一种大鼠静止态胰腺星状细胞的提取方法技术

本发明专利技术公开一种大鼠静止态胰腺星状细胞的提取方法，包括以下步骤：S1、配制DMEM/F12培养基；S2、将大鼠胰腺充分剪碎；S3、将胰腺组织块涂布在细胞培养皿底部培养1

【技术实现步骤摘要】
一种大鼠静止态胰腺星状细胞的提取方法


[0001]本专利技术涉及生物医学
，具体的是一种大鼠静止态胰腺星状细胞的提取方法。

技术介绍

[0002]静止态的胰腺星状细胞具有干细胞性质但含量极少，具有重要的科研价值和临床转化价值。现有提取方法是密度梯度离心法，即采用碘海醇作为离心介质，配制两种不同密度的溶液，利用静止态胰腺星状细胞密度稍小的原理，通过密度梯度离心获得该细胞。但该方法具有明显的问题，首先其操作复杂难以掌握，需要采用三种酶配成的混合液将胰腺消化成单细胞，消化时间长了细胞易死亡，消化时间短了无法得到单细胞进行离心；其次，由于静止态胰腺星状细胞并不比其它细胞轻很多，采用密度梯度离心法得到的细胞产率低且混有其它细胞类型；第三，上述方法所使用的三种酶和细胞级别碘海醇的价格都较为昂贵。

技术实现思路

[0003]为解决上述
技术介绍
中提到的不足，本专利技术的目的在于提供一种大鼠静止态胰腺星状细胞的提取方法，采用该方法提取静止态胰腺星状细胞可实现操作简单、产率高、成本低廉的目标。
[0004]本专利技术的目的可以通过以下本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大鼠静止态胰腺星状细胞的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、配制含有胎牛血清和青链霉素的DMEM/F12培养基；S2、采用手术方法得到新鲜的大鼠胰腺，使用步骤S1的DMEM/F12培养基将胰腺冲洗2
‑
4遍，再将大鼠胰腺充分剪碎；S3、将胰腺组织块涂布在细胞培养皿底部，将涂布好的培养皿底朝上倒扣在培养箱中培养1
‑
3h；S4、取出培养皿，向培养皿中加入步骤S1的DMEM/F12培养基，放回培养箱中培养24
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48h；S5、除去培养基，使用PBS润洗一遍后除去PBS，向培养皿加入胰蛋白酶，浸润组织块后立刻除去胰蛋白酶；S6、将培养皿放入培养箱中孵育80
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120s，向培养皿中加入步骤S1的DMEM/F12培养基终止消化，轻柔吹打3
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5次，将静止态胰腺星状细胞吹打悬浮；S7、将步骤S6的细胞悬浮...

【专利技术属性】
技术研发人员：林昊，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：