFF)步骤渗滤和/或浓缩和/或纯化所述包含转录出的RNA的溶液,其中步骤C)包括至少一个利用TFF的渗滤步骤,并且其中步骤C)中所述至少一个利用TFF的渗滤步骤包括采用盐水溶液的渗滤。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述盐水溶液包含碱金属卤化物、有机盐、碱土金属卤化物、或碱金属磷酸盐、或它们的组合。3.根据权利要求1所述的方法,其中所述盐水溶液包含碱金属卤化物、或碱土金属卤化物、或它们的组合。4.根据权利要求1所述的方法,其中所述盐水溶液包含NaCl、LiCl、KCl、NaOAc、CaCl2、Na3PO4、Na2HPO4和/或NaH2PO4。5.根据权利要求1所述的方法,其中所述盐水溶液包含NaCl、LiCl、KCl和/或CaCl2。6.根据权利要求1所述的方法,其中所述盐水溶液包含约0.1M的碱金属卤化物至约1M的碱金属卤化物。7.根据权利要求1所述的方法,其中所述盐水溶液包含约0.1M的NaCl至约1M的NaCl。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中在步骤A)中提供质粒DNA作为编码所述RNA的DNA,并且所述方法包括步骤A)之后的步骤:...
【专利技术属性】
技术研发人员:安德烈,
申请(专利权)人:库瑞瓦格房地产有限公司,
类型:发明
国别省市:
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