用于快速扩增的突变型Taq聚合酶制造技术

技术编号：30633482 阅读：16 留言：0更新日期：2021-11-04 00:12

本发明专利技术包括一种突变型Taq聚合酶，该突变型Taq聚合酶可以在时间被限制到少至一秒钟的延伸条件下显著地延伸和扩增靶序列。所述突变型Taq聚合酶或其生物活性片段具有表I所示的区别于野生型的一种或多种取代。区别于野生型的一种或多种取代。区别于野生型的一种或多种取代。

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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于快速扩增的突变型Taq聚合酶
[0001]序列表
[0002]本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表，在此通过引用将其全部内容并入本文。上述ASCII副本创建于2020年2月27日，名为Abclonal
‑
Fast_SL.txt，大小为2,224,491字节。

技术介绍

[0003]在用于DNA扩增的聚合酶链式反应(PCR)过程中，将靶标
‑
引物
‑
聚合酶
‑
dNTP
‑
缓冲液混合物在不同温度下连续加热循环反应，使靶标DNA链去退火(通常在约90
‑
99℃下进行)，引物
‑
靶标DNA链退火(通常在约40
‑
70℃下进行)，以及DNA聚合酶介导的引物延伸(通常在约50
‑
72℃下进行)，从而产生新的互补的扩增子链。反应过程可包括多达25
‑
45个循环以产生足够的扩增。
[0004]PCR通常使用热稳定的DNA聚合酶进行，这些酶可以抵挡与去退火相关联的高温而不会因蛋白热变性而失活。
[0005]提高PCR速度可具有显著的商业优势，扩增的样品可以更快速地生成，冷热循环反应周期更少。现有的Taq聚合酶以有限的速率延伸引物。
[0006]因此，明显需要能够实现提高速度的PCR扩增的热稳定的DNA聚合酶。

技术实现思路

[0007]本专利技术包括具有与野生型相异的一个或多个点突变的突变型Taq聚合酶(SEQ ID ...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.突变型Taq聚合酶，其包含在以下位点处对野生型序列的一种或多种突变：D144R(SEQ ID NO 6
‑
7)、D578S(SEQ ID NO 8
‑
9)、D732C(SEQ ID NO 10
‑
11)、D732G(SEQ ID NO 12
‑
13)、D732H(SEQ ID NO 14
‑
15)、D732N(SEQ ID NO 16
‑
17)、D732P(SEQ ID NO 18
‑
19)、D732Q(SEQ ID NO 20
‑
21)、D732S(SEQ ID NO 22
‑
23)、D732T(SEQ ID NO 24
‑
25)、E39K(SEQ ID NO 26
‑
27)、E39K/E230K(SEQ ID NO 28
‑
29)、E39K/D320R(SEQ ID NO 30
‑
31)、E39K/E507K(SEQ ID NO 32
‑
33)、E39K/E520K(SEQ ID NO 34
‑
35)、E39K/E537K(SEQ ID NO 36
‑
37)、E39K/D578R(SEQ ID NO 38
‑
39)、E39K/D732R(SEQ ID NO 40
‑
41)、E39K/E742K(SEQ ID NO 42
‑
43)、E39K/E189K(SEQ ID NO 44
‑
45)、E101K(SEQ ID NO 46
‑
47)、E117K(SEQ ID NO 48
‑
49)、E130K(SEQ ID NO 50
‑
51)、K131E(SEQ ID NO 52
‑
53)、E132K(SEQ ID NO 54
‑
55)、E159K(SEQ ID NO 56
‑
57)、E189C(SEQ ID NO 58
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59)、E189D(SEQ ID NO 60
‑
61)、E189K(SEQ ID NO 62
‑
63)、E189K/E230K(SEQ ID NO 64
‑
65)、E189K/E507K(SEQ ID NO 66
‑
67)、E189K/E537K(SEQ ID NO 68
‑
69)、E189K/D578R(SEQ ID NO 70
‑
71)、E189K/D732R(SEQ ID NO 72
‑
73)、E189K/E742K(SEQ ID NO 74
‑
75)、E189K/E230K/E537K(SEQ ID NO 76
‑
77)、E189K/E507K/E537K(SEQ ID NO 78
‑
79)、E189K/E520K/E537K(SEQ ID NO 80
‑
81)、E189K/E230K/E507K(SEQ ID NO 82
‑
83)、E189K/E230K/E520K(SEQ ID NO 84
‑
85)、E189K/E230K/D578R(SEQ ID NO 86
‑
87)、E189K/E507K/D578R(SEQ ID NO 88
‑
89)、E189K/E230K/D732R(SEQ ID NO 90
‑
91)、E189K/E537K/D732R(SEQ ID NO 92
‑
93)、E189K/E507K/E520K(SEQ ID NO 94
‑
95)、E189K/E537K/D578R(SEQ ID NO 96
‑
97)、E189K/E537K/E742K(SEQ ID NO 98
‑
99)、E189K/D732R/E742K(SEQ ID NO 100
‑
101)、E189L(SEQ ID NO 102
‑
103)、E189M(SEQ ID NO 104
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105)、E189P(SEQ ID NO 106
‑
107)、E189Q(SEQ ID NO 108
‑
109)、E189R(SEQ ID NO 110
‑
111)、E189T(SEQ ID NO 112
‑
113)、E189W(SEQ ID NO 114
‑
115)、E201K(SEQ ID NO 116
‑
117)、E209K(SEQ ID NO 118
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119)、E230A(SEQ ID NO 120
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121)、E230C(SEQ ID NO 122
‑
123)、E230F(SEQ ID NO 124
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125)、E230H(SEQ ID NO 126
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127)、E230K(SEQ ID NO 128
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129)、E230K/E507K(SEQ ID NO 130
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131)、E230K/E520K(SEQ ID NO 132
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133)、E230K/E537K(SEQ ID NO 134
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135)、E230K/D578R(SEQ ID NO 136
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137)、E230K/D732R(SEQ ID NO 138
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139)、E230K/E742K(SEQ ID NO 140
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141)、E230K/E507K/E520K(SEQ ID NO 142
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143)、E230K/E507K/E537K(SEQ ID NO 144
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145)、E230K/E520K/D578R(SEQ ID NO 146
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147)、E230K/E537K/D578R(SEQ ID NO 148
‑
149)、E230K/E537K/D732R(SEQ ID NO 150
‑
151)、E230K/E507K/E742K(SEQ ID NO 152
‑
153)、E230K/E520K/E742K(SEQ ID NO 154
‑
155)、E230K/E537K/E742K(SEQ ID NO 156
‑
157)、E230K/D578R/E742K(SEQ ID NO 158
‑
159)、E230K/D732R/E742K(SEQ ID NO 160
‑
161)、E230M(SEQ ID NO 162
‑
163)、E230N(SEQ ID NO 164
‑
165)、E230P(SEQ ID NO 166
‑
167)、E230Q(SEQ ID NO 168
‑
169)、E230R(SEQ ID NO 170
‑
171)、E230S(SEQ ID NO 172
‑
173)、E230T(SEQ ID NO 174
‑
175)、E230V(SEQ ID NO 176
‑
177)、E230W(SEQ ID NO 178
‑
179)、E230Y(SEQ ID NO 180
‑
181)、E315K(SEQ ID NO 182
‑
183)、D320R(SEQ ID NO 184
‑
185)、L322S(SEQ ID NO 186
‑
187)、A323F(SEQ ID NO 188
‑
189)、R328D(SEQ ID NO 190
‑
191)、G330P(SEQ ID NO 192
‑
193)、R334D(SEQ ID NO 194
‑
195)、P336G(SEQ ID NO 196
‑
197)、E337K(SEQ ID NO 198
‑
199)、P338G(SEQ ID NO 200
‑
201)、Y339A(SEQ ID NO 202
‑
203)、D344R(SEQ ID NO 204
‑
205)、E347K(SEQ ID NO 206
‑
207)、A348F(SEQ ID NO 208
‑
209)、R349D(SEQ ID NO 210
‑
211)、L351S(SEQ ID NO 212
‑
213)、L361S(SEQ ID NO 214
‑
215)、L365S(SEQ ID NO 216
‑
217)、G366P(SEQ ID NO 218
‑
219)、P368G(SEQ ID NO 220
‑
221)、M374S(SEQ ID NO 222
‑
223)、L380S(SEQ ID NO 224
‑
225)、D381R(SEQ ID NO 226
‑
227)、P382G(SEQ ID NO 228
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229)、S383I(SEQ ID NO 230
‑
231)、N384R(SEQ ID NO 232
‑
233)、A391F(SEQ ID NO 234
‑
235)、E397K(SEQ ID NO 236
‑
237)、E401K(SEQ ID NO 238
‑
239)、A407F(SEQ ID NO 240
‑
241)、A414F(SEQ ID NO 242
‑
243)、
E507A(SEQ ID NO 244
‑
245)、E507K/E520K(SEQ ID NO 246
‑
247)、E507K/E537K(SEQ ID NO 248
‑
249)、E507K/D578R(SEQ ID NO 250
‑
251)、E507K/D732R(SEQ ID NO 252
‑
253)、E507K/E742K(SEQ ID NO 254
‑
255)、E507K/E537K/D578R(SEQ ID NO 256
‑
257)、E507K/D578R/D732R(SEQ ID NO 258
‑
259)、E507K/E520K/E537K(SEQ ID NO 260
‑
261)、E507K/E520K/D578R(SEQ ID NO 262
‑
263)、E507K/E520K/E742K(SEQ ID NO 264
‑
265)、E507K/E537K/E742K(SEQ ID NO 266
‑
267)、E507K/D732R/E742K(SEQ ID NO 268
‑
269)、E507Q(SEQ ID NO 270
‑
271)、E507R(SEQ ID NO 272
‑
273)、E507S(SEQ ID NO 274
‑
275)、E507T(SEQ ID NO 276
‑
277)、E507Y(SEQ ID NO 278
‑
279)、V518A(SEQ ID NO 280
‑
281)、E520V(SEQ ID NO 282
‑
283)、E520K/E537K(SEQ ID NO 284
‑
285)、E537A(SEQ ID NO 286
‑
287)、E537F(SEQ ID NO 288
‑
289)、E537I(SEQ ID NO 290
‑
291)、E537K(SEQ ID NO 292
‑
293)、E537K/D732R(SEQ ID NO 294
‑
295)、E537K/E742K(SEQ ID NO 296
‑
297)、E537K/D578R/D732R(SEQ ID NO 298
‑
299)、E520K/E537K/E742K(SEQ ID NO 300
‑
301)、E537R(SEQ ID NO 302
‑
303)、E537Y(SEQ ID NO 304
‑
305)、L541S(SEQ ID NO 306
‑
307)、N565R(SEQ ID NO 308
‑
309)、T569A(SEQ ID NO 310
‑
311)、A570F(SEQ ID NO 312
‑
313)、S575I(SEQ ID NO 314
‑
315)、S577I(SEQ ID NO 316
‑
317)、D578F(SEQ ID NO 318
‑
319)、D578H(SEQ ID NO 320
‑
321)、D578R(SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱振宇，孙大鹏，
申请(专利权)人：武汉爱博泰克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：

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