【技术实现步骤摘要】
一种用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法
[0001]本专利技术涉及植物组织培养
,特别是涉及一种用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法。
技术介绍
[0002]植物组织培养的材料几乎包括了植物体的各个部位,如嫩芽、叶、子叶、茎段、鳞茎、花瓣和花药等。嫩芽不仅生长速度快,繁殖率高,不容易发生变异,而且是获得脱毒苗木的有效途径。因此,嫩芽是植物组织培养中常用的外植体。然而,若从野外直接采集嫩芽作外植体进行组培操作时,往往会遇到以下几个突出问题:(1)植物抽芽时间较短,从野外采集嫩芽极易错过最佳取样时间;(2)野外采集的嫩芽长时间运输后活性下降,组培效果不理想;(3)野外采集的嫩芽只能用一次,一旦不成功,又要再次采集,工作量大;(4)野外采集的嫩芽里内生菌较多,消毒困难,污染率高。
[0003]污染是植物组培过程中经常出现的问题,植物组织一旦污染,势必导致组培的失败。污染途径可分为外植体引入和非外植体引入。外植体引入的主要原因是外植体表面消毒不彻底或外植体内生菌较多;而非外植体引入主要原因有:接种室或超净工作台不清洁、接 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)选取二年生以上植物枝条,用自来水彻底洗净后晾干;(2)晾干的植物枝条,底端向下,并将所述植物枝条底端4
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6cm浸泡在生长溶液中静置处理1
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3h;其中所述生长溶液是将1
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萘乙酸(NAA)与乙醇按照(0.5
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2.5)g:(100
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300)mL配比溶解后,用蒸馏水稀释而成;(3)配制培养液,加入氨苄青霉素和庆大霉素溶液,将步骤(2)浸泡后的枝条转入培养液中,光照/黑暗交替密闭培养,获取不含内生菌嫩芽;其中所述培养液为:1/2MS培养基+8.5
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12g/L磷酸二氢钾,pH调至5.8
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6.2。2.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述植物枝条为早春植物抽芽长叶前选取的越冬休眠枝条。3.如权利要求1所述的用植物枝条诱导不含内生菌嫩芽的方法,其特征在于,步骤(1)中,用清水对所述植物枝条进行清洗干净后,将其放置于背阳通风处摊开晾干30
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40min。4.如权利要求1所述的用植物枝条诱导...
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