从人多能干细胞获得眼野祖细胞的方法技术

本发明专利技术涉及从hPSC获得眼野祖细胞的方法，所述眼野祖细胞适合进一步分化为例如视网膜色素上皮细胞和/或神经视网膜细胞。该方案提供了具有目的细胞高产量的简单方法，并且有助于转化为GMP合规性。于转化为GMP合规性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】从人多能干细胞获得眼野祖细胞的方法


[0001]本专利技术涉及从人多能干细胞(hPSC)有效获得眼野(eye field)祖细胞的方法，其中所述眼野祖细胞可用于进一步提供用于治疗眼部状况的分化细胞。本专利技术还涉及眼野祖细胞的体外细胞群体及其在治疗眼部状况中的用途。该方案提供了简单、有效的方法，同时也有助于转化为良好生产规范(GMP)合规性。
[0002]序列表的援引并入
[0003]本申请与电子形式的序列表一起提交。该序列表的全部内容通过引用并入本文。
[0004]背景
[0005]世界卫生组织估计全世界有3.14亿人有视力损害，其中2.69亿人视力低下，4500万人失明(Resnikoff S.,2008)。这些眼科病症中的一些是白内障、年龄相关性黄斑变性(AMD)、青光眼、角膜失明和色素性视网膜炎(RP)。
[0006]AMD是一种影响视网膜黄斑区的疾病，其导致中央视力的进行性丧失。AMD的确切发病机理尚未完全阐明，但似乎已经确定，视网膜色素上皮发生萎缩，随后是重要的视网膜结构如神经视网膜细胞的变性，从而导致严重的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.从人多能干细胞获得眼野祖细胞的方法，其包括以下步骤：
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培养所述人多能干细胞以获得分化细胞，以及
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使所述分化细胞与BMP5(SEQ ID NO:1)接触，其中让所述分化细胞分化为眼野祖细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述眼野祖细胞是眼睛的不同细胞谱系的多种祖细胞，包括但不限于视杯祖细胞，如RPE祖细胞和NR祖细胞、晶状体祖细胞和角膜祖细胞。3.从人多能干细胞获得眼野祖细胞的方法，其包括以下步骤：
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将所述人多能干细胞接种在用基质包被的基底上，
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在细胞培养基中培养所述人多能干细胞，以获得分化细胞，
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使所述分化细胞与Small Mothers Against Decapentaplegic(SMAD)蛋白信号传导抑制剂接触，以及
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使所述分化细胞与BMP5(SEQ ID NO:1)接触，其中让所述分化细胞分化为眼野祖细胞。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中使所述分化细胞与BMP5(SEQ ID NO:1)接触。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中BMP5的浓度为约0.1ng/ml至约2500ng/ml，优选约100ng/ml至约500ng/ml，更优选约150ng/ml至约450ng/ml，甚至更优选约200ng/ml至约400ng/ml。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中使所述分化细胞与选自GW788388、LDN
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193189、LY2157299、LY364947、NOGGIN、RepSOX、SB431542和TEW
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7197的Small Mothers Against Decapentaplegic(SMAD)蛋白信号传导抑制剂接触。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述Small Mothers...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：诺和诺德股份有限公司，
类型：发明
国别省市：