细胞外基质调节药剂制造技术

本发明专利技术提供一种用于调节角膜内皮细胞的细胞外基质表达的药剂。本发明专利技术涉及一种用于调节角膜内皮细胞的细胞外基质表达的药剂，其包含1

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞外基质调节药剂


[0001]本专利技术涉及一种用于调节角膜内皮细胞的细胞外基质表达的药剂。更具体地，本专利技术涉及一种用于调节角膜内皮细胞的细胞外基质表达的药剂，其包含1
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(4
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氟
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异喹啉磺酰基)
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甲基
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1,4
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高哌嗪或其盐、或其溶剂合物作为活性成分。

技术介绍

[0002]角膜是重要的组织，其不仅与巩膜一起构成眼球壁，并且还通过透明组织作为将外界影像摄入眼睛内的入口。角膜中心部的厚度大约为500μm，且从外侧开始由角膜上皮、鲍氏膜(Bowman membrane)、角膜基质、角膜后弹力层(Descemet
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s membrane)、和角膜内皮等五层构成。
[0003]角膜内皮细胞产生各种细胞外基质组分以形成专门的基底膜，即角膜后弹力层。角膜后弹力层由两层
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前方带状层(胎儿层)和在一生中通过内皮细胞的分泌活性持续生长且增厚的后方非带状层(出生后)
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构成。正常的角膜后弹力层在其基质侧含有VIII型胶原蛋白、IV型胶原蛋白(链α1
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α2)、和纤连蛋白，以及在其内皮侧含有巢蛋白(entactin)、层连结蛋白、珍珠素(perlecan)、和IV型胶原蛋白(链α3
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α6)。几乎所有的角膜内皮病症，诸如伪晶症水疱性角膜病变(pseudophakic bullous keratopathy)，都与异常的细胞外基质累积相关。在这些病症中，角膜内皮细胞经历压力诱导的转分化成为肌纤维母细胞，其产生过量胶原蛋白(主要为I型胶原蛋白)，从而在角膜后弹力层的表面上形成异常的后部纤维层。这种后部纤维化层被认为是内皮功能异常中的常见最终路径的结果(参见非专利文件1)。
[0004]角膜后弹力层的经改变的基质组成连同疣状赘生物(wart
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like excrescence)(所谓的滴状物(guttae))的形成亦呈现为费氏角膜内皮营养不良(Fuchs endothelial corneal dystrophy；FECD)的特征及早期临床特点(图1)。这些基质改变导致丧失对比敏感度及归因于光散射而增加受影响患者的眩光(参见非专利文件2)，从而严重影响患者的视力质量。角膜内皮细胞功能异常进一步导致角膜水肿、丧失角膜透明度、以及不可逆的眼盲。FECD是缓慢进行性双侧角膜疾病，其在年龄超过40岁的成人中临床表现明显。在2015年，FECD占全球进行的角膜移植的39％的病因。除角膜移植外，目前还没有其他治疗FECD的方法。
[0005]在最近的出版物中，已经表明FECD的特征在于基质蛋白的表达模式的特定变化，其与罹患伪晶症水疱性角膜病变的患者及正常个体的表达模式不同(参见非专利文件3)。经鉴别在FECD试样中选择性地上调若干基质蛋白，包括I型、III型及XVI型胶原蛋白、纤连蛋白、聚集蛋白(agrin)、层连结蛋白α1、TGFBI和丛生蛋白(clusterin)，包括在mRNA和蛋白质水平上。免疫组织化学确认这些基质蛋白(尤其是III型胶原蛋白)参与角膜后弹力层增厚及滴状物形成(图2)。FECD中的异常基质沉积可能是由FECD患者的前房液中增加水平的TGF
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β2诱导的。近来在得自FECD患者的内皮细胞培养物中确认VI型胶原蛋白、层连结蛋白α3、及纤连蛋白的上调(参见非专利文件4)。
[0006]已知角膜后弹力层增厚和滴状物形成是FECD的最初临床征兆，因此抑制异常基质
沉积可减缓疾病进展并最终避免角膜移植。本专利技术的专利技术人创建以下假设：压力
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或TGFβ
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诱导的Rho激酶(Rho
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相关联、含有缠绕线圈的蛋白激酶：ROCK)信号传导活化参与纤维化反应和角膜内皮细胞的异常基质产生，并且ROCK抑制可减轻、预防或甚至逆转这些改变，从而使FECD患者的视觉功能正常化。
[0007]Rho是一种小GTP酶，其在通过鸟嘌呤核苷酸交换因子活化后活化将包括肌凝蛋白(myosin)轻链和LIM激酶的各种基质磷酸化的ROCK。ROCK信号传导由创伤、整合素(integrin)刺激、细胞激素和生长因子活化并调节广范围的基础细胞事件，包括黏附、迁移、增生、分化和凋亡。这些过程主要通过调节细胞骨架来介导。
[0008]已累积关于Rho
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ROCK信号传导路径参与包括肾和肺的多个器官系统中的纤维化病灶发展的许多证据(参见非专利文件5
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8)。ROCK信号传导活化似乎参与上皮、内皮及间质细胞响应于压力或损伤的促纤维化反应，驱动纤维母细胞转变为肌纤维母细胞，从而产生经改变的富含胶原蛋白的细胞外基质。一直以来，使用ROCK抑制剂来抑制或预防动物模型中的纤维化，更重要的是，诱导已产生的纤维化的消退(参见非专利文件6)。这些抗纤维化效应可通过预防TGFβ
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诱导的肌纤维母细胞转化和过量基质产生来介导(参见非专利文件9
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12)。法舒地尔(fasudil)是一种ROCK的小分子抑制剂，已被证明在各种纤维化疾病中具有抗纤维化效应，例如其减轻α
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SMA、MLCP、LIMK1、磷酸化丝切蛋白(p
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cofilin)、胶原蛋白I、和胶原蛋白III蛋白质在人类纤维母细胞中的表达(参见非专利文件12)。因此，多线证据指示ROCK抑制具有成为治疗纤维化的有效治疗工具的重大潜力。
[0009]转化生长因子
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β(TGF
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β)信号传导路径是在纤维化疾病中驱动细胞外基质的异常合成的纤维母细胞活化的关键介导物。此外，经典Wnt信号传导的活化对TGF
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β介导的纤维化是必需的，并突出了两种路径的交互作用在纤维化疾病的致病机制中的关键作用(参见非专利文件13)。Wnt及TGF
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β信号传导也被建议活化内皮至间质转变(EMT)。
[0010]先前研究显示，使用Y
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27632、H
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1152及硫酸阿扎那韦(Thiazovivin)抑制ROCK信号传导在活体外和活体内动物模型中刺激细胞黏附、迁移、增生和伤口愈合并抑制角膜内皮细胞的凋亡和内皮
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间质转变(EMT)(参见非专利文件14
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25)。已经报道了K
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115刺激内皮细胞增生和伤口愈合、功能性内皮标志物的上调和EMT标志物的下调的类似发现(参见非专利文件26及27)。这些研究为ROCK抑制剂在角膜内皮细胞培养中作为细胞注射疗法中的辅助药物(参见非专利文件28)，以及作为在没有角膜捐赠者移植的不成功的后弹力层撕除术(descemetorhexis，角膜后弹力层移除)，该手术是用于FECD的所谓的DWEK(没有内皮角膜成形术的角膜后弹力层撕除术)或DS本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于调节角膜内皮细胞的细胞外基质表达的药剂，其包含：1
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氟
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异喹啉磺酰基)
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甲基
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高哌嗪或其盐，或其溶剂合物。2.根据权利要求1所述的用于调节角膜内皮细胞的细胞外基质表达的药剂，其中所述1
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氟
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异喹啉磺酰基)
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高哌嗪为(S)
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氟
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异喹啉磺酰基)
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【专利技术属性】
技术研发人员：F，
申请(专利权)人：U，
类型：发明
国别省市：