【技术实现步骤摘要】
一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法
[0001]本专利技术涉及细胞工程
,具体涉及一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法。
技术介绍
[0002]随着人们物质生活水平的逐渐提高,吃饱穿暖对人们来说不再是难题,生活的富裕使得人们开始追求更高层面的生活。
[0003]细胞是我们人体的基本组成单位,人体衰老的原因就是体内细胞的衰老。随着年龄的增长,人体内细胞增殖和分化能力减弱,新生细胞补充不足,衰老细胞不能及时被替代。细胞的老化促使人体的各生理系统功能下降和衰变,从而导致各种疾病的发生,最终引起死亡。
[0004]干细胞是一类具有自我更新,多向分化的多潜能细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,医学界称为“万用细胞”。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。
[0005]干细胞第一次从脂肪组织提取是在2001年的时候,用于在很多医疗应用都已被广泛承认,而且脂肪提取的难度不高、增加了脂肪干细胞的优势。自从那时候,脂肪干细胞的密集研究和成 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种二段式自体脂肪干细胞裂解液治疗男性勃起障碍及女性海绵体修复的方法,其特征在于,包括下列步骤:(1)在无菌条件下式采集脂肪;(2)将步骤(1)采集的脂肪搅碎,收集于离心管中,加入等体积的磷酸盐缓冲液,剧烈震荡后室温静置分层,收集上层部分用磷酸盐缓冲液洗涤;(3)加入1
‑
1.5倍体积的胶原酶消化,然后加入1
‑
1.5倍体积的含12
‑
14%血清DMEM
‑
LG终止消化,充分混均后室温静置12
‑
15min分层,去掉上层,离心,并收集下层部分;(4)加入2.2
‑
2.5倍体积的红细胞裂解液重悬3
‑
5min,离心并弃上清;用PBS液清洗,采用50
‑
60μm滤膜过滤后,向所得细胞中加含12
‑
14%血清DMEM
‑
LG培养液,离心收集细胞,并于100
‑
120U/mL青霉素或链霉素、12
‑
14%血清DMEM
‑
LG中培养,即获得脂肪干细胞;(5)将步骤(4)中获得的脂肪干细胞所述进行传代培养;(6)将步骤(5)步获得的传代细胞调整细胞浓度为2
‑5×
106,溶解于生理盐水中,所用生理盐水的体积(ml)与步骤(5)步中脂肪干细胞质量(g)的比例为7:3,于
‑
85℃冰箱中冷冻至完全冻结,后置于39℃温度条件下加热,完成冻融操作,离心获得细胞悬液X1和沉淀X1,收集细胞悬液X1,获得初步裂解物;(7)向步骤(6)步获得的沉淀X1中加入含有体积浓度为0.15%的动物细胞裂解液的...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙长林,胡海涛,
申请(专利权)人:杭州新氧生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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