泡叶藻萃取物用于提升皮肤弹性的用途制造技术

本发明专利技术提供一种泡叶藻萃取物用于提升皮肤弹性的用途，其中，泡叶藻萃取物是以溶剂萃取泡叶藻而获得。取泡叶藻而获得。取泡叶藻而获得。

【技术实现步骤摘要】
泡叶藻萃取物用于提升皮肤弹性的用途
[0001]本申请为申请人根据母案申请(申请号：201810445513.1，专利技术名称：泡叶藻萃取物用于调节基因群组表现的用途)所提出的分案申请。


[0002]本专利技术涉及泡叶藻萃取物的用途，特别是关于一种泡叶藻萃取物用于提升皮肤弹性的用途。

技术介绍

[0003]皮肤是人体隔绝外界环境中的伤害，例如紫外线、病原体、摩擦力等，与防止水分流失的第一道防线。皮肤由外向内依序包含表皮层、主要由结缔组织构成的真皮层、及皮下组织。表皮层是皮肤的最外层并且不断更新。表皮层与真皮层间存在持续分裂的细胞(如纤维母细胞、角质细胞、黑色素细胞)，该些细胞的活动对紫外线非常敏感。真皮层含有胶原蛋白(collagen)、弹力蛋白(elastin)、及玻尿酸(hyaluronic acid)，其赋予肌肤弹性和支撑力量。随着年龄增长，皮肤会出现皱纹、细纹、松弛、凹陷、毛孔粗大等老化现象。这些皮肤老化现象的形成与诸多因素有关，例如暴露于高量的紫外线(主要是紫外线A)会使胶原蛋白或弹力蛋白受损，真皮层内的胶原蛋白、弹力蛋白、及玻尿酸等分子的含量随年龄增加而减少，这些因素皆会降低皮肤饱满度与弹性。
[0004]市面上用以改善前述皮肤老化现象的方法包含使用防晒品以减少紫外线所致皮肤老化，直接注射胶原蛋白或玻尿酸至真皮层，及以口服方式补充胶原蛋白或玻尿酸等。然而，防晒品含有的化学物质可能引发光敏性，以致该些化学物质与紫外线的结合对皮肤产生不良影响，例如皮疹或更严重的晒伤。此外，注射至皮肤的胶原蛋白或玻尿酸易随时间被体内酵素分解，导致必须定期施打该些物质，成本高昂。以口服方式补充胶原蛋白或玻尿酸会造成该些大分子在肠胃道中被消化为小分子的胺基酸或单醣，尽管身体能利用这些胺基酸或单醣合成蛋白质或多醣，但不必然形成胶原蛋白或玻尿酸，因此补充胶原蛋白或玻尿酸的实质效果有限。
[0005]有鉴于此，开发一种成分天然又能有效保护皮肤免于紫外线伤害及推迟皮肤老化的新颖组成物，实有其必要。

技术实现思路

[0006]缘此，本专利技术的一目的在提供一种泡叶藻(Ascophyllumnodosum)萃取物用于制备提升皮肤弹性的组合物的用途，其中该泡叶藻萃取物是以一溶剂萃取一泡叶藻而获得。
[0007]在本专利技术的一实施例中，该泡叶藻萃取物促进玻尿酸合成酶3(HAS3)、、赖胺酰氧化酶(LOX)、或其组合的基因表现，而提升皮肤弹性。
[0008]在本专利技术的一实施例中，该泡叶藻萃取物抑制基质金属蛋白酶2(MMP2)的基因表现，而提升皮肤弹性。
[0009]在本专利技术的一实施例中，该溶剂为水、醇类、或醇水混合物，该溶剂与该泡叶藻的
Chemical公司购买二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，简称DMSO)。
[0023]细胞培养
[0024]以下实施例使用初代人类表皮角质细胞(human epidermal karatinocyte)HPEK
‑
50(CELLnTEC，瑞士)及人类皮肤纤维母细胞(human skin fibroblast)CCD
‑
966SK(BCRC 60153)进行实验。HPEK
‑
50在37℃、5％二氧化碳的条件下培养于SFM培养基。CCD
‑
966SK细胞在37℃、5％二氧化碳的条件下培养于添加10％FBS、0.1mM非必需胺基酸、1.5g/L碳酸氢钠、1mM丙酮酸钠的MEM培养基，以下称细胞培养基。
[0025]基因表现量分析
[0026]细胞中特定基因的表现量是利用定量聚合酶链锁反应(quantitative polymerase chain reaction，简称qPCR)技术测定，其步骤简述如下。依据厂商使用说明，以核糖核酸萃取套组(RNA Extraction Kit；Geneaid)自细胞分离出RNA后，于37℃下以反转录酶III Reverse Transcriptase(Invitrogen)将RNA反转录为互补脱氧核醣核酸(cDNA)。其后，利用qPCR套组(KAPA CYBR FAST qPCR Kit(2X)；KAPA Biosystems)以及目标基因与作为内部对照的甘油醛3
‑
磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3
‑
phosphate dehydrogenase，GAPDH)基因的引物对(表1)在PCR反应仪(Applied Biosystems StepOnePlus
TM Real
‑
Time PCR Systems；Thermo Fisher Scientific)对该cDNA进行PCR，以取得各基因的解链曲线(melting curve)及循环阈值(CT)。
[0027]表1
[0028][0029][0030]最终，使用2
‑
ΔΔCT
方法测定目标基因的相对表现量。所谓相对表现量定义为实验组的一目标基因相对于控制组的同一基因的RNA表现量倍数变化。该方法以GAPDH基因的循环阈值作为内部对照的参考基因的循环阈值，按照以下公式计算倍数变化：
[0031]ΔC
T
＝实验组或控制组的目标基因的C
T
‑
内部对照的C
T
[0032]ΔΔC
T
＝实验组的ΔC
T
‑
控制组的ΔC
T
[0033]倍数变化＝2
‑
ΔΔCt平均值
[0034]MTT分析
[0035]细胞存活率或增生率是以MTT分析测定。简言之，将MTT溶液(4mg/ml MTT溶于PBS溶液)依15μl/孔添加至96孔盘中的细胞，于37℃反应4小时。移除反应液后，将DMSO依50μl/孔添加至细胞并震荡反应10分钟以溶解所生成的甲臜(formazan)结晶。最终，使用ELISA读盘机(enzyme
‑
linked immunosorbent assay reader；BioTek)测量该细胞混合物在570nm的吸光值(O.D.570)。
[0036]统计分析
[0037]统计上显著差异是以Excel软件的学生t检定判定。
[0038]实施例1
[0039]泡叶藻萃取物的制备
[0040]首先，将泡叶藻洗净，并且以例如切割、研磨等方式将其处理为适当大小，再以水、醇类、或醇水混合物为溶剂对该经处理的泡叶藻进行萃取。该溶剂较佳为水，且该溶剂与泡叶藻的液固比5～20：1～5。萃取温度为介于50℃～100℃，较佳为80℃～95℃。本实施例中萃取时间为0.5～3小时。
[0041]经上述萃取步骤所得泡叶藻萃取物冷却至室温后，可以400目(mesh)的滤网过滤，以移除残余固体物。该过滤后的泡叶藻萃取物可进一步在45℃～70℃进行减压浓缩而获得一浓缩产物。为获得固态的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种泡叶藻萃取物用于制备提升皮肤弹性的组合物的用途，其特征在于，其中所述泡叶藻萃取物是以一溶剂萃取一泡叶藻而获得。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述泡叶藻萃取物促进玻尿酸合成酶3(HAS3)、赖胺酰氧化酶(LOX)、或其组合的基因表现，而提升皮肤弹性。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述泡叶藻萃取物抑制基质金属蛋白酶2(MMP2)的基因表现，而提升皮肤弹性。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述溶剂为水、醇类、或醇水混合...

【专利技术属性】
技术研发人员：林咏翔，林于婷，
申请(专利权)人：大江生医股份有限公司，
类型：发明
国别省市：