本发明专利技术公开了一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，包括以下操作步骤：S1：取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存，S2：将冷冻保存的肿瘤细胞取出加入培养液并转入培养瓶中进行培养，S3：将培养后的肿瘤细胞从培养瓶取出并植入瘤源动物体内，S4：选取接种后7至12天且生长状态良好的瘤源动物颈椎脱臼处死，消毒操作部位的皮肤，切开皮肤，剥离出接种用的瘤块。该标准化肿瘤动物模型的建立方法，通过将生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，而且可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。起到了细胞保种的作用。起到了细胞保种的作用。
【技术实现步骤摘要】
一种标准化肿瘤动物模型的建立方法及培养装置
[0001]本专利技术涉及肿瘤动物模型的建立领域，特别涉及一种标准化肿瘤动物模型的建立方法及培养装置。
技术介绍
[0002]恶性肿瘤是危害人类健康的最大杀手，全世界科学家一直在尝试找到对抗恶性肿瘤的最佳治疗方法。肿瘤研究一直是全世界最为关注的领域。目前的肿瘤基础研究领域包括体外对肿瘤细胞的研究和体内对肿瘤动物模型的研究，目前最常用的肿瘤动物模型为小鼠模型，建立肿瘤模型的方法主要有细胞悬液注射法、细胞悬液凝胶混合注射法和组织块移植法等模型建立方法，现有的这些肿瘤动物模型建立方法还存在着细胞存活率低、细胞损失多、成瘤率不一致、需要细胞数量大、成瘤时间不稳定，同时培养所用的培养装置不便于更滑培养液、不能确保恒温恒湿密封的环境等缺点，于是亟需一种标准化肿瘤动物模型的建立方法及培养装置。
技术实现思路
[0003]本专利技术的主要目的在于提供一种标准化肿瘤动物模型的建立方法及培养装置，可以有效解决
技术介绍
中的问题。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，包括以下操作步骤：S1：取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存；S2：将冷冻保存的肿瘤细胞取出加入培养液并转入培养瓶中进行培养；S3：将培养后的肿瘤细胞从培养瓶取出并植入瘤源动物体内；S4：选取接种后7至12天且生长状态良好的瘤源动物颈椎脱臼处死，消毒操作部位的皮肤，切开皮肤，剥离出接种用的瘤块；S5：从剥离出的接种用的瘤块中剔除非肿瘤组织和坏死组织，选取生长良好而无变性坏死、淡红色、鱼肉装的瘤组织在无菌平皿内并剪成2立方毫米的小块，无菌平皿放置于冰块上，然后加入营养液培养一段时间；S6：将培养一段时间后的瘤块用无菌套管针抽吸瘤块，然后接种与同种受体动物的腋窝皮下；S7：观察肿瘤细胞在受体动物体内内的生长情况。
[0005]优选的，所述取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存是指对对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞进行胰蛋白酶消化、离心、洗涤，并用含7份培养液、2份小牛血清、1份DMSO配成细胞悬液，然后放置进入细胞冻存管中，再将细胞冻存管于4摄氏度放置30分钟、
‑
20摄氏度放置4小时、
‑
70摄氏度过夜放置，然后放置入液氮中进行冷冻保存。
[0006]优选的，所述冷冻保存的肿瘤细胞取出需要迅速放入38至40摄氏度的水浴中并且不停的摇动使其在一分钟内全部融化，然后在离心5分钟除去上清液，然后再加入培养液，
转入培养瓶，转入培养瓶内后通过把手转动密封隔温盖并打开密封隔温盖，然后通过两个便捷拉环将培养瓶提入恒温恒湿的密封培养筒体的内腔，并且使两个插柱分别插设进入两个插槽的内腔，然后再通过把手将密封隔温盖进行密封，最后晃动底座带动培养瓶在密封培养筒体的内腔进行晃动，使培养瓶内腔中的液体混合均匀，之后培养48小时。
[0007]优选的，所述观察肿瘤细胞在受体动物体内内的生长情况是指术后一周开始观察受体动物的腋窝皮处的肿块大小及变化，绘制肿瘤生长曲线，术后2周进行活体成像观察成瘤情况，术后4周处死受体动物，取肿瘤组织行微型CT检查和病例切片观察肿块大小情况验证肿瘤组织。
[0008]一种标准化肿瘤动物模型的培养装置，包括底座，所述底座的顶部设置有密封培养筒体，所述密封培养筒体的内侧壁体设置有隔温层，所述隔温层的内侧壁体设置有内层，所述密封培养筒体的顶部设置有密封隔温盖，所述密封隔温盖的顶部正中设置有把手，所述密封培养筒体的内腔设置有培养瓶，所述培养瓶的顶部设置有密封瓶口，所述培养瓶的正面中部壁体纵向设置有刻度线，所述密封培养筒体的正面壁体镶嵌设置有透明观察片，所述密封培养筒体中部的左右侧壁对称固定连接有固定块，两个所述固定块的顶部正中壁体对称开设有插槽，两个所述插槽的内腔底部对称纵向固定连接有弹簧，所述培养瓶上端的左右侧壁对称固定连接有连接块，两个所述连接块的顶部对称纵向固定连接有连接柱，两个所述连接柱的顶部分别固定连接有便捷拉环，两个所述连接块的底部正中对称固定连接有插柱。
[0009]优选的，所述培养瓶的底部与密封培养筒体内腔的底部不同不接触。
[0010]优选的，两个所述插柱分别插设于两个插槽的内腔，并且两个插柱的底部与两个弹簧的顶部接触。
[0011]优选的，两个所述连接块的底部与两个固定块的顶部壁体不接触。
[0012]优选的，两个所述连接柱为圆柱状，并且两个连接柱的上端分别位于培养瓶内腔上端的左右两侧。
[0013]优选的，所述密封隔温盖的内腔侧壁与密封培养筒体的上端侧壁通过螺纹连接。
[0014]有益效果与现有技术相比，本专利技术提供了一种标准化肿瘤动物模型的建立方法及培养装置，具备以下有益效果：1、该标准化肿瘤动物模型的建立方法，通过将生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验，而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用，通过在受体动物的腋窝皮下进行接种是因为腋窝部皮肤松弛，能允许肿瘤生长的较大，宿主动物的寿命也可延长，同时还可以减少接种时间，通过选取生长良好而无变性坏死、淡红色、鱼肉装的瘤组织在无菌平皿内并剪成2立方毫米的小块并放置于冰块上培养，可细胞流失少，成瘤率高，成瘤均一稳定，大大减少建模所需的细胞数量和建模成本。
[0015]2、该标准化肿瘤动物模型的建立方法的培养装置，通过设置的密封培养筒体、密封隔温盖以及隔温层可为培养工作提供一个恒温恒湿的密封环境，便捷拉环、连接柱、连接块、插柱、插槽、固定块的设置方便培养瓶的取放，从而方便更换培养液，弹簧的设置不仅可
对装置本体起到缓冲保护作用，同时便于培养瓶的晃动而晃动，便于溶液的混合均匀，透明观察片的设置便于观察内部情况。
附图说明
[0016]图1是本专利技术培养装置的结构示意图；图2是本专利技术培养装置的图1中A处放大图；图3是本专利技术培养装置的密封培养筒体的结构示意图。
[0017]图中：1、底座；2、密封培养筒体；3、培养瓶；4、刻度线；5、密封瓶口；6、密封隔温盖；7、把手；8、隔温层；9、内层；10、连接柱；11、便捷拉环；12、连接块；13、固定块；14、插槽；15、弹簧；16、插柱；17、透明观察片。
具体实施方式
[0018]为使本专利技术实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。
[0019]具体实施例一：一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，包括以下操作步骤：S1：取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存，取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存是指对对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞进行胰蛋白酶消化、离心、洗涤，并用含7份培养液、2份小牛血清、1份DMSO配成细胞悬液，然后放置进入细胞冻存管中，再将细胞冻存管于4摄氏度放置3本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，其特征在于：包括以下操作步骤：S1：取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存；S2：将冷冻保存的肿瘤细胞取出加入培养液并转入培养瓶中进行培养；S3：将培养后的肿瘤细胞从培养瓶取出并植入瘤源动物体内；S4：选取接种后7至12天且生长状态良好的瘤源动物颈椎脱臼处死，消毒操作部位的皮肤，切开皮肤，剥离出接种用的瘤块；S5：从剥离出的接种用的瘤块中剔除非肿瘤组织和坏死组织，选取生长良好而无变性坏死、淡红色、鱼肉装的瘤组织在无菌平皿内并剪成2立方毫米的小块，无菌平皿放置于冰块上，然后加入营养液培养一段时间；S6：将培养一段时间后的瘤块用无菌套管针抽吸瘤块，然后接种与同种受体动物的腋窝皮下；S7：观察肿瘤细胞在受体动物体内内的生长情况。2.根据权利要求1所述的一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，其特征在于：所述取对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞预处理后进行冷冻保存是指对对数生长期增殖旺盛的肿瘤细胞进行胰蛋白酶消化、离心、洗涤，并用含7份培养液、2份小牛血清、1份DMSO配成细胞悬液，然后放置进入细胞冻存管中，再将细胞冻存管于4摄氏度放置30分钟、
‑
20摄氏度放置4小时、
‑
70摄氏度过夜放置，然后放置入液氮中进行冷冻保存。3.根据权利要求1所述的一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，其特征在于：所述冷冻保存的肿瘤细胞取出需要迅速放入38至40摄氏度的水浴中并且不停的摇动使其在一分钟内全部融化，然后在离心5分钟除去上清液，然后再加入培养液，转入培养瓶，转入培养瓶内后通过把手转动密封隔温盖并打开密封隔温盖，然后通过两个便捷拉环将培养瓶提入恒温恒湿的密封培养筒体的内腔，并且使两个插柱分别插设进入两个插槽的内腔，然后再通过把手将密封隔温盖进行密封，最后晃动底座带动培养瓶在密封培养筒体的内腔进行晃动，使培养瓶内腔中的液体混合均匀，之后培养48小时。4.根据权利要求1所述的一种标准化肿瘤动物模型的建立方法，其特征在于：所述观察肿瘤细胞在受体动物体内内的生长情况是指术后一周开始观察受体动物的腋窝皮处的肿块大小及变化，绘制肿瘤生长曲线，术后2周进行活体成像观察成瘤情况，术后4周...
【专利技术属性】
技术研发人员：应巧红，
申请(专利权)人：南京平港信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。