PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别是涉及PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途。本发明专利技术提供PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途，所述药物或试剂盒用于：治疗肿瘤；和/或，调节STAT3蛋白的表达水平；和/或，调节STAT3蛋白的磷酸化水平。本发明专利技术所提供的PD-L1抑制剂的用途可以在没有T细胞的情况下，有效促进肿瘤细胞凋亡抑制其增殖，抑制肿瘤组织生长，且不会引起明显的组织损伤和炎症反应，从而提供了一种高效的、特异性强的、能从根源上抑制检查点蛋白的表达但又不依赖于T细胞的免疫治疗新策略，具有良好的产业化前景。具有良好的产业化前景。

【技术实现步骤摘要】
PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途。

技术介绍

[0002]非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是最具致死率的肿瘤之一，在肺癌中约占80％～85％，具有PD-L1过表达和免疫耐药倾向的特点。目前，用于晚期NSCLC患者的治疗方法主要为手术、化疗和放疗等传统的肿瘤治疗手段，但治疗效果欠佳。自2015年FDA批准首个PD-1(程序死亡蛋白1)抗体(Nivolumab)作为免疫检查点抑制剂用于治疗晚期NSCLC后，免疫治疗成为除化疗和靶向治疗外的第三大治疗手段。
[0003]使用免疫检查点抑制剂以增强宿主免疫防御来攻击肿瘤细胞被认为是对抗晚期癌症最有力的武器之一。由于在一部分非小细胞肺癌中程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)过表达，并与受体PD-1结合，抑制细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的细胞活性，诱导免疫逃逸。目前临床中应用的免疫检查点抑制剂主要是通过竞争性的与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，从而阻断其与免疫细胞表面的受体PD-1之间的信号转导，重新激活T细胞发挥免疫监视作用。
[0004]然而，由于患者自身生理、心理因素的不同以及传统检查点封锁疗法固有的挑战，持续的临床治疗效益仅在极少数患者身上才能实现。实际上，治疗效果的关键决定因素很大程度上取决于肿瘤组织周围杀伤肿瘤T细胞的数量。然而，大多数募集或浸润的T细胞(>90％)被认为是不能识别和杀死周围肿瘤细胞的“旁观者”T细胞。一些癌症患者体内甚至没有肿瘤浸润性T细胞。此外，检查点阻断抗体只能阻断细胞膜上的免疫检查点，而细胞内在不断的产生新的免疫检查点蛋白并由细胞质转运到细胞膜上，因此，这种抑制作用并不持久。其次，检查点阻断抗体甚至可以攻击那些没有处于适当激活状态的T细胞，诱导对其进一步免疫治疗的抵抗作用，最终导致治疗失败。

技术实现思路

[0005]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途，用于解决现有技术中的问题。
[0006]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术一方面提供PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途，所述药物或试剂盒用于：
[0007]1)治疗肿瘤；和/或，
[0008]2)调节STAT3蛋白的表达水平；和/或，
[0009]3)调节STAT3蛋白的磷酸化水平。
[0010]在本专利技术一些实施方式中，在不依赖T细胞的条件下治疗肿瘤。
[0011]在本专利技术一些实施方式中，在不依赖T细胞的条件下调节STAT3蛋白的表达水平。
[0012]在本专利技术一些实施方式中，在不依赖T细胞的条件下调节STAT3蛋白的磷酸化水平。
[0013]在本专利技术一些实施方式中，所述药物为非肿瘤免疫治疗药物，优选为肿瘤细胞凋亡促进药物。
[0014]在本专利技术一些实施方式中，所述PD-L1抑制剂能够抑制PD-L1的表达和/或功能。
[0015]在本专利技术一些实施方式中，所述PD-L1抑制剂为单一有效成分。
[0016]在本专利技术一些实施方式中，所述PD-L1抑制剂选自核酸分子、蛋白分子或化合物。
[0017]在本专利技术一些实施方式中，所述核酸分子选自针对PD-L1的干扰RNA、针对PD-L1的反义寡核苷酸、用于敲除或敲减PD-L1表达的物质。
[0018]在本专利技术一些实施方式中，所述肿瘤选自PD-L1阳性的肿瘤，优选的，所述肿瘤选自非小细胞肺癌肿瘤。
[0019]在本专利技术一些实施方式中，所述药物或试剂盒用于下调STAT3蛋白的表达水平。
[0020]在本专利技术一些实施方式中，所述药物或试剂盒用于下调STAT3蛋白的磷酸化水平。
[0021]在本专利技术一些实施方式中，所述PD-L1抑制剂包裹于修饰有靶向多肽的脂质体中，所述靶向多肽的化学结构式如式I所示：
[0022][0023]在本专利技术一些实施方式中，通过式II化合物形成所述脂质体：
[0024][0025]在本专利技术一些实施方式中，所述脂质体为球形脂质体。
[0026]在本专利技术一些实施方式中，所述修饰有靶向多肽的脂质体的平均粒径为80～120nm。
附图说明
[0027]图1显示为本专利技术实施例1中马来酰亚胺功能化的支链聚合物结构鉴定示意图。
[0028]图2显示为本专利技术实施例1中支链聚合物和靶向支链聚合物的合成路线示意图。
[0029]图3显示为本专利技术实施例1中基于RNAi的肽靶向纳米阻断剂的组装和纳米阻断剂的表征示意图。
[0030]图4显示为本专利技术实施例2中流式细胞术分析和共聚焦荧光成像示意图。
[0031]图5显示为本专利技术实施例2中Nanoblocker的基因沉默效率示意图。
[0032]图6显示为本专利技术实施例2中Nanoblocker的作用机理示意图。
[0033]图7显示为本专利技术实施例2中Nanoblocker的体外抑瘤效果示意图。
[0034]图8显示为本专利技术实施例3中靶向及非靶向Nanoblocker的体内实验示意图。
[0035]图9显示为本专利技术实施例3中Nanoblocker体内PD-L1基因敲除的效果示意图。
[0036]图10显示为本专利技术实施例4中Nanoblocker的体内安全性评估示意图。图11显示为本专利技术实施例4中经治疗后的小鼠血液生化分析结果示意图。图12显示为本专利技术实施例4中各组织学分析结果示意图。
具体实施方式
[0037]为了使本专利技术的专利技术目的、技术方案和有益技术效果更加清晰，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容容易地了解本申请专利技术的其他优点及功效。
[0038]本专利技术第一方面提供PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途，所述药物或试剂盒用于治疗肿瘤。本专利技术专利技术人发现，对PD-L1蛋白进行沉默以后，在T细胞不存在的条件下可以有效促进肿瘤细胞(例如，H460细胞)凋亡，而在荷瘤小鼠动物模型中，施用PD-L1抑制剂的小鼠的肿瘤生长明显被抑制，并且对体重无明显影响，且不会导致炎症因子(例如， IL-6、IL-10、MCP-1、INF-γ、INF、IL-12p70等)水平显著升高，从而验证了PD-L1抑制剂可以被作为用于治疗肿瘤的药物。
[0039]本专利技术中，“治疗”一词包括可导致欲求的药学和/或生理效果的预防性、治愈性或缓和性处置。该效果较佳是指医疗上可减少疾病的一种或多种症状或者完全消除疾病，或阻滞、延迟疾病的发生和/或降低疾病发展或恶化的风险。
[0040]本专利技术第二方面提供PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途，所述药物或试剂盒用于调节STAT3蛋白的表达水平，或者用于调节STAT3蛋白的磷酸化水平。本专利技术专利技术人发现，对PD-L1蛋白进行沉默以后，可以激活肿瘤细胞内的细胞凋亡信号通路 ST本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.PD-L1抑制剂在制备药物或试剂盒中的用途，所述药物或试剂盒用于：1)治疗肿瘤；和/或，2)调节STAT3蛋白的表达水平；和/或，3)调节STAT3蛋白的磷酸化水平。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，在不依赖T细胞的条件下治疗肿瘤；和/或，在不依赖T细胞的条件下调节STAT3蛋白的表达水平；和/或，在不依赖T细胞的条件下调节STAT3蛋白的磷酸化水平。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为非肿瘤免疫治疗药物，优选为肿瘤细胞凋亡促进药物。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述PD-L1抑制剂能够抑制PD-L1的表达和/或功能；和/或，所述PD-L1抑制剂为单一有效成分。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述PD-L1抑制剂选自核酸分子、蛋白分子或化合物。6.如权利要求5所述的用途，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艳岚，谭蔚泓，韩小燕，王琳琳，张代亮，李吉利，李婷，夏英豪，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：