一种白牛肝菌分离培养基制造技术

本发明专利技术技术方案，提供一种白牛肝菌分离培养基，该白牛肝菌分离培养基包括下列原料：碳源、氮源和无机盐，所述原料包含下列重量配比：10

【技术实现步骤摘要】
一种白牛肝菌分离培养基


[0001]本专利技术涉及生物
，具体而言，尤其涉及一种白牛肝菌分离培养基。

技术介绍

[0002]白牛肝菌(Boletus bainiugan)是一种可食用的肉质蘑菇，与美味牛肝菌(Boletus edulis)很相似，经常会被误认为是美味牛肝菌。白牛肝菌菌丝生长缓慢，要想人工驯化栽培白牛肝，首先需要帅选出适宜白牛肝菌菌丝生长的培养基。白牛肝菌作为一种野生可食用的一种珍惜菌类，值得去研究，目前对于白牛肝菌分离培养基的研究还处于空白。

技术实现思路

[0003]本专利技术鉴于解决上述技术问题，提供了一种白牛肝菌分离培养基，本专利技术的目的在于为白牛肝菌菌种提供一种对白牛肝菌菌丝萌发和菌丝生长具有较好的促进作用的分离培养基。
[0004]为达到上述目的，本专利技术主要提供如下技术方案：
[0005]本专利技术的实施例提供一种白牛肝菌分离培养基，包括下列原料：碳源、氮源和无机盐，所述原料包含下列重量配比：10
‑
30g葡萄糖、2
‑
6g蛋白胨、0.5
‑
1.5g KH2PO4、0.25
‑
1g ZnSO4·
7H2O、15
‑
25g琼脂；所述白牛肝菌分离培养基还包括溶解所述原料的土豆浸出液。
[0006]具体地，所述葡萄糖为25g，所述蛋白胨为4g，所述KH2PO4为0.5g，所述ZnSO4·
7H2O为0.5g，所述琼脂为20g。该重量配比能够得到更加优质的白牛肝菌分离培养基，更加利于白牛肝菌丝生长。
[0007]具体地，所述土豆浸出液为200g土豆添加1.1L
‑
1.3L离子水煮沸后过滤得到的1L土豆浸出液。
[0008]本专利技术的分离培养基培养白牛肝菌菌丝过程中的特点：
[0009](1)白牛肝菌丝培养温度为20
‑
28℃，培养时间为20
‑
40天。
[0010](2)本专利技术的优点为：本专利技术提供了一种新型的分离培养基配方。通过多种碳源、氮源、无机盐的筛选所得出的优良培养基。可缩短白牛肝菌菌丝分离萌发时间，促进菌丝的生长。
附图说明
[0011]图1为经本专利技术实施例提供的一种白牛肝菌分离培养基培养后的菌丝的基因基于ITS构建的系统发育树。
具体实施方式
[0012]下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人
员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。
[0013]所用试剂或仪器等均为可以通过市购获得的常规产品。
[0014]以下实施例示出了实施本专利技术的简要方法，但不限定其所有可能变型。
[0015]实施例1
[0016]培养基的筛选方法
[0017]本专利技术实施例提供一种白牛肝菌分离培养基，包括下列原料：碳源、氮源和无机盐，所述原料包含下列重量配比：10
‑
30g葡萄糖、2
‑
6g蛋白胨、0.5
‑
1.5g KH2PO4、0.25
‑
1g ZnSO4·
7H2O、2.5
×
10
‑4‑
2.5
×
10
‑6g叶酸、20g琼脂；所述白牛肝菌分离培养基还包括溶解所述原料的1L土豆浸出液，其中，1L土豆浸出液为200g土豆添加1.1L
‑
1.3L离子水煮沸后过滤得到的。
[0018]本专利技术实施例通过碳源、氮源、无机盐的单因子筛选及正交实验获得了本专利所述的培养基。该培养基缩短了菌丝萌发时间，目前菌丝8
‑
15天萌发，菌丝30
‑
40天长满培养基。
[0019]具体实验方法如下：
[0020]实验先采用单因子筛选，确定对白牛肝菌丝生长影响最大的因子。
[0021]其次采用正交实验筛选出影响因子中的最佳水平。
[0022]实验重复3次，每次实验每个处理设6个重复，采用平板培养法，平板采用60mm的玻璃培养皿培养。将直径0.6cm的菌块分别接入培养皿中央，置于(25
±
1)℃恒温暗培养。接种第40天测量菌落直径(以十字交叉法测量)，同时观察菌丝长势、菌丝颜色、菌落边缘特征等生长指标。对实验数据用DPS分析软件进行LSD差异显著性检验。
[0023]1、单因子筛选
[0024]单因子筛选中所使用的碳源、氮源和无机盐情况如：表1、表2和表3所示。
[0025]表1不同碳源使用量
[0026][0027]表2不同氮源使用量
[0028][0029]表3不同无机盐使用量
[0030][0031]通过对不同的碳源、氮源、无机盐不同浓度筛选的实验结果来看，从菌丝的颜色、长势等碳源中以葡萄糖(20g/L)为最好，是较理想的碳源。氮源中蛋白胨(6g/L)为最理想氮源。最佳无机盐是ZnSO4·
7H2O(0.5g/L)，其次是KH2PO4(1.5g/L)。
[0032]2、正交实验
[0033]正交实验因素与水平如表4所示：
[0034]表4正交实验因素与水平
[0035][0036][0037]如表5所示，通过对最佳的碳源、氮源、无机盐正交筛选的实验结果数据分析来看，实验的最优水平为：A3B2C1D2，具体数据参见表4，即葡萄糖(25g/L)，蛋白胨(4g/L)，ZnSO4·
7H2O(0.5g/L)，KH2PO4(0.5g/L)。
[0038]表5正交实验的实验结果
[0039][0040]综上所述，本专利技术实施例通过多种碳源、氮源、无机盐的筛选所得出的优良培养基。最终筛选所得出的优良培养基原料配比如下：碳源、氮源、无机盐为下列配比：葡萄糖(25g/L)，蛋白胨(4g/L)，ZnSO4·
7H2O(0.5g/L)，KH2PO4(0.5g/L)。该培养基缩短了菌丝萌发时间，可实现菌丝8
‑
15天萌发，菌丝30
‑
40天长满培养基。
[0041]本专利技术实施例提供的白牛肝菌分离培养基，通过多种碳源、氮源、无机盐的筛选所得出优良培养基，可缩短白牛肝菌菌丝分离萌发时间，促进菌丝的生长。
[0042]实施例2
[0043]培养基的制备方法
[0044]本专利技术实施例的白牛肝菌分离培养基的制备方法：分别称取碳源、氮源、无机盐，其重量配比为10
‑
30g葡萄糖、2
‑
6g蛋白胨、0.5
‑
1.5g KH2PO4、0.25
‑
1g ZnSO4·
7H2O、15
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白牛肝菌分离培养基，其特征在于，包括下列原料：碳源、氮源和无机盐，所述原料包含下列重量配比：10
‑
30g葡萄糖、2
‑
6g蛋白胨、0.5
‑
1.5g KH2PO4、0.25
‑
1g ZnSO4·
7H2O、15
‑
25g琼脂；所述白牛肝菌分离培养基还包...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗顺珍，纪开萍，曹旸，纪光燕，代静，果花，
申请(专利权)人：景洪宏臻农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：