肽制造技术

公开了包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:8的片段的肽。该片段包含SEQ ID NO:8的至少8个连续氨基酸，包括SEQ ID NO:8的121和135位中的至少一个。或者，所述片段包含SEQ ID NO:3的6至13位且所述肽包含不超过21个氨基酸，所述片段包含SEQ ID NO:3的7至22位且所述肽包含不超过40个氨基酸，或所述片段包含SEQ ID NO:3的18至33位，并且所述肽包含不超过33个氨基酸。或者，所述片段包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列，并且所述肽包含不超过21个氨基酸并且用于治疗和/或预防癌症。所述肽能够诱导针对TGFβR2

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肽


[0001]本专利技术提供用于引发免疫应答的具有移码突变的TGBβR2肽、包含用于引发免疫应答的具有移码突变的TGBβR2肽的肽混合物、对此类肽特异的T细胞、以及T细胞混合物和包含对此类肽特异的T细胞的T细胞制剂。本专利技术还涉及包含此类肽、肽混合物、T细胞和T细胞混合物和制剂的药物制剂，此类肽、肽混合物、T细胞和T细胞混合物以及制剂用于预防和/或治疗癌症的用途，以及选择肽、肽混合物、T细胞、T细胞混合物和T细胞制剂用于治疗癌症的方法。

技术介绍

[0002]DNA微卫星是一串重复的DNA，其中某些DNA基序(核苷酸序列模式)重复，通常大约5到50次。微卫星不稳定性(MSI)是微卫星重复次数的变化，可由受损的DNA错配修复(MMR)酶活性引起。
[0003]MMR纠正DNA复制过程中自发发生的错误，例如单碱基错配或短插入或缺失。当MMR活性受损时，这些自发性错误无法修复，这会导致微卫星不稳定(即重复次数的变化)和DNA微卫星序列中的移码突变。
[0004]移码突变是向基因中添加或从基因中缺失一个或两个碱基对，导致不同的密码子，因此，从突变点开始编码不同的蛋白质。移码通常会导致蛋白质序列被截短，因为终止密码子过早出现，并且编码的蛋白质通常有缺陷或无活性。
[0005]近年来，免疫肿瘤学一直是发展中的领域，其工作重点是利用患者自身的免疫系统来对抗癌症。然而，一个问题是抗体只能与暴露在肿瘤细胞表面的肿瘤抗原结合。出于这个原因，基于身体免疫系统的产生癌症治疗的努力没有预期的那么成功。
[0006]TGFβR2(SEQ ID NO:1)是一种生长因子，它与TGFβ的相互作用介导细胞生长的控制。TGFβR2中的移码突变使其失去生物学功能，从而诱导不受控制的细胞生长和癌症进展。单核苷酸缺失是迄今为止TGFβR2中最主要的移码突变，尽管也有可能发生单个核苷酸添加。由单核苷酸缺失(
‑
1a)移码突变产生的TGFβR2的氨基酸序列示于SEQ ID NO:2中。
[0007]癌症(例如结直肠癌(CRC))中MSI的检测是通过分析贝塞斯达小组(Bethesda panel)进行的，贝塞斯达小组是包含五个微卫星基因座的参考小组(panel)：两个单核苷酸(BAT25和BAT26)和三个二核苷酸(D5S346、D2S123和D17S250)(Cortes
‑
Ciriano et al.,Nature Communications,2017,vol.8,文章编号15180；Vilar&Gruber,Nat Rev Clin Oncol,2010,vol.7(3),p.153
‑
162)。当两个或更多基因组存在不稳定时，MSI被归类为高(MSI
‑
H)，当一个基因座存在不稳定时，MSI被归类为低(MSI
‑
L)(Vilar&Gruber,Nat Rev Clin Oncol,2010,vol.7(3),p.153
‑
162)。当没有不稳定的基因座时，微卫星可以归类为稳定(MSS)(Vilar&Gruber，Nat Rev Clin Oncol，2010，vol.7(3)，p.153
‑
162)。
[0008]大约15％的CRC是MSI
‑
H；Cortes
‑
Ciriano et al.，Nature Communications，2017，vol.8，文章编号15180)，99％的遗传性CRC(遗传性非息肉性结肠直肠癌(HNPCC))是MSI
‑
H(Pinheiro el al.,British Journal of Cancer,2015,vol.113,p.686
‑
692)。在
MSI
‑
H HNPCC患者中，大约90％的患者的蛋白质TGFβR2具有移码突变(Pinheiro el al.,British Journal of Cancer,2015,vol.113,p.686
‑
692)。HNPCC患者具有体细胞突变，预期会发展为移码突变。CRC之前通常会出现息肉，但与没有遗传性CRC的患者不同，从遗传性CRC患者身上去除息肉对于预防癌症无效。
[0009]此外，大约22％的胃癌(胃癌)是MSI
‑
H(Cortes
‑
Ciriano et al.,Nature Communications,2017,vol.8,文章编号15180)。
[0010]此外，据报道，在所有CRC的约10％、所有MSI
‑
H癌症的约44％，特别是约58％的MSI
‑
H结肠癌和约80％的MSI
‑
H胃癌的TGFβR2中发现了移码突变(Cortes
‑
Ciriano et al.,Nature Communications,2017,vol.8，文章编号15180)。
[0011]已报道具有移码突变的TGFβR2的肽具有免疫原性，尽管报道的结果存在不一致，如下文进一步讨论的。
[0012]EP1078000公开了使用源自BAX和TGFβR2基因移码突变的蛋白质片段通过引发T细胞免疫来治疗癌症。
[0013]Linnebacher等(Int J Cancer,2001,93,p.6
‑
11)报道，源自具有移码突变的蛋白质的三种肽能够在体外激活特定的CTL(HLA
‑
A2.1限制性)，包括具有
‑
1a移码突变的TGFβR2肽(本文称为FSP02：RLSSCVPVA；SEQ ID NO:10)。该肽还能够裂解带有相应移码突变的结直肠癌细胞系HCT116。然而，
‑
1a移码的TGFβR2的另外两种肽没有激活CTL。
[0014]Saeterdal等(Cancer Immunol Immunother,2001Nov,50(9),469
‑
476)报道了具有移码突变的TGFβR2肽(RLSSCVPVA(在Saeterdal等，Cancer Immunol Immunother中标记为p573)；本文中的SEQ ID NO:10)能够产生CTL系和数个CTL克隆。一个CTL克隆能够杀死携带移码TGFβR2的HLA
‑
A2+结肠癌细胞系。
[0015]Saeterdal等(PNAS,2001Nov 6,98(23),13255
‑
13260)报道了源自具有移码突变的TGFβR2的高免疫原性肽(标记为p538；SLVRLSSCVPVALMSAMTSSSQ(SEQ ID NO:11))作为MSI+肿瘤中浸润Th细胞的肿瘤靶标。该肽被三名患有自发性MSI+结肠癌的患者中的两人以及所有三名患有HNPCC的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.包含SEQ ID NO:8的片段的肽，其中所述片段包含SEQ ID NO:8的至少8个连续氨基酸，包括SEQ ID NO:8的121和135位中的至少一个，其中所述肽能够诱导针对TGFβR2
‑
1a移码突变蛋白的免疫应答。2.根据权利要求1的肽，其中所述片段包含SEQ ID NO:8的至少9个，优选至少12个连续氨基酸，包括SEQ ID NO:8的121和135位中的至少一个。3.根据权利要求1或2的肽，其中所述片段仅包含SEQ ID NO:8的121和135位中的一个。4.根据前述权利要求中任一项的肽，其中所述片段包含SEQ ID NO:8的121至132位、SEQ ID NO:8的129至137位或SEQ ID NO:8的135至146位。5.根据前述权利要求中任一项的肽，其中对应于SEQ ID NO:8的121或135位的氨基酸是甘氨酸。6.根据前述权利要求中任一项的肽，其中所述肽包含SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:28或SEQ ID NO:30的氨基酸序列，优选地其中所述肽由SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:28或SEQ ID NO:30组成。7.根据前述权利要求中任一项的肽，其中所述肽包含不超过33个氨基酸，优选不超过24个氨基酸，优选不超过20个氨基酸，优选不超过17个氨基酸或优选不超过9个氨基酸。8.包含SEQ ID NO:2的片段的肽，其中所述片段包含：i)SEQ ID NO:3的6至13位，所述肽包含不超过21个氨基酸；ii)SEQ ID NO:3的7至22位且所述肽包含不超过40个氨基酸；或者iii)SEQ ID NO:3的18至33位，且所述肽包含不超过33个氨基酸；其中所述肽能够诱导针对TGFβR2
‑
1a移码突变体的免疫应答。9.根据权利要求8的肽，其中所述片段包含SEQ ID NO:3的6至15位、SEQ ID NO:3的2至22位或SEQ ID NO:3的16至33位，优选其中所述肽包含SEQ ID NO:3的序列。10.根据权利要求8或9的肽，其中所述肽包含SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:26的序列，优选其中所述肽由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:26组成。11.根据权利要求8至10中任一项的肽，其中所述肽：i)包含SEQ ID NO:3的6至13位并且包含不超过20个氨基酸或优选不超过17个氨基酸；或者ii)包含SEQ ID NO:3的7至22位并且包...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔恩，
申请(专利权)人：休博治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：