一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用制造技术

技术编号:31018185 阅读:21 留言:0更新日期:2021-11-30 03:02
本发明专利技术公开了一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,其中党参果聚糖主链为β

【技术实现步骤摘要】
一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用


[0001]本专利技术涉及中药多糖成分的应用
,具体为一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,应用于药品、保健品、功能食品及饲料添加剂领域中。

技术介绍

[0002]党参(Codonopsis Radix)为临床中应用非常广泛的补益类中药,具有补中益气、健脾益肺的功效,临床上主要用于脾肺虚弱、气短心悸、食少便溏、虚喘咳嗽等症。党参含有多种化学成分,其中多糖是其重要生物活性物质之一。

技术实现思路

[0003]本专利技术主要目的是通过人粪便菌群体外培养实验阐明一种党参均一果聚糖的益生元功能及其应用。
[0004]本专利技术是采用如下技术方案实现的:一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,其中党参果聚糖的结构通式如下:该党参果聚糖主链为β

D

呋喃果糖基

(2

1)

连接、侧链为α

D

呋喃果糖基

(2

3)连接而成,分子量约为1.7
×
103kDa。
[0005]本专利技术对该党参果聚糖的益生元功能检测的实验步骤如下:(1)500ml烧杯,加入150~180ml基础培养基,高压灭菌后放入厌氧工作站内;次日,分别采集三名健康年轻受试者新鲜的粪便10~20g,分装后

80℃厌氧保存(最好新鲜),50ml离心管内加无菌过滤袋,加入粪便后按照0.1~0.5g/ml的比例无菌PBS稀释,加入陶瓷珠均质混匀后,取出过滤;(2)分正常组、菊粉型果聚糖25mg/mL、菊粉型果聚糖50mg/mL、党参果聚糖25mg/mL、党参果聚糖50mg/mL,且设5个平行实验;(3)加入20~30mL粪便混悬液,在厌氧工作站体外发酵;
(4)24h后取5mL混悬液,离心,沉淀加入2mL灭菌后甘油PBS(1:1),

80℃或

20℃保存,提取DNA做16s二代测序;(5)另取5mL混悬液,离心,取上清测定pH值。
[0006]人粪便菌群体外培养实验表明:所述党参果聚糖具有显著促进Prevotella、Faecalibacterium、Phascolarctobacterium、Acidaminococcus、Bifidobacterium等益生菌的生长作用。
[0007]进一步优选的,所述党参果聚糖的培养浓度在25mg/mL~50mg/mL。
[0008]进一步优选的,所述党参果聚糖在25mg/mL培养浓度下均具有显著促进Phascolarctobacterium和Faecalibacterium益生菌的生长作用。
[0009]进一步优选的,所述党参果聚糖在50mg/mL培养浓度下均具有显著促进Phascolarctobacterium益生菌的生长作用。
[0010]Phascolarctobacterium属细菌在溃疡性结肠炎患者肠道菌群中丰度明显降低,那么通过益生元的摄入增加溃疡性结肠炎患者肠道中Phascolarctobacterium属细菌丰度,可以某种程度上改善溃疡性结肠炎患者症状。因此,本专利技术在溃疡性结肠炎的治疗中具有一定应用价值。进一步优选的,所述党参果聚糖在治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。
[0011]进一步优选的,所述党参果聚糖具有促进Prevotella、Faecalibacterium和Parabacteroides细菌产生短链脂肪酸的作用。短链脂肪酸为乙酸、丙酸、丁酸或者乳酸。
[0012]该党参果聚糖通过肠道菌群发酵产生短链脂肪酸,而短链脂肪酸是一种重要生理信号分子,对包括肥胖、糖尿病在内的多种代谢疾病和神经退行性疾病具有一定的治疗作用,因此,本专利技术在相关代谢性疾病和神经退行性疾病的治疗中具有一定应用价值。进一步优选的,所述党参果聚糖在治疗代谢疾病和神经退行性疾病的药物中的应用。
[0013]进一步优选的,所述党参果聚糖在制备保健品、功能食品及饲料添加剂中的应用。
[0014]Phascolarctobacterium属细菌对人体的有益功能还没有完全被认识,随着微生物技术和肠道菌群研究的不断深入,Phascolarctobacterium属细菌的有益功能将不断被阐明,因此,本专利技术还具有潜在的不可预料的价值。
附图说明
[0015]图1表示菊粉和果聚糖对培养体系pH值的影响。
[0016]图2表示果聚糖25mg/mL浓度下与对照组的LEfSe比较结果。
[0017]图3表示果聚糖50mg/mL浓度下与对照组的LEfSe比较结果。
[0018]图4表示果聚糖与菊粉25mg/mL浓度下的LEfSe比较结果。
[0019]图5表示果聚糖与菊粉50mg/mL浓度下的LEfSe比较结果。
具体实施方式
[0020]下面对本专利技术的具体实施例进行详细说明。
[0021]1、本专利技术中党参果聚糖的制备过程如下:党参用10~20倍蒸馏水浸泡30分钟,然后加热回流提取2~3次,每次1.5~2小时,合并提取液,减压浓缩至1/6~1/3体积,60%~80%乙醇沉淀。取沉淀加入10~20倍蒸馏水溶解、离心,上清液采用10万级和5万级超滤膜进行膜分离,获得党参果聚糖。通过核磁共振谱鉴定
其结构。
[0022]该党参果聚糖主链为β

D

呋喃果糖基

(2

1)

连接、侧链为α

D

呋喃果糖基

(2

3)连接而成,分子量约为1.7
×
103kDa。
[0023]2、本专利技术对该果聚糖的益生元功能检测的实验步骤如下:(1)500ml烧杯,加入150~180ml基础培养基,高压灭菌后放入厌氧工作站内;次日,分别采集三名健康年轻受试者新鲜的粪便10~20g,分装后

80℃厌氧保存(最好新鲜),50ml离心管内加无菌过滤袋,加入粪便后按照0.1~0.5g/ml的比例无菌PBS稀释,加入陶瓷珠均质混匀后,取出过滤;(2)分正常组、菊粉型果聚糖25mg/mL、菊粉型果聚糖50mg/mL、党参果聚糖25mg/mL、党参果聚糖50mg/mL,且设5个平行实验;(3)加入20~30mL粪便混悬液,在厌氧工作站体外发酵;(4)24h后取5mL混悬液,离心,沉淀加入2mL灭菌后甘油PBS(1:1),

80℃或

20℃保存,提取DNA做16s二代测序;

样本DNA的提取与测序:实验组样本10000rpm、10分钟,离心后去掉上清,留沉淀物进行样本DNA的提取。
[0024]采用CTAB方法对样本的基因组DNA进行提取,之后利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度和本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,其中党参果聚糖的结构通式如下:该党参果聚糖主链为β

D

呋喃果糖基

(2

1)

连接、侧链为α

D

呋喃果糖基

(2

3)连接而成;其特征在于:所述党参果聚糖具有显著促进Prevotella、Faecalibacterium、Phascolarctobacterium、Acidaminococcus、Bifidobacterium益生菌的生长作用。2.根据权利要求1所述的一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,其特征在于:党参果聚糖的培养浓度在25mg/mL~50mg/mL。3.根据权利要求2所述的一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,其特征在于:所述党参果聚糖在25mg/mL培养浓度下均具有显著促进Phascolarctobacterium和Faecalibacterium益生菌的生长作用。4.根据权利要求2所述的一种具有益生元功能的党参果聚糖的应用,其特征在于:党参果聚糖在50mg/mL培养浓度下均具有显著促进Phasco...

【专利技术属性】
技术研发人员:李建宽高建平王妍
申请(专利权)人:山西医科大学
类型:发明
国别省市:

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