一种被靶向修饰且装载有药物的外泌体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术实施例涉及一种被靶向修饰且装载有药物的外泌体及其制备方法和应用。该外泌体装载有选自以下的一种或几种：神经营养因子；具有神经营养因子活性的神经营养因子片段；具有神经营养因子活性的短肽；及编码其的mRNA，并可以靶向性地向神经组织受体细胞递送神经营养因子，从而通过抗炎、抗凋亡、促进神经细胞存活、促进神经再生的方式减轻神经组织损伤并促进修复。另外，该外泌体可以在-80℃的条件下稳定地贮存3个月，并且其制备方法简单。并且其制备方法简单。

【技术实现步骤摘要】
一种被靶向修饰且装载有药物的外泌体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种被靶向修饰且装载有药物的外泌体及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]缺血性脑卒中、出血性脑卒中、阿尔兹海默症、帕金森病等神经系统疾病发病率在现代社会中越来越高，且治疗比较困难。以急性缺血性脑卒中为例，经FDA批准的药物仅有rt-PA，但是其治疗时间窗仅有4.5小时，导致只有少部分患者能从中获益，所以亟待研发治疗药物。
[0003]神经营养因子家族包括神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子4(NT4)、神经营养因子5(NT5)等。NGF是神经营养因子家族首个被发现的分子，在神经系统生理发育过程中起关键调控作用。在神经系统损伤后，神经营养因子家族可以起到减轻组织损伤、促进组织修复的作用。例如，给予NGF可以减少神经细胞死亡、调节炎症并促进细胞向抗炎型极化、促进血管新生、促进神经再生以及改善神经功能，具有广谱神经保护作用。既往研究发现脑缺血损伤后，内源性NGF的表达水平显著下降。因此，如果能将神经营养因本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种狂犬病病毒糖蛋白修饰的外泌体，其特征在于：所述外泌体装载有选自以下的一种或几种：神经营养因子；具有神经营养因子活性的神经营养因子片段；具有神经营养因子活性的短肽；及编码其的mRNA。2.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：所述神经营养因子包括：神经生长因子、脑源性神经营养因子、神经营养因子4、神经营养因子5、神经营养因子6、神经营养因子7中的一种或几种。3.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：装载有神经营养因子和/或神经营养因子mRNA的狂犬病病毒糖蛋白修饰的外泌体为新鲜提取的或冻存的；可选地，当装载有神经营养因子和/或神经营养因子mRNA的狂犬病病毒糖蛋白修饰的外泌体为冻存的时，冻存的温度条件为-80℃，冻存的时间为3个月或以内。4.根据权利要求1所述的外泌体，其特征在于：所述外泌体是靶向神经组织细胞；和/或，所述外泌体能被神经元细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞及其他神经组织细胞摄取。5.一种权利要求1之一所述的外泌体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：采用狂犬病病毒糖蛋白与外泌体蛋白溶酶体相关膜糖蛋白2b融合表达的重组载体与克隆有神经营养因子的重组载体共同转染表达系统的细胞，表达后收集细胞上清进行超速离心提取外泌体。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：神经营养因子包括：神经生长因子、脑源性神经营养因子、神经营养因子4、神经营养因子5、神经营养因子6、神经营养因子7中的一种或几种；和/或，重组载体包括重组质粒，可选地，包含有狂犬病病毒糖蛋白与外泌体蛋白溶酶体相关膜糖蛋白2b融合表达的重组载体为pcDNA3.1(-)-RVG-Lamp2b重组载体；克隆有神经营养因子的重组载体为pCI-neo-NGF重组质粒；和/或，所述表达系统的细胞包括：人胚肾293细胞、哺乳动物骨髓间充质干细胞、哺乳动物神经干细胞、哺乳动物脐...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨佳蕾，王拥军，杨国栋，吴诗坡，侯丽华，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京天坛医院，
类型：发明
国别省市：