一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法技术

本发明专利技术公开一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，包括以下步骤：(1)将氯化石蜡溶于有机溶剂，得到氯化石蜡溶液，并向其中加入血清，静置平衡后得到底物体系；(2)向底物体系先后加入磷酸钾缓冲溶液、肝微粒体和NADPH酶再生体系，摇匀后得到最终反应体系，然后置于37℃水浴中振荡反应；(3)向步骤(2)的反应体系加入冰冷的有机溶剂终止反应，然后进行离心，取上层清液，测定氯化石蜡含量。本发明专利技术采用血清作为氯化石蜡的载体，促进氯化石蜡与肝微粒体反应，显著提高氯化石蜡的代谢清除率，实现肝微粒体离体代谢氯化石蜡的代谢清除率的测定。粒体离体代谢氯化石蜡的代谢清除率的测定。粒体离体代谢氯化石蜡的代谢清除率的测定。

【技术实现步骤摘要】
一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法


[0001]本专利技术涉及一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法。

技术介绍

[0002]氯化石蜡(CPs)是一类氯代烷烃类混合物，主要应用于金属加工业和塑料工业。它是我国产地环境和农产品污染最严重的卤代有机污染物之一。根据碳链长度，氯化石蜡可分为短链氯化石蜡(SCCPs，C
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)、中链氯化石蜡(MCCPs，C
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)和长链氯化石蜡(LCCPs，C
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)。研究显示，氯化石蜡对动物具有生殖毒性和发育毒性。
[0003]现有技术中，通过动物肝微粒体离体代谢卤代有机污染物是研究其在动物体内代谢转化机制的重要手段，后者是评价其生物毒性大小的重要因素。但目前尚无肝微粒体离体代谢氯化石蜡的报道。现时肝微粒体离体代谢卤代有机污染物的方法包括以下步骤：采用DMSO溶解卤代有机污染物；在反应体系中加入磷酸钾缓冲溶液、肝微粒体、卤代有机污染物的DMSO溶液；将反应体系置于37℃水浴锅预孵化5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)将氯化石蜡溶于有机溶剂，得到氯化石蜡溶液，并向其中加入血清，静置平衡后得到底物体系；(2)向底物体系先后加入磷酸钾缓冲溶液、肝微粒体和NADPH酶再生体系，摇匀后得到最终反应体系，然后置于37℃水浴中振荡反应；(3)向步骤(2)的反应体系加入冰冷的有机溶剂终止反应，然后进行离心，取上层清液，测定氯化石蜡含量。2.根据权利要求1所述的肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，其特征在于：所述步骤(1)血清加入的体积为氯化石蜡溶液的1～10倍。3.根据权利要求2所述的肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，其特征在于：所述步骤(1)中静置平衡的过程是在4℃下进行6～12h，或在室温下进行1～3h。4.根据权利要求3所述的肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，其特征在于：所述有机溶剂为乙腈。5.根据权利要求4所述的肝微粒体离体代谢氯化石蜡的方法，其特征在于：所述步骤(1)中有机溶剂的体积在最...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓梅，王旭，殷秋妙，丁晨红，王威利，苏秋权，王英，崔泽锋，
申请(专利权)人：广东省农业科学院农业质量标准与监测技术研究所，
类型：发明
国别省市：