一种转氨酶及使用其进行催化制备的方法技术

本发明专利技术提供了一种转氨酶及使用其进行催化制备的方法，本申请中的转氨酶具有如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。此外，使用本申请中的转氨酶还能催化一种化合物C的制备方法，其包括如下步骤：在pH＝7.5～9.0的缓冲液中，在转氨酶、氨基供体和磷酸吡多醛存在下，将化合物B进行如下所示的转氨化反应得化合物C即可；所述转氨酶具有如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；R1、R2、R3、R4和R5分别独立地为H、卤素、C1‑

【技术实现步骤摘要】
ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
[0012]R1、R2、R3、R4和R5分别独立地为H、卤素、C1‑
C3烷基、C1‑
C3烷氧基或CN。
[0013]在某一方案中，所述的化合物B里，某些基团的定义可如下所述，其余基团的定义如上任一方案所述：(针对此表述，以下简称在某一方案中)
[0014]在卤素中，所述的卤素优选氟、氯、溴或碘，更优选氟或氯。
[0015]在某一方案中：在C1‑
C3烷基中，所述的C1‑
C3烷基优选甲基、乙基、正丙基或异丙基，更优选甲基。
[0016]在某一方案中：在C1‑
C3烷氧基中，所述的C1‑
C3烷氧基优选甲氧基、乙氧基、正丙氧基或异丙氧基，更优选甲氧基。
[0017]在某一方案中：R1为H、卤素或CN，优选H、氟、氯或CN，更优选H。
[0018]在某一方案中：R2为H、C1‑
C3烷基或CN，优选H、甲基或CN，更优选H。
[0019]在某一方案中：R3为H、卤素、C1‑
C3烷氧基或CN，优选H、氟本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种化合物C的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：在pH＝7.5～9.0的缓冲液中，在转氨酶、氨基供体和磷酸吡多醛存在下，将化合物B进行如下所示的转氨化反应得化合物C即可；所述转氨酶具有如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；R1、R2、R3、R4和R5分别独立地为H、卤素、C1‑
C3烷基、C1‑
C3烷氧基或CN。2.如权利要求1所述的化合物C的制备方法，其特征在于，在卤素中，所述的卤素为氟、氯、溴或碘，优选氟或氯；和/或，在C1‑
C3烷基中，所述的C1‑
C3烷基为甲基、乙基、正丙基或异丙基，优选甲基；和/或，在C1‑
C3烷氧基中，所述的C1‑
C3烷氧基为甲氧基、乙氧基、正丙氧基或异丙氧基，优选甲氧基。3.如权利要求1所述的化合物C的制备方法，其特征在于，R1为H、卤素或CN，优选H、氟、氯或CN，更优选H；和/或，R2为H、C1‑
C3烷基或CN，优选H、甲基或CN，更优选H；和/或，R3为H、卤素、C1‑
C3烷氧基或CN，优选H、氟、氯、甲氧基或CN，更优选CN；和/或，R4为H、C1‑
C3烷基或CN，优选H、甲基或CN，更优选H；和/或，R5为H、卤素或CN，优选H、氟、氯或CN，更优选H。4.如权利要求1所述的化合物C的制备方法，其特征在于，所述的化合物B为如下任一方案：方案一：R1为H、卤素或CN；R2为H、C1‑
C3烷基或CN；R3为H、卤素、C1‑
C3烷氧基或CN；R4为H、C1‑
C3烷基或CN；R5为H、卤素或CN；方案二：R1为H；R2为H、C1‑
C3烷基或CN；R3为H、卤素、C1‑
C3烷氧基或CN；R4为H、C1‑
C3烷基或CN；R5为H；方案三：R1为H；R2为H；
R3为H、卤素、C1‑
C3烷氧基或CN；R4为H；R5为H；较佳地，所述的化合物B为如下任一化合物：较佳地，所述的化合物B为如下任一化合物：5.如权利要求1～4中任一项所述的化合物C的制备方法，其特征在于，在所述的转氨化反应中，所述的pH＝8.0；和/或，在所述的转氨化反应中，所述的缓冲液为磷酸氢二钠
‑
磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钾
‑
磷酸二氢钾缓冲液、Tris
‑
HCl缓冲液或HEPES缓冲液；和/或，所述的转氨化反应还进一步包含加酸维持反应体系的pH的步骤，所述的酸例如盐酸、磷酸或硫酸；和/或，在所述的转氨化反应中，所述的氨基供体为NH2C1‑
C6烷基，所述的C1‑
C6烷基例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基或叔丁基，优选异丙基；和/或，所述的转氨化反应还进一步包含助溶剂，所述的助溶剂例如砜类溶剂，优选二甲基亚砜；所述的化合物B与所述的助溶剂的质量体积比可为0.1g/mL～1.0g/mL，例如0.5g/mL；和/或，在所述的转氨化反应中，所述的磷酸吡多醛与所述的化合物B的质量比为0.01:1～0.1:1，例如0.01:1或0.02:1；和/或，在所述的转氨化反应中，所述的转氨酶与所述的化合物B的质量比为0.1:1～1.0:1，例如0.1:1、0.2:1或0.5:1；和/或，在所述的转氨化反应中，反应温度为30～45℃，例如40℃或45℃；和/或，在所述的转氨化反应中，反应时间为2h～80h，优选4h～39.5h；和/或，在所述的转氨化反应中，所述的化合物B与所述的缓冲液中水的质量体积比为1.0g/L～80g/L，例如1.1g/L～54g/L；和/或，在所述的转氨化反应中，所述的转氨化反应包含如下步骤：在缓冲液中，加入所述的氨基供体和酸调节pH至7.5
‑
9.0，所述的化合物B溶于助溶剂中加入，再加入所述的转...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐大林，孙丰来，李杰，张家浩，刘阳，朱景仰，
申请(专利权)人：上海合全药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：