一种磁微粒化学发光清洗液及其制备方法和应用技术

技术编号:30317946 阅读:32 留言:0更新日期:2021-10-09 23:21
本发明专利技术提供一种磁微粒化学发光清洗液及其制备方法和应用,属于化学发光分析技术领域。所述磁微粒化学发光清洗液包括缓冲液、盐离子、稳定剂、表面活性剂、防腐剂和消泡剂。本发明专利技术提供的磁微粒化学发光清洗液,通过对清洗液成分等的优化筛选,从而有效解决现有技术中的清洗液所存在的清洗液清洗背景值高,灵敏度、精密度不佳以及成本高等问题,从而可应用于磁微粒化学发光体系中,因此具有良好的实际应用之价值。应用之价值。

【技术实现步骤摘要】
一种磁微粒化学发光清洗液及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于化学发光分析
,具体涉及一种磁微粒化学发光清洗液及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]磁微粒化学发光免疫分析是将磁微粒技术、发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种检测微量抗原或抗体的免疫分析技术。这种方法兼有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高特异性,且检测范围宽,检测时间短等优点,可以用于各种抗原、抗体、激素、脂肪酸和维生素等的检测分析,是一种新型的体外检测技术。
[0004]磁微粒化学发光免疫分析技术的检测步骤是:加样、孵育、清洗、读数。其中清洗的主要目的是去除未结合的抗原、抗体以及游离的结合物,终止抗原抗体的继续结合,减少非特异性吸附物质对检测结果的影响。
[0005]专利技术人发现,现有的磁微粒化学发光清洗液清洗效果差,背景值较高,造成携带污染,从而影响检测的灵敏度、精密度,甚至造成假阳性。
[0006]CN111607465A公开了一种化学发光清洗液及其制备方法和应用,其组分包括:Tris、钠离子、CHAPS、Triton

100、PC300、BND、尼泊金内脂和硅油型消泡剂,该清洗液成分复杂,所用防腐剂包含三种,其中BND难溶于水,配制过程较为复杂。表面活性剂选择CHAPS,其是一种两性表面活性剂,可裂解蛋白质,洗涤能力强,检测过程中容易发生特异性结合的抗原和抗体被清洗掉,造成检测结果不准确。
[0007]CN112159733A公开了一种磁微粒化学发光免疫分析用清洗液及其配制方法,其组分包括:TRIS

HCl、氯化钠和吐温20。该种清洗液使用了单一的比较温和的非离子型表面活性剂吐温20,清洗能力较弱,在检测灵敏度较低的临床项目上应用时,由于无法完全清洗掉未参加特异性反应的蛋白或者其他非特异性吸附物质,而造成结果假阳性。另外,该种清洗液没有使用任何防腐剂,无法满足防腐效果的要求。

技术实现思路

[0008]基于上述现有技术的不足,本专利技术提供一种磁微粒化学发光清洗液及其制备方法和应用。本专利技术通过筛选优化磁微粒化学发光用清洗液成分、用量、pH等,从而制备出一种清洗液,具有清洗背景值低,灵敏度和精密度较高,同时成本低廉的磁微粒化学发光清洗液。
[0009]本专利技术的第一个方面,提供一种磁微粒化学发光清洗液,所述磁微粒化学发光清洗液包括缓冲液、盐离子、稳定剂、表面活性剂、防腐剂和消泡剂。
[0010]其中,所述缓冲液为PBS缓冲液,采用PBS缓冲液作为化学发光清洗液的缓冲液,成
本更低,且清洗效果更好。
[0011]所述盐离子为钠离子(如氯化钠),盐离子的加入能够为免疫反应提供适宜的电解质,保证免疫反应的正常进行,并且钠离子成本较低,降低整个清洗液的成本。
[0012]所述稳定剂为乙二胺四乙酸二钠。
[0013]所述表面活性剂可以为非离子型表面活性剂和阴离子表面活性剂,进一步优选为十二烷基硫酸钠(SDS)和/或吐温20。
[0014]所述防腐剂为PC300,叠氮钠或者Bronidox中的一种。优选防腐剂为叠氮钠。
[0015]所述消泡剂为硅油型消泡剂或者聚醚型消泡剂。
[0016]上述磁微粒化学发光清洗液的pH为弱碱性,进一步为7.0

7.5。
[0017]本专利技术的第二个方面,提供上述磁微粒化学发光清洗液的制备方法,所述制备方法包括:向上述缓冲液中依次加入盐离子、表面活性剂、稳定剂、防腐剂,混合均匀后再加入消泡剂,调节pH至弱碱性即得。
[0018]本专利技术的第三个方面,提供上述磁微粒化学发光清洗液在化学发光免疫分析中的应用。
[0019]具体的,所述应用包括:将上述磁微粒化学发光清洗液稀释后用于磁微粒化学发光免疫分析的清洗步骤,用于去除未结合的抗原、抗体以及游离的结合物,终止抗原抗体的继续结合。
[0020]上述一个或多个技术方案的有益技术效果:
[0021]上述技术方案提供一种磁微粒化学发光清洗液,通过对清洗液成分等的优化筛选,从而有效解决现有技术中的清洗液所存在的清洗背景值高,灵敏度、精密度不佳以及成本高等问题,从而可应用于磁微粒化学发光体系中,因此具有良好的实际应用之价值。
具体实施方式
[0022]应该指出,以下详细说明都是示例性的,旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明,本专利技术使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0023]需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本专利技术申请的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
[0024]如前所述,现有的磁微粒化学发光清洗液清洗效果差,背景值较高,造成携带污染,从而影响检测的灵敏度、精密度,甚至造成假阳性。
[0025]本专利技术的一个典型具体实施方式中,提供一种磁微粒化学发光清洗液,所述磁微粒化学发光清洗液包括缓冲液、盐离子、稳定剂、表面活性剂、防腐剂和消泡剂。
[0026]本专利技术又一具体实施方式中,所述缓冲液为PBS缓冲液,采用PBS缓冲液作为化学发光清洗液的缓冲液,成本更低,且清洗效果更好。所述缓冲液的浓度为100mM

1000mM,例如可以为,但不限于100mM,300mM,500mM,800mM或者1000mM,当缓冲液的浓度在上述范围内时,均能够起到缓冲液作用,保证反应的正常进行。
[0027]本专利技术又一具体实施方式中,本专利技术通过试验验证,当所述缓冲液浓度为500mM
时,其发光值CV最小,本底值最低,说明清洗液清洗效果最好,可有效的去除免疫反应中的多余组分。
[0028]本专利技术又一具体实施方式中,所述盐离子为钠离子(如氯化钠),盐离子的加入能够为免疫反应提供适宜的电解质,保证免疫反应的正常进行,并且钠离子成本较低,降低整个清洗液的成本。所述的钠离子的浓度为10%

20%,例如可以为,但不限于10%、12%、14%、16%、18%或者20%,当钠离子的浓度在上述范围内时,均能够为免疫反应提供充分的电解质。
[0029]本专利技术又一具体实施方式中,本专利技术通过试验验证,所述钠离子的浓度为12%时,发光值CV最小,同时避免浪费,有效节约成本。
[0030]本专利技术又一具体实施方式中,所述稳定剂为乙二胺四乙酸二钠,乙二胺四乙酸二钠作为一种络合剂,能够螯合钙、镁等离子,有效的去除样本中可能存在的金属离子;同时乙二胺四乙酸二钠可作为稳定剂,能够防止化学发光剂的提前激本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磁微粒化学发光清洗液,其特征在于,所述磁微粒化学发光清洗液包括缓冲液、盐离子、稳定剂、表面活性剂、防腐剂和消泡剂。2.如权利要求1所述的磁微粒化学发光清洗液,其特征在于,所述缓冲液为PBS缓冲液,优选的,所述缓冲液的浓度为100mM

1000mM。3.如权利要求1所述的磁微粒化学发光清洗液,其特征在于,所述盐离子为钠离子,所述的钠离子的浓度为10%

20%。4.如权利要求1所述的磁微粒化学发光清洗液,其特征在于,所述稳定剂为乙二胺四乙酸二钠,所述乙二胺四乙酸二钠的浓度为0.5%

1%。5.如权利要求1所述的磁微粒化学发光清洗液,其特征在于,所述表面活性剂为非离子型表面活性剂和阴离子表面活性剂,进一步优选为十二烷基硫酸钠和/或吐温20,所述吐温20浓度为1.0%

3.0%,所述SDS浓度为0.1%

1.0%。6.如权利要求1所述的磁微粒化学发光清洗液,其特征在于,所述防腐剂为PC300,叠氮钠或者Bronidox中的一种;优选防腐剂为叠氮钠,防腐剂的浓度为0.05%

0.15%。7.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:张春杰葛婵婵王静胡晓明杨小蕾赵凤赵芮
申请(专利权)人:山东中鸿特检生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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