一种高效生产广藿香醇的工程菌及其构建方法和应用技术

技术编号:30516982 阅读:35 留言:0更新日期:2021-10-27 22:59
本发明专利技术公开了一种高效生产广藿香醇的工程菌及其构建方法和应用,所述工程菌以解脂耶氏酵母菌为出发菌株,在解脂耶氏酵母菌的基因组中插入优化的广藿香醇合酶编码基因PS1和tHMGR编码基因后得到;所述优化的广藿香醇合酶编码基因PS1如SEQ ID NO.1所示;所述tHMGR编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术的工程菌能够高效合成广藿香醇,构建方法高效,操作简单,此外本发明专利技术提供的收集产物的方法采用边发酵边萃取的方法,及时的将生产的广藿香醇萃取至有机相中,缓解了胞内溶解广藿香醇的压力,有效提高广藿香醇的产量,为人工细胞合成广藿香醇奠定了基础。香醇奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种高效生产广藿香醇的工程菌及其构建方法和应用


[0001]本专利技术属于生物工程领域,具体涉及一种高效生产广藿香醇的工程菌及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]植物天然产物(Plant

derived natural products)是指植物体内具有生物学活性的一类次生代谢产物。植物种类和生态环境的多样性造就了植物天然产物结构和性能的丰富多样性,因此,植物天然产物的种类和数量非常巨大,目前已知的种类主要包括萜类、生物碱类、甾体类、黄酮类及酚类等。其中,萜类(Terpenoids)又是植物天然产物中数量最多、分布最广的一大类物质,其是以异戊二烯为结构单元的一系列化合物的统称。多数萜类化合物具有药理学和生物学活性,也可以作为香料、药物、色素等精细化学品的重要生产原料,因此在食品、药品和化工等多个领域应用广泛。目前,萜类化合物的工业生产主要还是通过直接从植物中提取而得。但是,这一生产方式存在诸多弊端,如植物资源稀缺、目标物质含量低、分离纯化效率低等。利用化学合成法也能够生产萜类化合物,但这一生产方式同样存在环境污染严重、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效生产广藿香醇的工程菌,其特征在于,所述工程菌以解脂耶氏酵母菌为出发菌株,在解脂耶氏酵母菌的基因组中插入优化的广藿香醇合酶编码基因PS1和tHMGR编码基因后得到;所述优化的广藿香醇合酶编码基因PS1如SEQ ID NO.1所示;所述tHMGR编码基因如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的高效生产广藿香醇的工程菌,其特征在于,所述工程菌为重组解脂耶氏酵母菌是在解脂耶氏酵母基因组中整合经优化的广藿香醇合酶酶编码基因PS1的表达盒和tHMGR编码基因表达盒后得到。3.根据权利要求1所述的高效生产广藿香醇的工程菌,其特征在于,所述优化的广藿香醇合酶表达盒和tHMGR表达盒通过质粒形式导入解脂耶氏酵母,然后整合到解脂耶氏酵母基因组上。4.根据权利要求1所述的高效生产广藿香醇的工程菌,其特征在于,所述解脂耶氏酵母优选为Yarrowia lipolytica Po1fΔku70。5.根据权利要求1所述的高效生产广藿香醇的工程菌,其特征在于,所述PS1表达盒的启动子为解脂耶氏酵母的P
TEFin
启动子或P
EXP
启动子;所述PS1终止子为解脂耶氏酵母的T
XPR2T
终止子或者T
CYC1t
终止子。6.根据权利要求1所述的高效生产广藿香醇的工程菌,其特征在于,所述述tHMGR表达盒的启动子为解脂耶氏酵母的P
TEFin
启动子、P
TEF
启动子或P
EXP
启动子;所述tHMGR终止子为解脂耶氏酵母的T
XPR2T
终止子、T
CYC1t
终止子。7.一种权利要求1所述高效生产广藿香醇的工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)重组质粒pUC

leu

A08

...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄和彭倩倩沈琦杨彩玲施天穹
申请(专利权)人:南京师范大学
类型:发明
国别省市:

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