【技术实现步骤摘要】
用于无抗生素发酵制备低分子量物质和蛋白质的微生物菌株和方法
[0001]本申请是2018年6月11日提交的题为“用于无抗生素发酵制备低分子量物质和蛋白质的微生物菌株和方法”的中国专利申请201580085273.3 的分案申请。
[0002]本专利技术涉及用于无抗生素发酵生产低分子量物质和蛋白质的微生物菌株和方法。
[0003]首要地,借助于微生物的低分子量物质的自然生产已经增多,重组蛋白药物(“生物制剂”)的市场近年来也呈现强劲增长。由于发酵生产(特别是对于基于蛋白质的活性药物成分)中的高成本压力,正在寻求更有效且因此更具成本效益的用于其生产的方法和系统。各种微生物,如细菌、酵母、丝状真菌或其它植物细胞或动物细胞均可用作生产者。在此,从经济角度来看至关重要的是经济有效的发酵、高产物产量及在蛋白质的情况中的获得功能性蛋白质的正确折叠和/或修饰。由于其经广泛研究的遗传学和生理学、短的传代时间和简便处理,革兰氏阴性肠杆菌大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)是目前最常用于生产低分子量物质和蛋白质的生物体。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于生产低分子量物质或蛋白质的微生物菌株,其基因组中含有基因中的突变,该突变在菌株中引起营养缺陷,所述菌株还含有编码至少一种酶或者至少一种重组蛋白以及所述基因的功能性拷贝的生产质粒,所述酶用于生产低分子量物质,所述基因的染色体失活引起营养缺陷,特征在于营养缺陷是不可补足的营养缺陷,且所述基因是plsC基因或其同源基因。2.权利要求1的微生物菌株,特征在于在菌株中引起不可补足的营养缺陷的基因突变导致所述基因失活。3.权利要求1或2的微生物菌株,特征在于在所述菌株中引起不可补足的营养缺陷的基因突变导致所述基因编码的基因产物的活性失活。4.产生权利要求1
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3任一项的微生物菌株的方法,特征在于将温度敏感型质粒导入微生物菌株,其具有能够通过突变或缺失转变为在菌株中引起不可补足的营养缺陷的基因的基因,所述温度敏感型质粒具有待突变或缺失的基因的功能性拷贝,然后突变所述菌株的基因组,由此...
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