一种黄精总黄酮的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种黄精总黄酮纯化工艺，将黄精切片烘干粉碎，过60目筛；称取粉碎后的黄精适量，按照1:18的料液比加入提取溶剂，经过水浴提取后离心得上清液，将上清液进行旋转蒸发浓缩，用提取溶剂定容至一定体积，得到黄精总黄酮粗提液，然后将粗提液加入已预处理的树脂柱中；待流出液全部流出后洗去水溶性杂质，加入提取溶剂进行洗脱，收集洗脱液浓缩，得黄精总黄酮纯化液；经大孔吸附树脂对黄精总黄酮的处理，使得提取物中黄酮纯度有了较大提升，并且操作时间短，方便后续对黄酮提取物进行研究与开发，解决了现有黄精总黄酮纯化工艺较为原始、操作步骤繁琐、操作时间长、生产效率非常低下的问题。低下的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种黄精总黄酮的纯化方法


[0001]本专利技术涉及黄酮纯化
，具体为一种黄精总黄酮的纯化方法。

技术介绍

[0002]在我国，黄精有着悠久的用药历史，是我国重要的药食同源植物，具有独特的天然生物活性，黄精总黄酮即为其天然生物活性成分之一。现代药理研究发现黄精总黄酮具有明显的抗氧化、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、抗菌、降血糖、降血脂等药理作用。现有的黄精总黄酮纯化工艺较为原始，操作步骤十分繁琐，导致操作时间较长，生产效率非常低下，因此急需一种高效、快速的黄精总黄酮纯化工艺。中国CN 104940609专利公开的一种黄精中多种活性成分提取分离的方法采用闪式提取～脱脂～反复萃取～上柱～干燥的工艺路线，经过反复分离纯化获得黄精黄酮，此工艺存在过程复杂、对设备要求高、工艺时间较长、所用试剂存在安全隐患等缺点。

技术实现思路

[0003]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种黄精总黄酮的纯化工艺，解决了现有黄精总黄酮在进行纯化时，工艺手段较为原始、操作步骤十分繁琐、操作时间较长、生产效率低下的问题。
[0004]本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种黄精总黄酮的纯化方法，包括以下步骤：(1)将黄精切片，在45℃烘干至恒重，然后经粉碎机粉碎，过60目筛，得到黄精粉；(2)称取步骤(1)得到的黄精粉适量，按照1:18的料液比加入提取溶剂，经过水浴提取后离心，取上清，得到上清液；(3)将步骤(2)得到的上清液进行旋转蒸发浓缩，用提取溶剂定容至一定体积，即为黄精总黄酮粗提液；(4)在已预处理好的大孔吸附树脂柱中，缓慢加入pH值为3～7的步骤(3)得到的黄精总黄酮粗提液，吸附时间为0～24h，吸附温度为15～35℃；待流出液全部流出后洗去水溶性杂质，缓慢加入提取溶剂进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至100mL，即为黄精总黄酮纯化液；(5)将黄精总黄酮粗提液用吸附树脂在优化条件下进行吸附纯化，计算纯化前后的纯度。
[0005]步骤(4)中，所述的大孔吸附树脂为D101型号、NKA
‑
9型号、AB
‑
8型号、S
‑
8型号大孔树脂中的一种或几种，作为优选，所述的大孔吸附树脂为NKA
‑
9型号的大孔吸附树脂。
[0006]作为优选，步骤(4)中，所述的黄精粗提液pH为5。
[0007]作为优选，步骤(4)中，所述的吸附时间为8h。
[0008]作为优选，步骤(4)中，所述的吸附温度为25℃。
[0009]作为优选，步骤(1)、步骤(2)和步骤(5)中，所述的提取溶剂均为浓度为70％的乙
醇浓度。
[0010]与现有技术相比，具备以下有益效果：本专利技术公开的黄精黄酮纯化方法使得提取物中黄酮纯度有较大提高，并且操作时间较短，方便后续进一步对黄酮提取物进行研究与开发，解决了现有的黄精总黄酮在进行纯化时，工艺手段较为原始、操作步骤繁琐、操作时间较长、生产效率非常低下的问题。
附图说明
[0011]图1为四种大孔吸附树脂24h吸附曲线；图2为黄精粗提液pH值对吸附效果的影响；图3为吸附时间对吸附效果的影响；图4为吸附温度对吸附效果的影响。
具体实施方式
[0012]以下结合附图实施例对本专利技术作进一步详细描述。
[0013]实施例1(1)将黄精切片，在45℃烘干至恒重，然后经粉碎机粉碎，过60目筛；(2)称取粉碎后的黄精50g，加入900mL70％乙醇溶液，经过水浴提取后离心，取上清；(3)将上清液进行旋转蒸发浓缩，用70％乙醇溶液定容至200mL，即为黄精总黄酮粗提液；(4)精密称量已经预处理完毕的D101、NKA
‑
9、AB
‑
8、S
‑
8大孔树脂各1.00g分别置于四个容量为100mL的三角瓶中，加入的黄精总黄酮粗提液20mL；(5)置于25℃恒温条件下，在110r/min的摇床中震荡并计时，在0h、0.5h、1h、2h、4h、8h、24h时取2mL上清液，置于25mL容量瓶中。加入5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min，再加入10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，再加入4％氢氧化钠溶液10mL，用70％乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min，以提取时浓度相同的乙醇浓度溶液为参比溶液，于分光光度计波长510nm处测定吸光度值。绘制黄精总黄酮在D101、NKA
‑
9、AB
‑
8、S
‑
8大孔树脂上的静态吸附曲线，详见附图1。由图可以看出随着吸附时间的延长，黄精总黄酮溶液的吸光度值呈现下降趋势且在8小时以后趋于稳定。同时NKA
‑
9型号的大孔吸附树脂明显比其他三种的吸附效果，因而选择NKA
‑
9为后续实验的树脂材料。
[0014]实施例2～6(1)将黄精切片，在45℃烘干至恒重，然后经粉碎机粉碎，过60目筛；(2)称取粉碎后的黄精50g，加入900mL70％乙醇溶液，经过水浴提取后离心，取上清；(3)将上清液进行旋转蒸发浓缩，用70％乙醇溶液定容至200mL，即为黄精总黄酮粗提液；(4)在已预处理好的NKA
‑
9大孔吸附树脂柱中，缓慢加入PH为5的黄精总黄酮粗提液；上述纯化过程中，所述的纯化的吸附时间为8h，吸附温度为25℃。
(5)待流出液全部流出后洗去水溶性杂质，缓慢加入提取溶剂进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液浓缩至100mL，即为黄精总黄酮纯化液。(6)取2mL黄精总黄酮纯化液，置于25mL容量瓶中。加入5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min，再加入10％硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，再加入4％氢氧化钠溶液10mL，用70％乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min，以提取时浓度相同的乙醇浓度溶液为参比溶液，于分光光度计波长510nm处测定吸光度值。(7)实施2～6的黄精总黄酮纯化方法的步骤和参数基本相同，不同之处在于实施例2～6的步骤(4)中所用的黄精粗提液pH值分别为3、4、5、6、7。以吸光值为考察指标，分析黄精粗提液pH值对吸附效果的影响，详见附图2。由图看出，样液pH值为3～4时，黄精总黄酮的吸光度值逐渐降低，吸附率增大；当pH值为4时，总黄酮的吸光度值最低，吸附效果最好；当pH值超过4时，吸光度值随pH值的升高而逐渐下降。这是因为黄酮为多羟基酚类化合物，呈酸性，通过范德华力与树脂吸附，而在碱性条件下，黄酮分子羟基去离子化，黄酮类化合物形成离子型结构，故不易被吸附。因此，在样液pH值为4时，NKA
‑
9大孔吸附树脂对黄精总黄酮吸附效果最好。
[0015]实施例7～11(1)将黄精切片，在45℃烘干至恒重，然后经粉碎机粉碎，过60目筛；(2)称取粉碎后的黄精50g，加入900mL70％乙醇溶液，经过水浴提取后离心，取上清；(3)将上清液进行旋转蒸发浓缩，用70％乙醇溶液定容至200mL，即为黄精总黄酮粗提液；(4)在已预处理好的NKA
‑
9大孔吸附树脂柱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄精总黄酮的纯化工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)将黄精切片，在45℃烘干至恒重，然后经粉碎机粉碎，过60目筛，得到黄精粉；(2)称取步骤(1)得到的黄精粉适量，按照1:18的料液比加入提取溶剂，经过水浴提取后离心，取上清，得到上清液；(3)将步骤(2)得到的上清液进行旋转蒸发浓缩，用提取溶剂定容至一定体积，即为黄精总黄酮粗提液；(4)在已预处理好的大孔吸附树脂柱中，缓慢加入pH值为3～7的步骤(3)得到的黄精总黄酮粗提液，吸附时间为0～24h，吸附温度为15～35℃；待流出液全部流出后洗去水溶性杂质，缓慢加入提取溶剂进行洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾巧君，杨青文，梁宗锁，蒋宇杰，汪得凯，王倩，
申请(专利权)人：泰安市仙露食品有限责任公司，
类型：发明
国别省市：