一种亚硝酸盐的快速定性和半定量检测剂及其检测方法技术

本发明专利技术涉及亚硝酸盐检测技术领域，具体为一种亚硝酸盐的快速定性和半定量检测剂及其检测方法。该凝胶型检测剂包括凝胶载体和检测剂；所述的凝胶载体为海藻酸丙二醇酯，所述的检测剂为对氨基苯乙酮，盐酸萘乙二铵，苹果酸，三乙胺盐酸盐的混合物,以下简称为DTRT。海藻酸丙二醇酯(PGA)是一种良好的凝胶载体；DTRT可与PGA结合制备成凝胶比色管；凝胶剂具有类似钟乳石簇状立体结构，增大了界面反应表面积，5min内可完成检测，适用于亚硝酸盐的快速定性和半定量。凝胶比色管通过Photoshop CS2对颜色进行量化并制作比色卡，该检测方法具有良好的抗干扰能力和高度的专一选择性。良好的抗干扰能力和高度的专一选择性。良好的抗干扰能力和高度的专一选择性。

【技术实现步骤摘要】
一种亚硝酸盐的快速定性和半定量检测剂及其检测方法


[0001]本专利技术涉及亚硝酸盐检测
，具体为一种亚硝酸盐的快速定性和半定量检测剂及其检测方法。

技术介绍

[0002]亚硝酸盐主要指亚硝酸钠，外观及滋味都与食盐相似。亚硝酸盐含量超标对人类有害，因此亚硝酸盐被广泛认为是一种危害物。亚硝酸盐来源较多，比如在蔬菜种植过程中，氮肥的使用是其硝酸盐积累的重要因素之一，氮肥用量越高，蔬菜中硝酸盐含量就越高。蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量因其种属和部位不同而有所差异；硝酸盐含量的变化受蔬菜生长期、采收时间、储存条件和储存时间的影响，硝酸盐含量生长前期>后期>成熟期，硝酸盐和亚硝酸盐的含量通常为叶柄＞叶＞茎＞根＞花序＞块茎＞球茎＞果实＞种子。硝酸盐在蔬菜自身硝酸还原酶作用下被还原成亚硝酸盐、NO等含氮物，以维持自身氮循环。此外，当采摘后的蔬菜贮存3天左右时，植物体内硝酸还原酶活性会增加，从而导致亚硝酸盐加速生成，冻藏6个月后，硝酸盐含量会明显减少。
[0003]微生物的作用也会硝酸盐含量积累，比如人类饮食过程中，硝酸盐可通过唾液腺中的主动转运在唾液中迅速积累，5％的硝酸盐在唾液和肠胃中会被还原为亚硝酸盐，对于转化率较高的个体可达20％；再比如，蔬菜在腌渍过程中，大部分硝酸盐会被硝酸还原菌产生的硝酸还原酶还原为亚硝酸盐，使得亚硝酸盐会在短期内大量积累，形成亚硝峰。
[0004]另外，亚硝酸盐还用于肉制品中，起到发色、抑菌防腐、增强风味的作用，是一种被限量使用的食品添加剂。亚硝酸盐极易与肉中的胺类物质形成致癌亚硝胺，所以现在寻求其替代品。
[0005]随着我国腌渍蔬菜的产业发展规模及发展趋势，亚硝酸盐含量的快速检测是其进出口贸易和质量安全评价的必要环节，因此研究专用于腌渍蔬菜的亚硝酸盐快速检测方法，有利于提质控耗，在现场实时快速检测中具有很大的应用市场和实用前景。可以为家庭、企业和食品监督部门降低检测成本，提高效率，为亚硝酸盐的快速测定提供新途径等。
[0006]目前部分亚硝酸盐的快速检测试剂盒具有较高的检出限、假阳性、保质期短等缺点。特别是发酵蔬菜类食品，由于其酸性较强，且含有食品添加剂或色素等成分，容易造成屏蔽和干扰，因此，研发一种解决以上问题的检测方法势在必行。

技术实现思路

[0007]本专利技术正是针对以上技术问题，提供一种基于比色原理，以界面反应形式对亚硝酸盐快速定性和半定量的凝胶比色管。该方法中采用的凝胶比色管，具有类似钟乳石簇状立体结构，增大了界面反应表面积，5min内可完成检测，检测范围广，适用于亚硝酸盐的快速定性和半定量，且具有良好的抗干扰能力和高度的专一选择性，保存期限长。
[0008]为了实现以上专利技术目的，本专利技术的具体技术方案如下：
[0009]一种对亚硝酸盐快速定性和半定量测定的凝胶型检测剂，该凝胶型检测剂包括凝
胶载体和检测剂；所述的凝胶载体为海藻酸丙二醇酯，所述的检测剂为对氨基苯乙酮，盐酸萘乙二铵，苹果酸，三乙胺盐酸盐的混合物。
[0010]作为优选，凝胶载体的质量g和检测剂的体积mL的比例关系为0.2
‑
0.5:10
‑
12，更优选为 0.25:11；对氨基苯乙酮与盐酸萘乙二铵的体积比为3:1
‑
5:1，更优选为4:1，对氨基苯乙酮的浓度为7g/L，盐酸萘乙二铵的浓度为0.4g/L；三乙胺盐酸盐在检测剂中的含量为8
‑
12％，更优选为12％；苹果酸的浓度为0.5
‑
0.7mol/L，更优选为0.6mol/L。
[0011]利用所述凝胶型检测剂制备凝胶比色管的方法，包括以下步骤：
[0012]1)按比例称取各凝胶型检测剂的原料。
[0013]2)将海藻酸丙二醇酯放于烧杯中，加入水后加热边搅拌至海藻酸丙二醇酯溶解完全；作为优选，水的添加量为15mL；加热时间为12min。
[0014]3)将步骤2)中溶解后的溶液趁热加入检测剂，搅拌均匀后立即分装至1.5mL的EP管中，当温度降至常温，凝胶定型后密封保存，得到凝胶比色管。
[0015]利用前述方法得到的凝胶比色管对亚硝酸盐进行快速定性和半定量检测的方法，该检测方法基于比色原理，以凝胶比色管和界面反应形式对亚硝酸盐进行快速定性和半定量检测。
[0016]作为优选，该方法具体包括以下具体步骤：
[0017]向含1mL凝胶剂的凝胶比色管中加入0.1mL亚硝酸盐溶液，待凝胶剂界面由无色变为紫红色，一段时间后，用相机记录颜色，再利用Photoshop CS2吸取界面颜色，制作标准比色卡，将亚硝酸盐显色结果与比色卡上对应的数值比对即可快速定性和半定量转换为灰度模式，将颜色的深浅进行量化，根据灰度与亚硝酸盐含量的关系曲线即可对亚硝酸盐定量。
[0018]作为优选，该方法的灰度值为39.21
±
0.36％；显色所需时间为23
±
3s；检测时间为5 min，适用于亚硝酸盐的快速定性和半定量。
[0019]作为优选，凝胶剂中添加0.05％的聚维酮K
‑
30(是凝胶检测剂的保护剂，是否需要在前面成分组成处介绍聚维酮K
‑
30)，可在4℃避光下保存150d以上。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0021](一)、海藻酸丙二醇酯(PGA)是一种良好的凝胶载体；DTRT可与PGA结合制备成凝胶比色管；凝胶剂具有类似钟乳石簇状立体结构，增大了界面反应表面积，5min内可完成检测，适用于亚硝酸盐的快速定性和半定量。
[0022](二)、凝胶比色管通过Photoshop CS2对颜色进行量化并制作比色卡，该检测方法具有良好的抗干扰能力和高度的专一选择性。
[0023](三)、该凝胶比色管的线性检测范围为0.3～9μg/mL，即3～90mg/kg，检出限为0.3 μg/mL，即3mg/kg。凝胶剂中添加0.05％的聚维酮K
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30(是凝胶检测剂的保护剂，是否需要在前面成分组成处介绍聚维酮K
‑
30)，可在4℃避光下保存150d以上。
[0024](四)、凝胶比色管适用于腌渍蔬菜中亚硝酸盐风险等级的初步评估。
附图说明
[0025]图1为亚硝酸盐的比色测定流程示意图
[0026]图2为琼脂和PGA形成的凝胶持水力、溶胀率和硬度的结果柱状示意图
[0027]图3
‑
1为PGA的质量对凝胶硬度(a)、显色所需时间(b)、灰度(c)的影响结果图
[0028]图3
‑
2为水体积对凝胶硬度(a)、显色所需时间(b)、灰度(c)的影响结果图
[0029]图3
‑
3为DTRT的体积对凝胶硬度(a)、显色所需时间(b)、灰度(c)的影响结果图
[0030]图3
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4为加热时间对凝胶硬度(a本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种对亚硝酸盐快速定性和半定量测定的凝胶型检测剂，其特征在于：该凝胶型检测剂包括凝胶载体和检测剂；所述的凝胶载体为海藻酸丙二醇酯，所述的检测剂为对氨基苯乙酮，盐酸萘乙二铵，苹果酸，三乙胺盐酸盐的混合物。2.如权利要求1所述对亚硝酸盐快速定性和半定量测定的凝胶型检测剂，其特征在于：凝胶载体的质量g和检测剂的体积mL的比例关系为0.2
‑
0.5:10
‑
12；检测剂中对氨基苯乙酮与盐酸萘乙二铵的体积比为3:1
‑
5:1，三乙胺盐酸盐在检测剂中的含量为8
‑
12％，苹果酸的浓度为0.5
‑
0.7mol/L。3.利用如权利要求1或权利要求2所述的凝胶型检测剂制备凝胶比色管的方法，其特征在于包括以下步骤：1)按比例称取各凝胶型检测剂的原料；2)将海藻酸丙二醇酯放于烧杯中，加入水后加热边搅拌至海藻酸丙二醇酯溶解完全；3)将步骤2)中溶解后的溶液趁热加入检测剂，搅拌均匀后立即分装至1.5mL的EP管中，当温度降至常温，凝胶定型后密封保存，得到凝胶比色管。4.利用如权利要求3所述方法得到的凝胶比色管...

【专利技术属性】
技术研发人员：左勇，祝元婷，杨建飞，胡琨，
申请(专利权)人：四川师范大学，
类型：发明
国别省市：