一种远缘杂交离体授粉的育种方法技术

本发明专利技术公开了一种远缘杂交离体授粉的育种方法，属于育种技术领域，包括如下步骤：(1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间；(2)制备无菌胚珠；(3)制备无菌花粉；(4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；(5)授粉之后进行无菌培养。本申请方法是远缘有性杂交、离体授粉技术与组培技术的交叉育种方法。主要的方式是离体胚珠授粉，即离体培养未受精的胚珠，并在胚珠上进行授粉，最终在培养室内形成无菌的植株幼体。终在培养室内形成无菌的植株幼体。终在培养室内形成无菌的植株幼体。

【技术实现步骤摘要】
一种远缘杂交离体授粉的育种方法


[0001]本专利技术属于育种
，具体涉及一种远缘杂交离体授粉的育种方法。

技术介绍

[0002]随着核果及仁果类育种工作的深入，种内遗传资源的日益枯竭，使得某些优良性状基因的缺乏，种内资源进行常规育种难以取得很大突破。远缘杂交可以拓宽植物遗传资源，是种质资源创新最有效的途径之一。
[0003]在进行远缘杂交育种是常规的方式是通过人工授粉完成。往往存在受精前障碍和受精后障碍，其中受精前障碍普遍存在花粉或者雌蕊不亲和的问题，花粉管端会产生胼胝质导致无法受精、生理性落果、病虫害等问题，取得杂交种子的成本较高，且成功率较低。
[0004]在常规的远缘杂交育种中，用桃子做母本会100％落果，因此考虑用离体的方式进行育种。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对现有的问题，提供了一种远缘杂交离体授粉的育种方法。
[0006]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0007]一种远缘杂交离体授粉的育种方法，包括如下步骤：
[0008](1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间；
[0009](2)制备无菌胚珠；
[0010](3)制备无菌花粉；
[0011](4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；
[0012](5)授粉之后进行无菌培养。
[0013]进一步地，步骤(1)中所述的制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间，整个过程需要在花粉寿命之内完成。<br/>[0014]本申请所用到的培养基为专利公开号CN111642399A一种适用于车厘子与李子杂交品种微体繁殖的培养基所记录的配方。
[0015]本申请所使用的品种及材料为专利公开号CN112056206A一种蔷薇科李亚科跨属杂交育种的方法所记录的品种。
[0016]本专利技术相比现有技术具有以下优点：
[0017]1、本申请方法是远缘有性杂交、离体授粉技术与组培技术的交叉育种方法。主要的方式是离体胚珠授粉，即离体培养未受精的胚珠，并在胚珠上进行授粉，最终在培养室内形成无菌的植株幼体。
[0018]2、相比传统的有性杂交，本申请有效克服了远缘杂交受精前障碍，提高了得到杂种种子或杂种胚的概率，通过后续微体嫁接或高枝嫁接，降低了育种成本及周期。
[0019]3、本申请方法是远缘有性杂交、离体授粉技术及组培技术的交叉方法，后续可发展为体细胞融合育种，在亲缘关系较远。无法进行有性杂交时，可比如将苹果亚科与李亚科
下的品种，进行细胞融合育种。
附图说明
[0020]图1为本申请远缘杂交离体授粉的育种方法的流程图。
具体实施方式
[0021]一种远缘杂交离体授粉的育种方法，包括如下步骤：
[0022](1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间，所有工作需在花粉寿命之内完成；
[0023](2)制备无菌胚珠；
[0024](3)制备无菌花粉；
[0025](4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；
[0026](5)授粉之后进行无菌培养。
[0027]为了对比本申请技术效果，申请人于2020年，开展，用车厘子花粉与桃胚珠进行授粉，并得到了杂种胚。
[0028]具体试验为：
[0029](1)2020年2月25日，取车厘子花粉；
[0030](2)2月26日取桃子花蕾的胚珠：
[0031](3)2月26日晚，离体受精；
[0032](4)3月2日得到杂种胚；
[0033](5)3月5日，转至蔗糖为8％，额外添加赤霉酸；
[0034](6)3月12日，转至蔗糖6％的培养基；
[0035]以上均为遮阴处理；
[0036](7)3月28日，杂种胚褐化；
[0037](8)4月3日，杂种胚死亡。
[0038]也即，通过本申请方法可以成功获得桃和车厘子的杂交胚，在继续培养中褐化、死亡的原因可能是光照、激素浓度的控制，以及杂交胚亲缘较远，从而导致杂交胚难以存活。
[0039]以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，但本专利技术不以所示限定实施范围，凡是依照本专利技术的构想所作的改变，或修改为等同变化的等效实施例，仍未超出说明书所涵盖的精神时，均应在本专利技术的保护范围内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种远缘杂交离体授粉的育种方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间；(2)制备无菌胚珠；(3)制备无菌花粉；(4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢伟明，黄嘉威，李志钧，
申请(专利权)人：禄劝普林生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：