紫花苜蓿MsSPL12蛋白及其相关生物材料与它们在提高植物抗逆性中的应用制造技术

本发明专利技术公开了蛋白质或调控所述蛋白质编码基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质在调控植物抗逆性中的应用，所述蛋白质是MsSPL12蛋白，所述MsSPL12蛋白是如下任一种的蛋白质：A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2所示的蛋白质；A2)将A1)所示的氨基酸序列经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控植物抗逆性功能的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。融合蛋白质。

【技术实现步骤摘要】
紫花苜蓿MsSPL12蛋白及其相关生物材料与它们在提高植物抗逆性中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及紫花苜蓿MsSPL12蛋白及其相关生物材料与它们在提高植物抗逆性中的应用。

技术介绍

[0002]紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是豆科苜蓿属、异花授粉、同源四倍体的多年生优良牧草，营养丰富、适口性好，有“牧草之王”的美称。近年来，由于全球气候变化、灌溉水质不断下降等原因，我国苜蓿主产区(黄河流域以北的干旱和半干旱地区)干旱化、土壤盐渍化程度不断加剧，造成苜蓿减产、结瘤固氮能力减弱，干旱胁迫、土壤盐渍化已成为制约我国苜蓿产业发展的主要因素之一。因此，培育抗旱耐盐紫花苜蓿新品种，提高苜蓿的抗旱耐盐性是当前提高苜蓿草产量的重要策略。

技术实现思路

[0003]本专利技术要解决的技术问题是如何提高植物的抗逆性。
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术首先提供蛋白质或调控所述蛋白质编码基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质的应用，所述蛋白质可以是MsSPL12蛋白，所述MsSPL12蛋白可以是如下任一种的蛋白质：
[0005]A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；
[0006]A2)将A1)所示的氨基酸序列经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控植物耐盐性功能的蛋白质；
[0007]A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。
[0008]进一步地，上述应用中所述蛋白质可来源于苜蓿。
[0009]更具体地，所述蛋白质来源于紫花苜蓿。
[0010]其中，SEQ ID No.1由434个氨基酸残基组成。
[0011]上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
[0012]本文中，所述蛋白质标签(protein
‑
tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白质一起融合表达的一种多肽或者蛋白质，以便于目的蛋白质的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白质标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。
[0013]本文中，所述同一性是指氨基酸序列或核苷酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然
后即可获得同一性的值(％)。
[0014]本文中，所述80％以上的同一性可为至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性。
[0015]上述应用中，所述调控所述蛋白质活性或含量的物质可为调控所述蛋白质的编码基因表达的物质。
[0016]上述应用中，所述调控基因表达的物质可为进行如下6种调控中至少一种调控的物质：1)在所述基因转录水平上进行的调控；2)在所述基因转录后进行的调控(也就是对所述基因的初级转录物的剪接或加工进行的调控)；3)对所述基因的RNA转运进行的调控(也就是对所述基因的mRNA由细胞核向细胞质转运进行的调控)；4)对所述基因的翻译进行的调控；5)对所述基因的mRNA降解进行的调控；6)对所述基因的翻译后的调控(也就是对所述基因翻译的蛋白质的活性进行调控)。
[0017]进一步地，上述应用中所述调控植物抗逆性可为增强植物抗逆性。
[0018]具体地，上述应用中，所述调控基因表达可为提高或增加所述基因表达。
[0019]进一步地，所述的应用中，所述植物为下述任一种：
[0020]P1)双子叶植物；
[0021]P2)豆科植物；
[0022]P3)蝶形花亚科植物；
[0023]P4)苜蓿属植物；
[0024]P5)紫花苜蓿。
[0025]进一步地，上述应用中，所述提高或增加所述基因表达的物质可为与所述蛋白质相关的生物材料，所述生物材料可为下述B1)至B7)中的任一种：
[0026]B1)编码上述蛋白质的核酸分子；
[0027]B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；
[0028]B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；
[0029]B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；
[0030]B5)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；
[0031]B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有B2)所述表达盒的转基因植物组织；
[0032]B7)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有B2)所述表达盒的转基因植物器官。
[0033]其中，B1)所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。
[0034]进一步地，B1)所述核酸分子可为如下G1)或G2)所示的基因：
[0035]G1)编码链的编码序列是SEQ ID No.1的cDNA分子或DNA分子；
[0036]G2)编码链的核苷酸是SEQ ID No.1的cDNA分子或DNA分子；
[0037]其中，SEQ ID No.2由1305个核苷酸组成，其开放阅读框(ORF)为自5
′
末端起第1
位
‑
第1305位，编码氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白。
[0038]上述相关生物材料中，B2)所述的表达盒是指能够在宿主细胞中表达蛋白质MsSPL12的DNA，该DNA不但可包括启动MsSPL12基因转录的启动子，还可包括终止MsSPL12基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本专利技术的启动子包括但不限于：组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子和诱导型启动子。启动子的例子包括但不限于：花椰菜花叶病毒的组成型启动子35S；来自西红柿的创伤诱导型启动子，亮氨酸氨基肽酶("LAP",Chao等人(1999)Plant Physiol 120:979
‑
992)；来自烟草的化学诱导型启动子，发病机理相关1(PR1)(由水杨酸和BTH(苯并噻二唑
‑7‑
硫代羟酸S
‑
甲酯)诱导)；西红柿蛋白酶抑制剂II启动子(P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蛋白质或调控所述蛋白质编码基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质在调控植物抗逆性中的应用，所述蛋白质是MsSPL12蛋白，所述MsSPL12蛋白是如下任一种的蛋白质：A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2所示的蛋白质；A2)将A1)所示的氨基酸序列经过一个以上氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控植物抗逆性功能的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述蛋白质来源于苜蓿。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述调控植物抗逆性为增强植物抗逆性。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的应用，其特征在于，所述植物为下述任一种：P1)双子叶植物；P2)豆科植物；P3)蝶形花亚科植物；P4)苜蓿属植物；P5)紫花苜蓿。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的应用，其特征在于：所述调控所述蛋白质编码基因的表达物质或调控所述蛋白质活性或含量的物质为与所述蛋白质相关的生物材料，所述生物材料为下述B1)至B7)中的任一种：B1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重...

【专利技术属性】
技术研发人员：张万军，刘燕蓉，林士雯，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：