多重氨基酸定量方法及试剂盒研制技术

本发明专利技术涉及了一种新的多重氨基酸定量方法（multiple amino acid quantification，MAAQ）及相关试剂盒。本发明专利技术的技术方案为：利用甲醛和氰基硼氢化钠及其各自的同位素形式进行有机组合，对氨基酸进行化学标记，使得氨基酸带上不同的质量标签，利用选择离子扫描（selective ion monitoring,SIM）、多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）、平行反应监测（parallel reaction monitoring,PRM）或非数据依赖采集（data independent acquisition,DIA）实现多个样品中氨基酸定量分析。该方法及试剂盒具有定量通量高、成本低、精准度高等优点，利用该试剂盒可以大大方便氨基酸的定量。基酸的定量。基酸的定量。

【技术实现步骤摘要】
多重氨基酸定量方法及试剂盒研制


[0001]本专利技术设计了一种基于质谱技术的氨基酸定量法，可实现氨基酸样品大规模、高准确度和高精密度定量，此外该方法还有其他优点如价格低廉、方法标记简单、标记效率高、无副反应等。该方法可以用于临床诊断、食品样品所含有的氨基酸的定量分析。

技术介绍

[0002]氨基酸是生命的重要组成部分，是蛋白质的组成单元。人体内重要的氨基酸有40余种，包括20种蛋白质氨基酸以及一些有重要功能的氨基酸，统称为“全谱氨基酸”。具体包含精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、γ
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氨基丁酸、甘氨酸、丝氨酸、牛磺酸、酪氨酸、α
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氨基已二酸、天门冬酰胺、天门冬氨酸、瓜氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸、半胱氨酸、胱硫醚、同型半胱氨酸、α
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氨基正丁酸、丙氨酸、鹅肌肽、β
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丙氨酸、β
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氨基异丁酸、肌肽、乙醇胺、δ
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羟基赖氨酸、羟化脯氨酸、1
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甲基组氨酸、3
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.多重氨基酸定量方法(multiple amino acid quantification,MAAQ)，该方法利用甲醛和氰基硼氢化钠及其各自的同位素形式进行有机组合，对氨基酸进行化学标记，使待测氨基酸带上不同的质量标签，利用质谱的一级谱或二级谱的峰强度进行定量分析，将实验中流程固定化以及将所需要的试剂和耗材组装成试剂盒以便于方法的推广使用。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：甲醛和氰基硼氢化钠及其同位素形式进行有机组合，对肽段进行标记，是指四种甲醛(CH2O，
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CH2O，CD2O和
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CD2O)和两种氰基硼氢化钠(NaCNBH3和NaCNBD3)进行组合，形成8种标记，产生不同的质量标签，如下表所示。3.根据权利要求1所述的方法，氨基酸的特征在于：生物体内的全谱氨基酸，具体有：精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、γ
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氨基丁酸、甘氨酸、丝氨酸、牛磺酸、酪氨酸、α
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氨基已二酸、天门冬酰胺、天门冬氨酸、瓜氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸、半胱氨酸、胱硫醚、同型半胱氨酸、α
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氨基正丁酸、丙氨酸、鹅肌肽、β
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丙氨酸、β
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氨基异丁酸、肌肽、乙醇胺、δ
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羟基赖氨酸、羟化脯氨酸、1
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甲基组氨酸、3
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甲基组氨酸、磷酸乙醇胺、磷酸丝氨酸、脯氨酸、肌氨酸、精氨琥珀酸、羟化瓜氨酸。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：质谱采集方法主要使用的质谱为三重四级杆质谱、四极杆
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飞行时间质谱和四极杆
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静电轨道阱质谱，质谱采集方法为多反应监测(MRM)、平行反应监测(PRM)、选择离子检测(SIM)和全扫描(full scan)。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：周愿，洪聪聪，田璐，吴祥佳，
申请(专利权)人：徐州医科大学，
类型：发明
国别省市：