【技术实现步骤摘要】
一种针刺血清外泌体及其制备方法和用途
[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种针刺血清外泌体及其制备方法和用途。
技术介绍
[0002]类风湿性关节炎是一种病因未明、以全身多关节的慢性滑膜炎症为特征，甚至可以导致关节的破坏和畸形的自身免疫性疾病。类风湿性关节炎发病率高、复发率高、致残率高，目前主要治疗药物包括非甾体抗炎药、皮质类固醇、改善病情抗风湿病药和生物制剂等，但是长期服用这些药物会导致多种副作用和不良反应，如心肌梗塞、消化性溃疡、伤口愈合不良、肝肾功能不全等。
[0003]中医对类风湿性关节炎的认识年代久远，风湿性疾病属于中医“痹证”、“历节”等范畴，病位主要在筋骨、关节、肌肉，主要表现为关节红、肿、热、痛、活动不利，轻者四肢肌肉关节受累，重者内舍于脏，引起脏腑的病变。本病属本虚标实，本虚为阴阳、气血、脏腑亏损，标实有外邪、痰浊、淤血之不同。
[0004]研究发现针灸可以改善类风湿性关节炎相关症状，在临床治疗中已显示出安全、有效、不良反应小等优势。针灸作为一种物理刺激，在穴位局部被感知并转化...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种针刺血清外泌体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.类风湿性关节炎模型的建立于大鼠右后足足底注射完全弗式佐剂致炎，24小时后，对大鼠进行介入电针治疗，并利用全自动热辐射刺激仪测量大鼠足底痛阈，根据痛阈测量结果判断类风湿性关节炎模型是否造模成功；S2.提取血清对造模成功的大鼠进行腹主动脉血液样本采集；血液样本静置2h后，于4℃、2000rpm的离心机中离心10min；离心后，取上清液为血清，分装于EP管中，且每个EP管中分装500μL血清，并全部放入
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80℃的冰箱中冻存备用；S3.提取外泌体取步骤S2中冻存的血清，在4℃的冰箱中充分解冻；血清解冻后，于4℃、3000gpm的离心机中离心15min；离心后，取上清液过滤，并收集滤液；按4：1的混合比向所述滤液中加入沉淀剂，均匀混合；将混合后的混合物置于4℃的冰箱中孵育30分钟；孵育后，于4℃、1500gpm的离心机中离心5min；离心后，去除上清液，获得米白色外泌体沉淀颗粒。2.根据权利要求1所述的一种针刺血清外泌体的制备方法，其特征在于：在所述步骤S1的类风湿性关节炎模型的建立中，以痛阈降低75％为造模成功标准。3.根据权利要求1所述的一种针刺血清外泌体的制备方法，其特征在于：在所述步骤S1的类风湿性关节炎模型的建立中，利用1寸针灸针和SDZ
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V型电子针疗仪对大鼠双侧足三里穴和环跳穴进行介入电针治疗，且三里穴处的针灸针与电子针疗仪...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈波，李明月，郭义，陈泽林，李柠岑，李牧洋，王婷婷，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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