一种包含新型冠状病毒双抗原靶标序列组合的重组新城疫病毒载体及相应疫苗株和疫苗制造技术

本发明专利技术提供了一种包含新型冠状病毒双抗原靶标序列组合的重组新城疫病毒载体及相应疫苗株和疫苗，涉及生物医药技术领域。本发明专利技术利用NDV载体，新型冠状病毒S蛋白基因和S蛋白受体结合域RBD基因作为抗原序列，将S蛋白基因和RBD基因共同插入NDV基因组内，利用病毒反向遗传学技术，拯救获得具有限制感染性NDV病毒载体疫苗株。该疫苗株可以被呼吸道细胞识别，产生粘膜免疫，并感染细胞，引起特异性免疫抗体水平升高。本发明专利技术双抗原靶标的引入，增强了疫苗株免疫原性的发挥，同时降低了疫苗株毒副作用的产生，免疫效果相对于单靶标抗原更具优势。势。势。

【技术实现步骤摘要】
一种包含新型冠状病毒双抗原靶标序列组合的重组新城疫病毒载体及相应疫苗株和疫苗


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种包含新型冠状病毒双抗原靶标序列组合的重组新城疫病毒载体及相应疫苗株和疫苗。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒（SARS
‑
COV
‑
2）是一种新型β属冠状病毒，具有高传染性和高隐蔽性，可以通过多种途径，包括空气、食物等传播。新冠病毒的主要结构包括，单股正链核酸(ssRNA)、刺突蛋白(S)、膜蛋白(M)、包膜蛋白(E)和核壳蛋白(N)。其中，刺突S蛋白的RBD结构域是病毒识别宿主细胞膜受体蛋白ACE2蛋白的主要区域。S蛋白识别到细胞膜受体后，通过其S2结构域进入宿主细胞。所以，在研的新冠疫苗主要以S蛋白或者其RBD结构设计开发。
[0003]新城疫(Newcastle disease virus, NDV)病毒属于副粘病毒科Avulavirus属，是一种负链RNA病毒，其基因组包含N、P、M、F、HN和L六大基因以及非编码调控序列，以新城疫病毒为载体的重组病毒疫苗作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含新型冠状病毒双抗原靶标序列组合的重组新城疫病毒载体，所述双抗原靶标序列组合包括新型冠状病毒的S蛋白编码序列和S蛋白受体结合域RBD蛋白编码序列。2.根据权利要求1所述重组新城疫病毒载体，其特征在于，将所述新型冠状病毒的S蛋白编码序列插入新城疫病毒载体的P基因序列和M基因序列之间；将所述新型冠状病毒S蛋白受体结合域RBD蛋白编码序列插入新城疫病毒载体的P基因序列和M基因序列之间、M基因序列和F基因序列之间或HN基因序列和L基因序列之间。3.根据权利要求1或2所述重组新城疫病毒载体，其特征在于，所述S蛋白编码序列和RBD蛋白编码序列来源于相同或不同的新型冠状病毒流行株。4.根据权利要求3所述重组新城疫病毒载体，其特征在于，所述S蛋白编码序列包括完整的S蛋白编码序列或所述完整的S蛋白编码序列的变体。5.根据权利要求4所述重组新城疫病毒载体，其特征在于，所述变体包括对所述完整的S蛋白编码序列进行基因工程改造；所述基因工程改造的方法选自：突变、删除、重排和融合其他来源的蛋白多肽中一种或多种方法的组合；经所述基因工程改造后的S蛋白构象成为预融合状态更容易被抗原呈递细胞识别，或更多量地表达在细胞膜上，或经表达后分泌到细胞外并组合成易被抗原呈递细胞识别的多聚体。6.根据权利要求5所述重组新城疫病毒载体，其特征在于，所述突变包括将完整的S蛋白的K986和V987位氨基酸均突变为P，或将第682~685位氨基酸RRAR突变为GSAS，或将完整的S蛋白的K986、V987、F817、 A892、A899和A942位氨基酸均突变为P；或将S蛋白的C末端KLHYT突变为ALAYT；所述删除包括在所述完整的S蛋白的C末端截短18 ~28个氨基酸;或...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋家升，陈瑞婷，孙慧敏，毛水花，周孟云，
申请(专利权)人：浙江迪福润丝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：