一种脐带血各成分同步分离试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种脐带血各成分同步分离试剂盒，包括A号稀释液、B1号分离液、B2号分离液、C号洗涤液、D号裂解液；A号稀释液为0.9％生理盐水，B1号分离液和B2号分离液分别为9％的聚蔗糖液和34％的复方泛影葡胺溶液按体积比50:19.11、50:23.28混合后的混合液，C号洗涤液为0.9％生理盐水或pH 7.4

【技术实现步骤摘要】
一种脐带血各成分同步分离试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术涉及一种试剂盒及其使用方法，具体涉及一种脐带血各成分同步分离试剂盒及其使用方法，是一种能够同步分离脐带血血小板、红细胞、血浆及其外泌体、中性粒细胞、单核细胞、内皮祖细胞、干细胞和淋巴细胞的试剂盒，属于脐带血分离


技术介绍

[0002]自1988年全球首例脐带血成功移植以来，脐带血的应用和研究取得了巨大进展，全球脐带血应用已超过8万例，我国脐带血应用也已达到1.6万例。国际上脐带血已用于治疗100余种疾病，既包括血液病，也包括非血液病。但与之相比，我国脐带血应用主要以血液疾病为主，应用范围有待扩大。目前干细胞治疗应用最成熟的是造血干细胞，造血干细胞的一个重要来源是脐带血。我国卫健委批准建设的7家省级正规脐带血库储存了大量脐带血资源。脐带血中除了造血干细胞，还有其他类型的干细胞、免疫细胞等，目前我国将脐带血中的造血干细胞用于临床治疗，主要以血液疾病为主，而国际上脐带血已用于治疗 100多种疾病，既包括血液病，也包括非血液病。
[0003]脐带血的T淋巴细胞发育不成熟本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脐带血各成分同步分离试剂盒，其特征在于：包括A号稀释液、B1号分离液、B2号分离液、C号洗涤液、D号裂解液。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括耗材，耗材包括50ml离心管10支、15ml离心管20支、10ml移液管10支、3ml巴氏吸管5支、175cm2细胞培养瓶3个。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的A号稀释液，为0.9％生理盐水；所述的A号稀释液中添加有人血白蛋白，人血白蛋白添加到A号稀释液中的质量浓度为0.5％
‑
1％。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的B1号分离液，是通过下述方法制备而成的：将40％聚蔗糖液以Hank
’
s液配制成质量浓度为9％的聚蔗糖液；再将60％复方泛影葡胺注射液以Hank
’
s液配制成质量浓度为34％的复方泛影葡胺溶液；最后将9％的聚蔗糖液和34％的复方泛影葡胺溶液按体积比50:19.11的比例混合，0.22μm滤膜过滤除菌后制成B1号分离液；所述的B1号分离液，质量浓度为1.075
±
0.001g/ml。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的B2号分离液，是通过下述方法制备而成的：将粉状Fi
‑
coll
‑
400以Hank
’
s液配制成质量浓度为9％的聚蔗糖液；再将60％复方泛影葡胺注射液以Hank
’
s液配制成质量浓度为34％的复方泛影葡胺溶液，最后将9％的聚蔗糖液和34％的复方泛影葡胺溶液按体积比50:23.28的比例混合，0.22μm滤膜过滤除菌制成B2号分离液；所述的B2号分离液，质量浓度为1.082
±
0.001g/ml。6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的C号洗涤液，为0.9％生理盐水或pH 7.4
±
0.1不含Ca
2+
和Mg
2+
的PBS溶液；所述的D号裂解液，为红细胞裂解液，是通过下述方法配备而成的：将8.02gNH4Cl、1gKHCO3和37.2mgNa2EDTA溶解在少量蒸馏水中，调整PH7.2
‑
7.4，然后添加蒸馏水定容至1000ml，0.22μm滤膜过滤除菌制成D号裂解液。7.一种利用权利要求1
‑
6任一项所述的脐带血各成分同步分离试剂盒同步分离脐血中的各成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：
①
血浆一次分离：将脐带血分装到离心管a中，在2000
‑
2500rpm下离心10
‑
20分钟后，吸取上层血浆层到离心管b中；
②
单个核细胞和中性粒细胞初分离：向步骤
①
的离心管a中加入等体积的A号液，充分混匀后，再沿管壁依次小心将2
‑
4mlB1号分离液、2
‑
4ml B2号分离液和离心管a中的混匀液加入到15ml离...

【专利技术属性】
技术研发人员：王盛，齐湘杰，
申请(专利权)人：王盛，
类型：发明
国别省市：