谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717及其表面展示系统和构建方法技术方案

技术编号:31482859 阅读:29 留言:0更新日期:2021-12-18 12:17
本发明专利技术公开了一种谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717及其表面展示系统和构建方法。该谷氨酸棒杆菌壁蛋白Ncgl0717的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,该谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717在谷氨酸棒杆菌中表达量较高,可将其用于构建高展示效率的谷氨酸棒杆菌表面展示系统。本发明专利技术中的谷氨酸棒杆菌表面展示系统是以所述的谷氨酸棒杆菌壁蛋白Ncgl0717为锚定蛋白,将靶蛋白固定在谷氨酸棒杆菌细胞表面构成的。本发明专利技术丰富了谷氨酸棒杆菌表面展示系统的内源锚定蛋白的表达种类。蛋白的表达种类。蛋白的表达种类。

【技术实现步骤摘要】
谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717及其表面展示系统和构建方法


[0001]本专利技术属于生物
,特别涉及一种谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717及其表面展示系统和构建方法。

技术介绍

[0002]微生物细胞表面展示技术是利用基因工程手段通过多肽片段(或蛋白质结构域)将目的片段以融合蛋白形式在微生物表面进行展示的新型基因工程技术,具体而言,是一种通过锚定蛋白将蛋白质或多肽固定在细胞表面的技术,被展示的多肽或蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性。微生物细胞表面展示系统包括宿主菌、锚定蛋白和靶蛋白,有时在锚定蛋白和靶蛋白之间也添加一段连接(linker)序列。微生物细胞表面展示在多肽分离、全细胞催化剂、全细胞吸附剂、疫苗和抗体生产、蛋白文库筛选、生物传感器、生物修复等方面都有广阔的应用前景。
[0003]目前在微生物表面展示系统中应用比较多的宿主菌主要有噬菌体(Bacteriophages)、酿酒酵母(Saccharomy cescerevisiae)、革兰氏阴性菌(大肠杆菌(Escherichia.Coli)等)、和革兰氏阳性菌(谷氨酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717,其特征在于:氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.编码权利要求1所述谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717的基因,其特征在于:核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。3.权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717作为锚定蛋白在表面展示系统中的应用,其特征在于:所述的表面展示系统为谷氨酸棒杆菌细胞表面展示系统。4.一种谷氨酸棒杆菌细胞表面展示系统,其特征在于:是以权利要求1所述的谷氨酸棒杆菌壁蛋白Ncgl0717为锚定蛋白,将靶蛋白固定在谷氨酸棒杆菌细胞表面构成的。5.根据权利要求4所述的谷氨酸棒杆菌细胞表面展示系统,其特征在于:所述的靶蛋白为荧光蛋白或淀粉酶中的任意一种。6.根据权利要求5所述的谷氨酸棒杆菌细胞表面展示系统,其特征在于:所述的靶蛋白为增强绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白或α

淀粉酶。7.权利要求4~6任一项所述的谷氨酸棒杆菌细胞表面展示系统的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将编码权利要求1所述谷氨酸棒杆菌蛋白Ncgl0717的基因克隆到表达载体的表达盒中,得到以谷氨酸棒杆菌壁蛋白Ncgl0717为锚定蛋白的表面展示表达载体;(2)将靶蛋白的基因序列克隆到步骤(1)中得到的表面展示表达载体的谷氨酸棒杆菌壁蛋白Ncgl0717的基因序列的上游,与所述谷氨酸棒杆菌壁蛋白Ncgl0717的基因形成融合基因;(3)转...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑穗平林珂瑞韩双艳林影
申请(专利权)人:华南理工大学
类型:发明
国别省市:

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