【技术实现步骤摘要】
一种基于PARMS技术的纳升级超高通量SNP基因分型方法
[0001]本专利技术涉及分子生物学
,具体为一种基于PARMS技术的纳升级超高通量SNP基因分型方法。
技术介绍
[0002]SNP,全称Single Nucleotide Polymorphisms,是指在基因组上单个核苷酸的变异而引起的一种DNA序列多态性,即单核苷酸多态性。SNP研究具有重要的生物学意义和广泛的应用,在农业领域中,可以进行性状基因的精细定位、分子辅助育种、种子资源鉴定等;在医学领域或临床应用中,主要有疾病的分子遗传机制研究、疾病基因定位、肿瘤及癌症筛查、药物敏感或疾病易感位点筛查等。
[0003]SNP基因分型技术原理是PCR扩增含有SNP的基因组片段,主要特点是准确性高、灵活性强、通量大,目前实验室主要采用的方法有 TaqMan探针法、KASP技术。TaqMan探针法是针对基因组上的不同SNP 位点分别设计PCR引物和能够识别单个核苷酸差异位点的TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增,通过探针的荧光标记来识别SNP位点。 KA ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于PARMS技术的纳升级超高通量SNP基因分型方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、准备PARMS试剂,按照说明书进行引物稀释及混合,配制成Primer mix试剂;S2、将样本按照一定的浓度均一化;S3、准备1块384孔板,标注为Sample板,按照MSND 96Samples*54As says模式要求,每孔加入2
×
PARMS master mix,均一化样本,然后补水到一定量;S4、将Sample板进行离心,放在MSND上384孔板放置区,取1块空芯片放置在芯片载台上,自动分配样本到芯片孔内,完成后芯片封中间膜,在合适的温度条件下进行离心,芯片需要在一定的温度条件下保存;S5、准备1块384孔板,标注为Assay板,按照MSND 96Samples*54Ass ays模式要求,每孔加入2
×
PARMS master mix,Primer mix,2%BSA,50mM MgCl2,然后补水到一定量;S6、将Assay板进行离心,放在MSND上384孔板放置区,取步骤4的芯片,撕掉中间膜放置在芯片载台上,MSND自动分配试剂到芯片孔内,完成后芯片封qPCR膜,在合适的温度条件下进行离心后,qPCR上机检测;S7、qPCR完成后,软件会自动分析出SNP分型结果。2.根据权利要求1所述的一种基于PARMS技术的纳升级超高通量SNP基因分型方法,其特征在于:所述步骤S2中的样本浓度为10ng/μl。3.根据权利要求1所述的一种基于PARMS技术的纳升级超高通量SN...
【专利技术属性】
技术研发人员:张茹松,李西清,张鸿,赵琨,
申请(专利权)人:安徽微分基因科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。