一种快速鉴定和定量肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR引物组及试剂盒制造技术

本发明专利技术属于生物技术检测领域，具体涉及一种快速鉴定和定量肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR引物组及试剂盒，所述PCR引物组中包括用于分别检测lygD基因和invA基因的引物对，进一步的，所述PCR引物组中包括1)第一引物对：包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物与核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的下游引物；2)第一探针引物：核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；3)第二引物对：包括核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的上游引物与核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的下游引物；4)第二探针引物：核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。所述试剂盒中包括所述引物组。本发明专利技术的试剂盒能快速高通量鉴定和定量肠炎沙门菌，可替代传统沙门菌血清学分型和生化鉴定等复杂程序。和生化鉴定等复杂程序。

【技术实现步骤摘要】
一种快速鉴定和定量肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR引物组及试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物技术检测领域，特别是涉及一种快速鉴定和定量肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR引物组及试剂盒。

技术介绍

[0002]沙门菌病是公共卫生学上有重要意义的传染病之一，是食源性细菌性肠炎的主要原因之一，大多数沙门菌感染病例是由于食用受污染的食物或水所致，例如猪肉、牛肉、家禽和鸡蛋。在众多血清型沙门菌中，肠炎沙门菌是导致人类严重感染的最重要病原体之一。肠炎沙门菌感染人体后会引起胃肠炎、腹泻、呕吐甚至严重全身性感染。肠炎沙门菌能够在蛋清中存活进而污染蛋制品，导致重大经济和健康负担。
[0003]传统的沙门菌血清分型是基于Kauffman
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White通过细菌表面O和H抗原的特异性抗血清进行鉴定。尽管这种方法应用广泛，但由于需要传统的基于培养的方法，因此这种方法相对昂贵、工作量大且耗时较长。因此准确的鉴定方法对于沙门菌病的防控至关重要，因此建立一种流行沙门菌血清型快速准确的鉴定方法可以促进常规监测和公共卫生安全。聚合酶链式反应(P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测肠炎沙门菌的PCR引物组，其特征在于，所述PCR引物组中包括用于分别检测lygD基因和invA基因的引物对。2.根据权利要求1所述的PCR引物组，其特征在于，所述PCR引物组中包括以下中的任一项或多项：1)第一引物对：包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物与核苷酸序列如SEQID NO:2所示的下游引物；2)第一探针引物：核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；3)第二引物对：包括核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的上游引物与核苷酸序列如SEQID NO:5所示的下游引物；4)第二探针引物：核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。3.根据权利要求2所述的PCR引物组，其特征在于，所述第一探针引物和第二探针引物5
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端标记有不同的荧光报告基团，3
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端标记有不同的荧光淬灭基团。4.权利要求1
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3任一所述的PCR引物组在制备lygD基因和invA基因检测产品中的用途。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述lygD基因和invA基因检测产品为肠炎沙门菌鉴定或定量产品。6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述肠炎沙门菌鉴定或定量产品为试剂盒。7.一种检测肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1
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3任一所述的PCR引物组。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括水、Premix Ex TaqMaster、ROX Reference Dye II、阳性对照DNA、阴性对照DNA、样品基因组DNA提取试剂中的一种或多种。9.权利要求1
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3任一所述的引物组或权利要求7所述的试剂盒在鉴定和定量检测肠炎沙门菌中的用途。10.一种肠炎沙门菌的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括如下步骤：1)配制PCR反应体系：利用权利要求7或8所述的探针法双重荧光定量PCR检测试剂盒和待测样品的基因组DNA配制PCR反应体系；2)PCR反应：将配...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦新安，潘志明，熊丹，宋丽，周懿，刘博闻，顾丹，康喜龙，孟闯，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：