一种抗肿瘤药物的组合制造技术

本发明专利技术公开了一种以介芬胺和环巴胺的组合物或其药学上可接受的盐的组合物作为有效成分的抗肿瘤药物。本发明专利技术通过实验证明介芬胺和环巴胺的组合物是一个非常有效的Hedgehog信号通路的抑制剂，在3种人肿瘤细胞异种移植模型的实验中，该组合物被证明是一种有效的抗肿瘤剂，能强烈抑制人肺癌、胰腺癌和基底细胞癌细胞在体内的生长。另外在在以介芬胺和环巴胺的组合物作为有效成分治疗急性骨髓性白血病实验中，介芬胺和环巴胺的组合物被证明是一种有效的抗肿瘤剂，能够抑制急性骨髓性白血病的生长。介芬胺和环巴胺的组合物具有被开发成广谱抗肿瘤新药的巨大潜力。广谱抗肿瘤新药的巨大潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种抗肿瘤药物的组合


[0001]本专利技术涉及抗肿瘤药物，具体是关于一种以介芬胺和环巴胺的组合物或其组 合物药学上可接受的盐作为有效成分的抗肿瘤药物。

技术介绍

[0002]Hedgehog基因是一种分节极性基因，因突变的果蝇胚胎呈多毛团状，酷似 受惊刺猬而得名。哺乳动物中存在三个Hedgehog的同源基因：SonicHedgehog(SHH)、 Indian Hedgehog(IHH)和Desert Hedgehog(DHH)，分别编码Shh、Ihh和Dhh蛋白。 Hh蛋白家族成员均由两个结构域组成：氨基端结构域(Hh-N)及羧基端结构域 (Hh-C)，其中Hh-N有Hh蛋白的信号活性，而Hh-C则具有自身蛋白水解酶活性及 胆固醇转移酶功能。Hh前体蛋白在内质网中通过自身催化分裂成Hh-N及Hh-C两 部分，其中Hh-C共价结合胆固醇分子、并将其转移到Hh-N的羧基端，随后在酰基 转移酶的作用下Hh-N氨基端的半胱氨酸发生棕榈酰化。Hh蛋白只有通过这些翻 译后的修饰过程才能获得完全功能。
[0003]Hedgehog信号转导通路是一个经典的控制胚胎发育的信号转导途径，在胚胎 发育和胚胎形成后细胞的生长和分化过程中都起着重要的作用。目前大量的研究表 明，Hedgehog信号通路的异常激活与肿瘤发生有关，研究Hedgehog信号通路抑制剂 对于探明肿瘤的发生和发展从而有针对性地进行治疗具有重要的意义。Hedgehog 信号通路是与白血病肿瘤细胞的增殖密切相关的一种信号通路，其组成结构与功能 的变化影响白血病细胞的自我更新能力。针对Hedgehog为靶点的药物研究为白血病 的治疗提供了独特的办法。
[0004]基底细胞癌是最常见的皮肤恶性肿瘤之一。基底细胞癌(BCC)虽然死亡率较 低，但对患者身心健康的危害较大。电离辐射、紫外线、外伤等都与基底细胞癌的 发病密切相关。近几年的研究表明Hedgehog信号通路在基底细胞癌的发病中起着 重要作用。
[0005]介芬胺和环巴胺都是属于甾族的介藜芦生物碱的天然化合物。介芬胺又被称 为介藜芦碱，介藜芦胺，杰尔文和蒜藜芦碱等；环巴胺又被称为去氧芥芬胺，环 杷明等。介芬胺的英文名称是Jervine，环巴胺的英文名称是Cyclopamine。这两 个化合物都是最先从玉米百合花加州藜芦中分离出的化学物质，可导致独眼畸形。 1957年美国农业部的科学家开始了长达11年的研究，最终发现环巴胺和介芬胺是 导致美国当地山羊出生缺陷的罪魁祸首。介芬胺和环巴胺都能与Hedgehog信号通 路中的Smoothened(Smo)蛋白结合，从而抑制该蛋白活性。据文献报道，介芬胺 抑制Hedgehog信号通路的IC50为50nM，环巴胺抑制Hedgehog信号通路的IC50为 35nM。由于Hedgehog信号通路的突变与多种肿瘤的发病有关联，所以介芬胺和环 巴胺以及它们的组合物都可能成为治疗肿瘤，特别是基底细胞癌、髓母细胞瘤、 白血病、肺癌、胰腺癌、胆管癌、卵巢癌、胃癌、脑癌、食管癌、肝癌等的药物。 介芬胺的分子结构如下：
[0006][0007]环巴胺的分子结构如下：
[0008][0009]藜芦是多年生草本植物。鳞茎不明显膨大，根茎粗短，生长数根细长的肉 质根。茎直立，上部密生白色毛，基部常有叶鞘腐烂后残留的叶脉所成棕毛状纤维。 叶互生，椭圆状，披针形，基部渐窄，呈鞘状抱茎，叶上面绿色，下面灰绿。圆锥 花序，雄蕊6，花药肾形，子房具乳突状毛，花柱3，由各心皮顶端生出。蒴果， 种子有翅。藜芦有祛痰，催吐，杀虫。用于治疗中风痰壅、癫痫、淋巴管炎、疟 疾、乳腺炎、骨折、跌打损伤、头癣、疥疮等症，还可用于灭蛆、蝇等。藜芦分布 于东北、华北及陕西、甘肃、山东、河南、湖北、四川、贵州等地，生于海拔1200-3000m 的山坡林下或草丛中。藜芦的品种包括牯岭藜芦、毛穗藜芦、兴安藜芦及毛叶藜芦。 在这些藜芦品种的根部的提取物中都发现了介芬胺和环巴胺，只是两者的含量不 同。
[0010]GDC-0449是一种具有选择性Hedgehog信号通路的新型口服类药物。由罗氏 (Roche)的基因技术公司(Genentech)生产，已经由FDA批准用于治疗基底细胞 癌，这是有史以来第一个被批准治疗基底细胞癌的药物。在下面的实施例中， GDC-0449被用作对照化合物。

技术实现思路

[0011]本专利技术提供一种以以介芬胺和环巴胺的组合物或其组合物药学上可接受的盐 作为有效成分的抗肿瘤药物。所述的抗肿瘤药物中含有抗肿瘤有效量的介芬胺或 其药学上可接受的盐及可药用载体和/或赋形剂。药学上可接受的盐包括盐酸盐、 硫酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、磷酸盐及其它可以在医学上应用的盐。
[0012]本专利技术通过实验证明以介芬胺和环巴胺的组合物是一个非常有效的 Hedgehog信号通路的抑制剂，在3种人肿瘤细胞异种移植模型的实验中，该组合物 被证明是一种有效的抗肿瘤剂，能强烈抑制人肺癌、胰腺癌和基底细胞癌细胞在 体内的生长。另外在在以介芬胺和环巴胺的组合物作为有效成分治疗急性骨髓性白 血病实验中，介芬胺和环巴胺的组合物被证明是一种有效的抗肿瘤剂，能够抑制急 性骨髓性白血病的生长。介芬胺和环巴胺的组合物具有被开发成广谱抗肿瘤新药的 巨大潜力。
[0013]介芬胺和环巴胺组合物的制备
[0014]介芬胺和环巴胺组合物的提取通常采用水浸和醇浸法。把藜芦的地下根茎洗 净然后剪断成1-2厘米的长度，然后磨成粉，加水或者95％乙醇煎煮过夜。蒸干后 用硅胶柱分离得介芬胺和环巴胺的组合物。
[0015]介芬胺和环巴胺的组合物的药理试验
[0016]应用人肿瘤异种移植裸鼠模型评价介芬胺和环巴胺的组合物的抗肿瘤作 用，受试的肿瘤细胞包括人胰腺癌细胞BXPC-3、人肺癌细胞NCI-H2122和基底细 胞癌细胞A431。结果显示，介芬胺和环巴胺的组合物强烈抑制这3种肿瘤生长， 同时未发现介芬胺和环巴胺的组合物具有明显的副作用，包括体重的变化。这些 数据表明，介芬胺和环巴胺的组合物能明显抑制体内肿瘤生长，具备开发成新的 抗肿瘤药物的潜力。另外在在以介芬胺和环巴胺的组合物作为有效成分治疗急性骨 髓性白血病实验中，介芬胺和环巴胺的组合物被证明是一种有效的抗肿瘤剂，能够 抑制急性骨髓性白血病的生长。
[0017]介芬胺和环巴胺的组合物盐酸盐的制备
[0018]介芬胺和环巴胺的组合物溶解在无水乙醇中，然后向溶液中滴加盐酸析出组 合物的盐酸盐。
具体实施方式
[0019]下面结合具体实施例详细描述本专利技术，所述的实施例用于描述本专利技术，而不是 限制本专利技术。
[0020]实施例1介芬胺和环巴胺组合物的制备
[0021]取藜芦干燥根2kg磨成粉末，然后用95％乙醇(20L)萃取。萃取液真空浓缩 后获得350g浓缩物，然后用乙酸乙酯溶解。用纯净水洗涤有机相，弃去水相。有 机相在用无水硫酸钠干燥后真空蒸干，得80克浓缩物。将浓缩物装入硅胶层析柱， 用CHCl3-MeOH(20∶1)进行洗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗肿瘤药物，其特征在于该药物是以介芬胺和环巴胺的组合物或其药学上可接受的盐的组合物作为有效成分。介芬胺的分子结构如下：环巴胺的分子结构如下：2.如权利要求1所述的抗肿瘤药物，其特征在于该药物中含有抗肿瘤有效量的介芬胺和环巴胺的组合物或其药学上可接受的盐的组合物及可药用载体和/或赋形剂。3.如权利要求1所述的组合物，其中介芬胺的含量在80-99.5％之间，环巴胺的含量在20-0.5％之间。4.如权利要求1所述的药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、磷酸盐及其它可以在医学上应用的盐。5.权利要求1中的抗肿瘤...

【专利技术属性】
技术研发人员：巩宪昌，
申请(专利权)人：绍兴维帆生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：