一种利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法技术

一种利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法，在取材时根据小麦幼穗直径进行筛选，选取幼穗直径为0.65

【技术实现步骤摘要】
一种利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法


[0001]本专利技术属于作物离体培养
，具体涉及一种利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法。

技术介绍

[0002]小孢子是植物的干细胞，具有很强的可塑性和再生能力；同时小孢子又是植物的生殖细胞，具有单细胞和单倍体的特性。利用小孢子的这些特性，可以进行植物生殖细胞发育、遗传分析、分子标记等理论基础研究；还可以应用于单倍体育种，通过一次纯合，加速育种进程，提高育种效率，来进行育种应用研究。
[0003]取得小孢子发育时期得当的材料，是开展游离小孢子培养的前提。目前小麦小孢子培养的取材多采用镜检判断或花药颜色判断的方法，此两种方法对实验室仪器要求和技术人员要求较高，不能人人通用。
[0004]在大麦上采用测量旗叶距的方法来衡量，但测量旗叶距方法无法应用于小麦材料上，因为适合小麦小孢子离体培养的材料取材时旗叶均已抽出。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法，通过小麦幼穗直径来定量取材，提高取材的效率和普遍性，操作简单，有效避免因需本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法，包括以下步骤：1)取材取旗叶抽出的小麦幼穗，只保留一片叶，选取直径为0.65
‑
0.74cm的幼穗；2)幼穗预处理将选取的幼穗保留幼穗基部长度1.0
‑
2.0cm，剪去叶片，置于保鲜袋中进行低温处理，处理温度为4
‑
6℃，处理时间为12
‑
21天；3)收集小孢子接种花药，高速旋切，游离收集小孢子，将收集到的小孢子在提取液中预处理1
‑
3天，预处理温度24
‑
28℃；其中，所述提取液含有甘露醇55
‑
65g
·
L
‑1，添加1
‑
1.2g
·
L
‑1CaCl2、0.9
‑
1.0g
·
L
‑1N
‑
吗啡乙烷磺酸和5
‑
15mg
·
L
‑1秋水仙碱，pH 5.6
‑
6.0；4)小孢子培养和愈伤组织诱导纯化预处理后的小孢子，再置于诱导培养基中培养，愈伤组织诱导形成。2.根据权利要求1所述利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法，其特征在于，步骤3)中，高速旋切时旋切速度为10000
‑
30000r
·
min
‑1，旋切2
‑
3次，每次10
‑
15秒。3.根据权利要求1所述利用小麦小孢子培养愈伤组织的方法，其特征在于，所述提取液中：甘露醇60g
·
L
‑1、CaCl
2 1.1g
·
L
‑1、N
‑
吗啡乙烷磺酸0.976g
·
L
‑1、秋水仙碱10mg
·
L
‑1，pH 5.8。4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭桂梅，何婷，李颖波，张述伟，宗营杰，高润红，徐红卫，黄琳丽，周龙华，陈志伟，陆瑞菊，刘成洪，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：