一种生蚝叶组培芽繁殖方法技术

本发明专利技术涉及生蚝叶的培养繁殖能力，公开了一种生蚝叶组培芽繁殖方法，包括如下步骤：外植体依次进行在75％酒精中振动漂洗、在0.1％升汞溶液中浸泡震荡、在无菌水中震荡浸泡、之后将外植体接种于无菌芽培养基进行培养，得到生蚝叶无菌芽；(2)在超净工作台内将培养获得的生蚝叶无菌芽接种于增殖培养基，得到继代培养的无菌苗；(3)在超净工作台内取出继代培养的无菌苗，进行分株处理，再分别接种于生根培养基，获得带根的生蚝叶幼苗；(4)取出带根的生蚝叶幼苗进行洗根，移栽置栽培板上进行炼苗、育苗，分栽培养，即可收得生蚝叶产品，本发明专利技术方法能够快速的繁殖优质生蚝叶，使生蚝叶品种和优良特性得以保存。优良特性得以保存。优良特性得以保存。

【技术实现步骤摘要】
一种生蚝叶组培芽繁殖方法


[0001]本专利技术涉及生蚝叶的培养繁殖的
，公开了一种生蚝叶组培芽繁殖方法。

技术介绍

[0002]生蚝叶(Mertensia maritime)又名牡蛎叶(oyster leaf)，是紫草科海滨草属，原产于北半球温带至寒带如北欧挪威及冰岛、东北亚如俄罗斯和日本北海道等滨海砾石或鹅卵石滩耐高寒多年生植物一个非常独特的物种在海边的金色沙滩卵石滩。其叶片多汁，白霜，蓝绿色的叶子和小、尖、钟状、粉红色到蓝色的花朵，生长习性匍匐，开花于6月中旬到8月。因生蚝叶具有似牡蛎风味而可作为生蚝之替代品，多被应用于法国菜之沙拉或前菜中。然而生蚝叶除了具备特殊风味外，还具高锌含量特性。
[0003]目前，国内生蚝叶种植较少，主要以户外栽培为主。户外种植，其生长周期受外界气候条件限制，病虫害多，洁净度差。植物工厂栽培生蚝叶很好的发挥工厂的优势——可周年生产、极为洁净且无病虫害等影响。但其繁殖也是一大问题，需要人工授粉，且种子发芽率低，不耐储存。

技术实现思路

[0004]为此，需要提供一种生蚝叶组培芽繁殖方法，解决现有国内生蚝叶种植繁殖困难，人工种植，种植发芽率低的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了一种生蚝叶组培芽繁殖方法，包括如下步骤：
[0006](1)选取组培的生蚝叶的外植体，清洗生蚝叶的外植体，在超净工作台内将洗好的外植体依次进行在75％酒精中振动漂洗、在0.1％升汞溶液中浸泡震荡、在无菌水中震荡浸泡、之后将外植体接种于无菌芽培养基进行培养，得到生蚝叶无菌芽，所述无菌芽培养基包括如下组分：B5培养基、0.5
‑
1.5mg/L6
‑
BA、0.1
‑
0.5mg/L NAA、7g/L琼脂、30g/L蔗糖；
[0007](2)在超净工作台内将培养获得的生蚝叶无菌芽接种于增殖培养基，得到继代培养的无菌苗，增殖培养基包括如下组分：B5培养基、0.5mg/L 6
‑
BA、0
‑
0.1mg/L NAA、7g/L琼脂、30g/L蔗糖；
[0008](3)在超净工作台内取出继代培养的无菌苗，切割分离进行分株处理，再分别接种于生根培养基，获得带根的生蚝叶幼苗，所述生根培养基包括：1/4B5培养基或1/2B5培养基或B5培养基、0.2
‑
1.0mg/L IBA、7g/L琼脂、30g/L蔗糖；
[0009]进一步，所述生蚝叶的外植体为生蚝叶分蘖芽。
[0010]进一步，步骤(1)中外植体依次在75％的酒精震荡漂洗45s，升汞溶液中浸泡震荡45s，无菌水中震荡浸泡30s。
[0011]进一步，所述无菌芽培养基中含有：1.5mg/L 6
‑
BA、和0.2mg/L NAA。
[0012]进一步，所述增殖培养基含有0.05mg/L NAA。
[0013]进一步，所述生根培养基包括如下组分：1/4B5培养基、0.5mg/L IBA、7g/L琼脂、30g/L蔗糖。
[0014]进一步，所述步骤1
‑
3的培养条件为：置于18
‑
24℃，光照强度2000lx、光周期12h的培养室。
[0015]上述技术方案具有以下有益效果：
[0016]本专利技术中，在室内模拟气候和光照环境下进行生蚝叶的组培繁殖，解决了生蚝叶生长受季节气候的限制，可实现周年不间断繁殖，其培养过程如下：无菌芽培养
→
芽增殖培养
→
生根培养
→
完整植株，能够快速繁殖优质无菌种苗，既可以快速育苗，又可以克服生蚝叶种子萌发率低繁殖难以及长时间营养生长植株老化的问题，使生蚝叶品种和优良特性得以保存，且可实现生蚝叶全年周期性生产。
附图说明
[0017]图1
‑
9为具体实施方式所述实施例1中试验组1
‑
9的培养情况。
[0018]图10为具体实施方式所述实施例3中试验组5的生根情况。
[0019]图11为具体实施方式所述实施例4进行分栽育苗后的生蚝叶。
具体实施方式
[0020]为详细说明技术方案的
技术实现思路
、构造特征、所实现目的及效果，以下结合具体实施例并配合附图详予说明。
[0021]实施例1：生蚝叶无菌芽的培养，并对外植体进行优选，
[0022](1)以外植体、培养基、6
‑
BA、NAA进行四因素三水平的正交试验。
[0023]四因素：外植体、培养基、6
‑
BA、NAA。
[0024]三水平：外植体选择1(分蘖芽)、2(叶片)、3(种籽)3个不同部位；培养基选址1(MS)、2(改良MS)、3(B5)3个不同培养基；6
‑
BA选择1(0.5mg/L)、2(1.0mg/L)、3(1.5mg/L)3个不同浓度；NAA选择1(0.1mg/L)、2(0.2mg/L)、3(0.5mg/L)3个不同浓度。通过以上正交设计进行初步筛选适宜外植体、培养基、6
‑
BA、NAA。一个处理3瓶，重复3次。
[0025](2)将生蚝叶种籽、叶片、分蘖芽冲洗干净，置于75％酒精震荡漂洗45s，0.1％升汞溶液中浸泡震荡45s，无菌水中震荡浸泡60s，再分别接种于不同培养基配方+7g/L琼脂+30g/L蔗糖+0.1g/L肌醇，具体试验设计见表1。(3)如表2
‑
1所示，共9个处理)，每瓶接种1个外植体。置于24℃，光照强度2000lx、光周期12h/d的培养室中培养。
[0026](3)图1
‑
9为上述试验组1
‑
9培养的无菌芽的图片，从生蚝叶的分蘖芽、叶片和种籽生长情况的试验结果可见，生蚝叶的分蘖芽为其生蚝叶芽培养的较佳外植体。其中生蚝叶的芽培养的试验组7芽的生长状态较好且有一定的增殖效果。因此得出生蚝叶无菌芽培养的较佳配方为：B5培养基+1.5mg/L6
‑
BA+0.2mg/L NAA+7g/L琼脂+30g/L蔗糖
[0027]因此，本专利技术中，优选的，生蚝叶的组培的外植体为分孽芽，培养基中6
‑
BA用量为1.5mg/L；NAA用量为0.2mg/L。
[0028]表1外植体选择的实验设置
[0029][0030]实施例2：芽增殖培养
[0031](1)取实施例1中试验组7得到的生蚝叶无菌芽，进行分株处理，再分别接种于不同培养基配方+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，1个组培瓶接1个芽，具体试验设计见表3，于18℃、光照强度2000lx、光周期12h/d的培养室中培养,定期观察生长情况。
[0032]表2，芽增殖培养条件
[0033]试验组营养液6
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BAmg/LNAAmg/L培养温度℃YB1B50.50.0524YB2B50.50.124YB3B50本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生蚝叶组培芽繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)选取组培的生蚝叶的外植体，清洗生蚝叶的外植体，在超净工作台内将洗好的外植体依次进行在75％酒精中振动漂洗、在0.1％升汞溶液中浸泡震荡、在无菌水中震荡浸泡、之后将外植体接种于无菌芽培养基进行培养，得到生蚝叶无菌芽，所述无菌芽培养基包括如下组分：B5培养基、0.5
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1.5mg/L 6
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BA、0.1
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0.5mg/L NAA、7g/L琼脂、30g/L蔗糖；(2)在超净工作台内将培养获得的生蚝叶无菌芽接种于增殖培养基，得到继代培养的无菌苗，增殖培养基包括如下组分：B5培养基、0.5mg/L 6
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BA、0
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0.1mg/L NAA、7g/L琼脂、30g/L蔗糖；(3)在超净工作台内取出继代培养的无菌苗，切割分离进行分株处理，再分别接种于生根培养基，获得带根的生蚝叶幼苗，所述生根培养基包括：1/4 B5培养基或1/2 B5培养基或B5培养基、0.2
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【专利技术属性】
技术研发人员：龚化勤，林河也，郑娜娜，
申请(专利权)人：福建省中科生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：