本发明专利技术公开了一种具有提高和改善记忆作用的共发酵产物的乙醇提取物及其制备方法，此提取物是以灵芝、蛹虫草作为发酵菌株，以天麻为药性基质进行液体共培养发酵获得发酵产物，经乙醇提取后制备而成，蛹虫草菌株为B1528，菌株保藏号为：CCTCC NO：M 2019789，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏；灵芝菌种为B1.4，菌株保藏号为：CCTCC NO：M 2019790，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏。本发明专利技术利用中药的共培养发酵技术，提供了一种全新的利用灵芝和蛹虫草对天麻进行发酵的产物，该产物的乙醇提取物具有明显的改善记忆作用，可用于制备改善记忆力的保健品及治疗具有记忆障碍症状的疾病，如，阿尔茨海默症等的药物。具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
一种具有提高和改善记忆作用的共发酵产物乙醇提取物
[0001]本专利技术涉及一种中药微生物发酵转化产物及其制备方法和功效的应用，尤其是具有提高和改善记忆作用的灵芝蛹虫草共发酵产物的乙醇提物及其制备方法。
技术介绍
[0002]以记忆障碍为主要症状的疾病对人类的健康危害极大，如，阿尔茨海默症(Alzheimer'sdisease，AD)，其临床表现为记忆能力减退、运动障碍以及持续性认知能力下降等。阿尔茨海默病是当代人类致残和死亡的主要原因之一，其引起的学习记忆障碍已经严重影响了患者的生活质量。目前对阿尔茨海默症的治疗尚无特效药，通常以药物治疗为主，辅以非药物治疗和细心护理以减轻症状或延缓病情发展。随着全球AD患者人数日趋攀高，市场上抗AD药物已无法满足患者的需求，因此，开发新型抗AD药物来改善AD患者的学习记忆障碍是十分必要的。
技术实现思路
[0003]本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种具有提高和改善记忆作用的共发酵产物的乙醇提取物及其制备方法和应用，为阿尔茨海默症的药物治疗提供新的选择。
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：
[0005]一种具有提高和改善记忆作用的共发酵产物的乙醇提取物，该提取物是以灵芝、蛹虫草作为发酵菌株，以天麻为药性基质进行双向液体共培养发酵制备而成；蛹虫草菌株为B1528，菌株保藏号为：CCTCC NO：M 2019789，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏；灵芝菌种为B1.4，菌株保藏号为：CCTCC NO：M 2019790，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏。
[0006]上述的具有提高和改善记忆作用的共发酵产物乙醇提取物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
[0007](1)培养基制备：
[0008]菌种活化培养基：常规PDA培养基；
[0009]种子和发酵培养基制备：取土豆20g，洗净去皮切成小块放入锅中，加水100mL，煮沸10
‑
15分钟，过滤，滤液加入蔗糖1.82g、蛋白胨3.00g、磷酸二氢钾0.09g、天麻粉3.00g，加热搅拌均匀，冷却后pH自然，121℃灭菌30min，备用；
[0010]初始液体培养基制备：取土豆20g，洗净去皮切成小块放入锅中，加水100mL，煮沸10
‑
15分钟，过滤，滤液加入葡萄糖2g、天麻3g，加热搅拌均匀，冷却后，pH自然，121℃灭菌30min，备用；
[0011](2)活化菌种：将灵芝菌种B1.4、蛹虫草菌种B1528分别转接于PDA平板上，25℃黑暗条件下培养7d，备用；
[0012](3)制备种子液：无菌条件下，用打孔器从步骤(2)平板中打取直径5mm的活化灵芝菌种B1.4、蛹虫草菌种B1528，接入装有100mL的种子液培养基的500mL锥形瓶中，于200r/
min、25℃的摇床培养箱中，黑暗条件下震荡培养5d，备用；
[0013](4)液体发酵：取活化灵芝菌种B1.4和蛹虫草菌种B1528接种至初始液体培养基中，蛹虫草
‑
灵芝接种比例为1:2，接种量3mL/100mL，轻轻摇匀后，放入恒温培养摇床中，200rpm/min、25℃黑暗培养15d，即得灵芝和蛹虫草共培养发酵天麻产物。
[0014](5)发酵产物乙醇提取物的制备：将获得的发酵产物离心(10000rpm/10min)，得到固形物，在60℃下干燥固形物(6889.11g)，烘干后打粉(791.85g)，加入10倍体积95％乙醇，25℃浸渍24h，布氏漏斗过滤，残渣重复浸提一次，将提取液合并浓缩成浸膏(76.77g)，提取率为9.7％。
[0015]本专利技术的有益效果：与现有技术相比，本专利技术利用中药的共培养发酵技术，提供了一种全新的利用灵芝和蛹虫草对天麻进行发酵的产物，该产物具有明显的改善记忆作用，可用于制备改善记忆力的保健品及治疗具有记忆障碍症状的疾病，如，阿尔茨海默症等的药物。具有良好的应用前景。
[0016]本专利技术采用响应面设计方法，获得最佳的发酵工艺条件，并以最佳发酵工艺条件获得的发酵产物的乙醇提取物给药学习记忆障碍模型大鼠，研究发酵产物的乙醇提取物对学习记忆障碍大鼠的影响。发现这种乙醇提取物具有显著的改善记忆的作用。本专利技术使用共培养发酵技术不仅提高了对药用菌和中药的利用，也为抗记忆障碍药物的研发提供了新的物质基础，具有重要理论和实践意义。
[0017]下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步的说明。
[0018]一、灵芝蛹虫草共培养发酵天麻的工艺优化
[0019]1、实验条件
[0020]1.1菌种：灵芝Ganoderma Lucidum B1.4，菌株保藏号为：CCTCCm 2019790，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏；蛹虫草Cordycepsmilitaris B1528，菌株保藏号为：CCTCCm 2019789，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏。
[0021]1.2药材与试剂：
[0022]天麻—贵州达灵药业有限公司(批号181201)，虫草素对照品—上海源叶生物科技有限公司(批号Y02M6K1)，天麻素对照品—SIGMA(批号SLBN0006V)，齐墩果酸对照品—中国食品药品检定研究所(批号308D024)，乙腈色谱纯—美国天地(批号18075173)，无水乙醇—重庆川东化工(集团)有限公司(批号20181101)，甲醇色谱纯—天津市科密欧化学试剂公司(批号20180506)，硫酸—重庆川东化工(集团)有限公司(批号20160501)，乙酸乙酯—重庆江川化工有限公司(批号20170919)，冰醋酸—太仓沪试剂有限公司(批号2018425)，香草醛—天津市科密欧化学试剂公司(批号20170110)，高氯酸—天津市鑫源化工试剂公司(批号20180323)，娃哈哈纯净水—杭州娃哈哈集团有限公司(批号20180721)。
[0023]2、实验方法
[0024]2.1培养基制备：菌种活化：常规PDA培养基；种子液培养基：水100mL，土豆20g，葡萄糖2g，pH自然，121℃灭菌30min，备用；初始液体培养基：水100mL，土豆20g，葡萄糖2g，天麻3g，pH自然，121℃灭菌30min，备用。
[0025]2.2活化菌种：将灵芝菌种B1.4，蛹虫草菌种B1528分别转接于PDA平板上，25℃条件下黑暗培养7d，备用。
[0026]2.3制备种子液：无菌条件下，用打孔器从2.2的平皿中打取直径为5mm的活化菌种
B1.4和B1528，接入装有100mL的种子液培养基的500mL锥形瓶中，于200r/min、25℃的摇床培养箱中，黑暗条件下，震荡培养5d，备用。
[0027]2.4液体发酵：取B1.4和B1528种子液各1.5mL，接种至初始液体培养基中，轻轻摇匀后，放入恒温培养摇床中，200rpm/min、25℃黑暗培养。每个条本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种具有提高和改善记忆作用的共发酵产物乙醇提取物，该提取物是以灵芝、蛹虫草作为发酵菌株，以天麻为药性基质进行双向液体共培养发酵、制备而成；蛹虫草菌株为B1528，菌株保藏号为：CCTCC NO：M 2019789，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏；灵芝菌种为B1.4，菌株保藏号为：CCTCC NO：M 2019790，于2019年10月9日在中国典型培养物保藏中心保藏。2.如权利要求1所述的具有提高和改善记忆作用的共发酵产物乙醇提取物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)培养基制备：PDA培养基制备，取土豆200g，洗净去皮切成小块放入锅中，加水1000mL，煮沸20
‑
30分钟，过滤，滤液加入琼脂20g，加热搅拌，待琼脂溶解后加入葡萄糖20g，搅拌均匀，冷却后，pH自然，121℃灭菌30min，备用；种子液培养基制备：取土豆20g，洗净去皮切成小块放入锅中，加水100mL，煮沸10
‑
15分钟，过滤，滤液加入蔗糖1.82g、蛋白胨3.00g、磷酸二氢钾0.09g、天麻粉3.00g，加热搅拌均匀，冷却后pH自然，121℃灭菌30min，备用；初始液体培养基制备：取土豆20g，洗净去皮切成小块放入锅中，加水100mL，煮沸10
【专利技术属性】
技术研发人员：梁建东，田维毅，张鑫，陈万浩，代永东，杨长福，王平，蔡琨，俞琦，任秀秀，向丽，冯丽娴，罗成浩，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。