一种联合检测EGFR基因突变的试剂和试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了联合检测EGFR基因突变的试剂和试剂盒，涉及生物技术领域。本发明专利技术所述试剂盒采用ARMS技术与Tagman探针相结合的方法，可解决市面上试剂盒不能检测C797S和T790M顺反式突变问题。本发明专利技术所述试剂盒，基于荧光PCR技术平台，检测范围广、灵敏度和准确度高，可同时检测包括19号外显子缺失，20号外显子插入突变，21号外显子L858R替代突变，T790M耐药突变以及L861Q，G719X，S768I，C797S等罕见突变的检测。利用本发明专利技术所述试剂盒进行检测时，检测速度快，判读简单，检测费用低。检测费用低。检测费用低。

【技术实现步骤摘要】
一种联合检测EGFR基因突变的试剂和试剂盒


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种联合检测EGFR基因突变的试剂和试剂盒。

技术介绍

[0002]靶向治疗是随着肿瘤基因分子生物学的研究而出现的，通过基因研究，医学界最终确认肿瘤是由于人体内发生突变的细胞导致的。肿瘤相关的基因主要包含：癌基因、肿瘤抑制基因、肿瘤耐药基因以及与肿瘤转移相关的基因等。靶向治疗是指在细胞分子水平上，通过基因检测，设计出相应的治疗药物，药物进入身体后识别靶点，识别后直接作用于目标器官上，使肿瘤细胞特异性死亡，而不会波及肿瘤周围的正常组织。靶向药物不是对所有的肿瘤患者都有疗效，临床结果显示：不经筛选而使用靶向药物，平均有效率仅为30～40％。因此在服用靶向药物前，需进行基因检测来进行靶向药物筛选。常用的基因检测方法有测序法和PCR法等，通过现代科技手段找出癌症的突变基因，针对特定基因突变，选择相应的对症药物，特异的阻断突变信号，杀死癌细胞，提升治疗效果，实施精准、合理的个体化治疗。很多靶向药物已经在临床起了极其重要的作用，正是由于靶向治疗的涌现使很多乳腺癌、肺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种联合检测EGFR基因突变的试剂，其特征在于，所述试剂包括根据EGFR基因突变位点设计的特异性引物对；所述EGFR基因突变位点包括：T790M、L858R、19号外显子缺失、G719X、20号外显子插入、S768I、L861Q、C797S和C797S
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T790M。2.根据权利要求1所述试剂，其特征在于，所述试剂还包括根据EGFR基因突变位点设计的特异性探针。3.根据权利要求2所述试剂，其特征在于，针对T790M设计的特异性引物对包括T790M
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F和T790M
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R，针对T790M设计的特异性探针包括T790M
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P，所述T790M
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F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述T790M
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R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述T790M
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P的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；针对L858R设计的特异性引物对包括L858R
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F和L858R
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R，针对L858R设计的特异性探针包括L858R
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P，所述L858R
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F的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述L858R
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R的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述L858R
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P的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；针对19号外显子缺失设计的特异性引物对包括19del
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F1、19del
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F2、19del
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F3、19del
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F4、19del
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F5、19del
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F6和19del
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R，针对19号外显子缺失设计的特异性探针包括19del
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P，所述19del
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F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述19del
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F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述19del
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F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述19del
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F4的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述19del
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F5的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述19del
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F6的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述19del
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R的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述19del
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P的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示；针对G719X设计的特异性引物对包括G719X
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F1、G719X
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F2、G719X
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F3和G719X
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R，针对G719X设计的特异性探针包括G719X
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P；所述G719X
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F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述G719X
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F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述G719X
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F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示，所述G719X
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R的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，所述G719X
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P的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示；针对20号外显子插入设计的特异性引物对包括20INS
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F1、20INS
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F2和20INS
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R，针对20号外显子插入设计的特异性探针包括20INS
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P，所述20INS
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F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示，所述20INS
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F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示，所述20INS
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R的核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示，所述20INS
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P的核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示；针对S768I设计的特异性引物对包括S768I
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F和S768I
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R，针对S768I设计的特异性探针包括S768I
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P，所述S768I
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F的核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示，所述S768I
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R的核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示，所述S768I
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P的核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示；针对L861Q设计的特异性引物对包括L861Q
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F和L861Q
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R，针对L861Q设计的特异性探针包括L861Q
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P，所述L861Q
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F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：宗莹，赵明玉，牛力，
申请(专利权)人：北京乐土医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：