南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱及其构建方法和鉴别方法组成比例

本发明专利技术属于中药鉴别技术领域，具体涉及南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱及其构建方法和鉴别方法。该构建方法包括供试品溶液的制备，并且在特定洗脱梯度条件下检测，得到南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒的特征图谱。本发明专利技术采用高效液相色谱法对南葶苈子配方颗粒和/或北葶苈子配方颗粒的有效成分进行检测，以乙腈为流动相A，以体积分数为0.1

【技术实现步骤摘要】
南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱及其构建方法和鉴别方法


[0001]本专利技术属于中药鉴别
，具体涉及南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱及其构建方法和鉴别方法。

技术介绍

[0002]葶苈子为十字花科植物播娘篙Descurainia sophia(L.)Webb，exPrantl.或独行菜Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟种子。前者习称“南葶苈子”，后者习称“北葶苈子”。本品具有泻肺平喘，行水消肿的功能，用于痰涎壅肺，喘咳痰多，胸胁胀满，不得平卧，胸腹水肿，小便不利。据考证，葶苈子始载于《神农本草经》，列为下品，为中医临床常用中药。《中国药典》2015年版规定葶苈子的原植物为南葶苈子或北葶苈子。
[0003]目前，法定标准仅对南葶苈子药材控制项相对全面，且标准仅以槲皮素
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龙胆双糖苷成分进行定性、定量分析，不利于药材的质量控制。另外，法定标准对北葶苈子的性状、显微及检查项进行了标准限定。现有技术中对葶苈子药材研究的较多，传统性状鉴定和显微鉴定时常用的基源鉴定方法，如采用显微镜观察种子石蜡切片，结果显示北葶苈子扁卵形，较大，另端尖而微凹，聚纵沟2条，其中1条较明显，表面具颗粒状突起，粘液层厚，纤维素柱较短；南葶苈子长圆形略扁，较小，另端较平截，表面具细密的网纹突起，粘液层薄，纤维素柱较长。还有采用色谱法鉴别南葶苈子和易混淆品车前子以及南葶苈子与北葶苈子药材，另有采用分子生物学手段鉴别南北葶苈子药材与混伪品。
[0004]然而上述方法都是针对南北葶苈子药材，而葶苈子配方颗粒由于失去了药材的原有外观性特征，是由葶苈子饮片经过提取、浓缩、干燥、制剂等步骤得到的配方颗粒，其物质基础与药材的物质基础存在较大的差异，而关于葶苈子配方颗粒领域几乎没有任何可以进行基源鉴定的方法。
[0005]王爱芹等人发表的文献《南葶苈子HPLC指纹图谱的测定》中提供了一种南北葶苈子药材的指纹图谱的测定方法，但是该测定方法的检测时间长，各特征峰间的分离度差，不能对葶苈子配方颗粒进行准确鉴别。

技术实现思路

[0006]因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中南北葶苈子药材特征图谱测定时间长、特征峰分离度差，不能对南北葶苈子配方颗粒进行有效鉴别等缺陷，从而提供了一种南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱及其构建方法和鉴别方法。
[0007]为此，本专利技术提供了以下技术方案。
[0008]本专利技术提供了一种南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱的构建方法，包括以下步骤，
[0009]供试品溶液的制备：取南葶苈子配方颗粒供试品制备得到南葶苈子配方颗粒供试品溶液；和/或，取北葶苈子配方颗粒供试品制备得到北葶苈子配方颗粒供试品溶液；
[0010]高效液相色谱法：将南葶苈子配方颗粒供试品溶液和/或北葶苈子配方颗粒供试品溶液注入液相色谱仪，检测，即得；
[0011]其中，高效液相色谱法的色谱条件包括：以乙腈为流动相A，以体积分数为0.1
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0.3％的含酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱条件如下：0
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2min，6
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8％流动相A，94
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92％流动相B；2
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5min，8％流动相A，92％流动相B；5
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17min，8
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10％流动相A，92
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90％流动相B；17
‑
27min，10
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18％流动相A，90
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82％流动相B；27
‑
34min，18
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30％流动相A，82
‑
70％流动相B。
[0012]所述含酸水溶液选自醋酸水溶液和/或磷酸水溶液；优选为醋酸水溶液。
[0013]所述色谱条件还包括：柱温为30
‑
40℃；流速为0.1
‑
0.4ml/min；所述检测波长为255
‑
270nm。
[0014]进一步地，在所述南葶苈子配方颗粒供试品溶液或北葶苈子配方颗粒供试品溶液的制备过程中包括采用第一溶剂对供试品进行提取、过滤，取滤液的步骤；
[0015]优选地，采用第一溶剂为体积分数为50
‑
80％甲醇水溶液；所述提取的方式为加热回流或超声提取；
[0016]更优选地，第一溶剂为体积分数为70％甲醇水溶液，提取的方式为超声提取；
[0017]每1ml溶剂提取的供试品质量为0.01
‑
0.03g。
[0018]更具体地，取南葶苈子配方颗粒供试品溶液或北葶苈子配方颗粒供试品，精密称定，加70％甲醇，超声提取，补足减失重量，滤过，取续滤液，得到供试品溶液。
[0019]所述构建方法还包括采用槲皮素
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葡萄糖
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β
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龙胆双糖苷和/或异槲皮苷制备对照品溶液的步骤，以及按照上述高效液相色谱法检测对照品溶液得到对照品特征图谱的步骤；
[0020]所述对照品溶液的制备还包括如下步骤：取槲皮素
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葡萄糖
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龙胆双糖苷对照品，加第二溶剂，制成每1ml对照品溶液含10
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30μg槲皮素
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葡萄糖
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龙胆双糖苷的对照品溶液A；
[0021]取异槲皮苷对照品，加第二溶剂，制成每1ml对照品溶液含10
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30μg异槲皮苷的对照品溶液B；
[0022]所述第二溶剂为体积分数为20
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40％的甲醇水溶液，优选为体积分数为30％的甲醇水溶液。
[0023]所述构建方法还包括参照物溶液的制备，以及按照上述高效液相色谱法检测参照物溶液得到对照药材的特征图谱的步骤；
[0024]南葶苈子参照物溶液的制备方法包括，取葶苈子(播娘蒿)对照药材，经提取、过滤得到南葶苈子参照物溶液的步骤；具体地，取葶苈子(播娘蒿)对照药材粉末，精密称定，加70％甲醇，超声提取，补足减失重量，滤过，取续滤液，得到葶苈子(播娘蒿)参照物溶液。
[0025]北葶苈子参照物溶液的制备方法包括，取葶苈子(独行菜)对照药材，经提取、过滤得到北葶苈子参照物溶液的步骤。具体地，取葶苈子(独行菜)对照药材粉末，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤，供试品溶液的制备：取南葶苈子配方颗粒供试品制备得到南葶苈子配方颗粒供试品溶液；和/或，取北葶苈子配方颗粒供试品制备得到北葶苈子配方颗粒供试品溶液；高效液相色谱法：将南葶苈子配方颗粒供试品溶液和/或北葶苈子配方颗粒供试品溶液注入液相色谱仪，检测，即得；其中，高效液相色谱法的色谱条件包括：以乙腈为流动相A，以体积分数为0.1
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0.3％的含酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱条件如下：0
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2min，6
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8％流动相A，94
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92％流动相B；2
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5min，8％流动相A，92％流动相B；5
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17min，8
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10％流动相A，92
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90％流动相B；17
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27min，10
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18％流动相A，90
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82％流动相B；27
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34min，18
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30％流动相A，82
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70％流动相B。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述含酸水溶液选自醋酸水溶液和/或磷酸水溶液；优选为醋酸水溶液。3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述色谱条件还包括：柱温为30
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40℃；流速为0.1
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0.4ml/min；所述检测波长为255
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270nm。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的构建方法，其特征在于，在所述南葶苈子配方颗粒供试品溶液或北葶苈子配方颗粒供试品溶液的制备过程中包括采用第一溶剂对供试品进行提取、过滤，取滤液的步骤；优选地，采用第一溶剂为体积分数为50
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80％甲醇水溶液；所述提取的方式为加热回流或超声提取；更优选地，第一溶剂为体积分数为70％甲醇水溶液，提取的方式为超声提取；每1ml溶剂提取的供试品质量为0.01
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0.03g。5.根据权利要求1
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4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括采用槲皮素
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葡萄糖
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龙胆双糖苷和/或异槲皮苷制备对照品溶液的步骤，以及按照权利要求1或2所述的高效液相色谱法检测对照品溶液得到对照品特征图谱的步骤；所述对照品溶液的制备还包括如下步骤：取槲皮素
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【专利技术属性】
技术研发人员：张志强，吉艳慧，史国华，付静，安琪，
申请(专利权)人：北京康仁堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：