RANK拮抗剂及其用途制造技术

公开了拮抗NF

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】RANK拮抗剂及其用途
专利

[0001]本申请要求2018年12月5日提交的题为“Antagonists and uses therefor”的美国临时申请第62/775,803号的优先权，该美国临时申请的内容通过引用以其整体并入本文。
[0002]本专利技术总体上涉及拮抗性抗原结合分子(antagonist antigen
‑
binding molecules)。更特别地，本专利技术涉及拮抗NF
‑
κB受体活化因子(RANK)的一种或更多种功能的抗原结合分子以及其制备方法和用途。在特定实施方案中，拮抗性抗原结合分子被单独使用或与其他剂组合使用，用于治疗或抑制与RANK配体(RANKL)/RANK信号传递途径的活化相关的状况的发展，用于刺激或增强免疫，用于抑制免疫抑制或对肿瘤的耐受性的发展或进展，或用于抑制癌症的发展、进展或复发。
[0003]专利技术背景
[0004]RANK和RANKL分别是肿瘤坏死因子受体和配体超家族的成员，与CD40和CD40L具有最接近的同源性。RANK(TNFRSF11a)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种RANK拮抗性抗原结合分子，所述RANK拮抗性抗原结合分子包含：(1)包含SEQ ID NO:3中列出的VHCDR1氨基酸序列、SEQ ID NO:4中列出的VHCDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:5中列出的VHCDR3氨基酸序列的重链可变区(V
H
)；以及包含SEQ ID NO:6中列出的VLCDR1氨基酸序列、SEQ ID NO:7中列出的VLCDR2氨基酸序列和SEQ ID NO:8中列出的VLCDR3氨基酸序列的轻链可变区(V
L
)；(2)包含SEQ ID NO:1中列出的氨基酸序列的V
H
和包含SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列的V
L
；(3)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％(包括至少91％至99％和其间的所有整数百分比)序列同一性的V
H
和与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少90％(包括至少91％至99％和其间的所有整数百分比)序列同一性的V
L
；(4)与SEQ ID NO:1的氨基酸序列中除各CDR之外的框架区的氨基酸序列具有至少90％(包括至少91％至99％和其间的所有整数百分比)序列同一性的V
H
，以及与SEQ ID NO:2的氨基酸序列中除各CDR之外的框架区的氨基酸序列具有至少90％(包括至少91％至99％和其间的所有整数百分比)序列同一性的V
L
；或(5)包含在SEQ ID NO:1的氨基酸序列中除各CDR之外的框架区的序列中包含一个或更多个(例如，1个、2个、3个、4个或5个)氨基酸的缺失、取代或添加的氨基酸序列的V
H
，和包含在SEQ ID NO:2的氨基酸序列中除各CDR之外的框架区的序列中包含一个或更多个(例如，1个、2个、3个、4个或5个)氨基酸的缺失、取代或添加的氨基酸序列的V
L
。2.根据权利要求1所述的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子为分离的、纯化的、合成的或重组的形式。3.根据权利要求1或权利要求2所述的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子是单价的(例如，Fab、scFab、Fab'、scFv、单臂抗体等)。4.根据权利要求1至3中任一项或更多项所述的抗原结合分子，所述抗原结合分子具有以下活性中的任一种或更多种：(a)抑制RANKL与RANK的结合；(b)抑制RANK活化；(c)抑制下游RANK介导的分子信号传递(例如，RANK募集TRAF蛋白)；(d)抑制RANK多聚化；(e)减少破骨细胞分化；(f)减少破骨细胞活化；(g)减少破骨细胞存活；(h)抑制骨质流失并增加骨密度；(i)抑制肿瘤微环境(TME)中骨髓细胞或其他免疫细胞的免疫抑制活性；和(j)抑制肿瘤细胞(例如，乳腺癌细胞，包括三阴性乳腺癌(TNBC)细胞和BRCA
‑
1突变阳性乳腺癌细胞，非小细胞肺癌(NSCLC)细胞和肾细胞癌(RCC)细胞)的增殖、迁移、存活和/或形态发生。5.根据权利要求1至3中任一项或更多项所述的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含在递送媒介物(例如，脂质体、纳米颗粒、微米颗粒、树枝状聚合物或环糊精)中。6.一种分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸包含编码根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子的核酸序列。7.一种构建体，所述构建体包含与一个或更多个控制序列可操作地连接的编码根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子的核酸序列。8.根据权利要求7所述的构建体，所述构建体为表达构建体(例如，质粒、黏粒、噬菌体或病毒)的形式。9.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求8所述的构建体。10.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮
抗性抗原结合分子以及药学上可接受的载体。11.根据权利要求10所述的组合物，所述组合物还包含至少一种选自以下的辅助剂：骨抗再吸收剂(例如，合成代谢增强剂，特别是选自由甲状旁腺激素、BMP2、维生素D、抗炎剂组成的组；和分解代谢抑制剂，特别是选自由双膦酸盐、组织蛋白酶K抑制剂、p38抑制剂、JNK抑制剂、IKK抑制剂、NF
‑
κB抑制剂、钙调磷酸酶抑制剂、NFAT抑制剂、PI3K抑制剂组成的组)和化学治疗剂(例如，抗增殖/抗肿瘤药物、细胞生长抑制剂、抑制癌细胞侵袭的剂、生长因子功能抑制剂、抗血管生成剂、血管损伤剂等)或免疫治疗剂(例如，细胞因子、表达细胞因子的细胞、抗体等)。12.一种用于抑制RANKL与表达RANK的细胞结合的方法，所述方法包括使所述表达RANK的细胞与根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制RANKL与所述表达RANK的细胞的结合。13.一种用于抑制表达RANK的细胞上RANK的活化的方法，所述方法包括使所述表达RANK的细胞与根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制所述表达RANK的细胞上RANK的活化。14.一种用于抑制表达RANK的细胞中RANK介导的分子信号传递(例如，RANK募集TRAF蛋白)的方法，所述方法包括使所述表达RANK的细胞与根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制所述表达RANK的细胞中RANK介导的分子信号传递。15.一种用于抑制表达RANK的细胞中的RANK多聚化的方法，所述方法包括使所述表达RANK的细胞与本文描述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制所述表达RANK的细胞中的RANK多聚化。16.根据权利要求12至15中任一项所述的方法，其中所述表达RANK的细胞选自破骨细胞、免疫细胞诸如抗原呈递细胞(例如，单核细胞和树突细胞)和效应免疫细胞(例如，T细胞)、造血前体细胞和肿瘤细胞诸如乳腺癌细胞、前列腺癌细胞、NSCLC细胞和RCC细胞。17.一种用于抑制破骨细胞的分化、活化和/或存活的方法，所述方法包括使所述破骨细胞与根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制所述破骨细胞的分化、活化和/或存活。18.一种用于抑制免疫细胞(例如，骨髓细胞或Treg)的免疫抑制活性的方法，所述方法包括使所述免疫细胞与根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制所述免疫细胞的免疫抑制活性。19.一种用于抑制肿瘤细胞的增殖、存活或迁移的方法，所述方法包括使所述肿瘤细胞与根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子接触，从而抑制所述肿瘤细胞的增殖、存活或迁移。20.一种用于治疗或抑制受试者中与RANKL/RANK信号传递途径的活化相关的状况的发展的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子，从而治疗或抑制所述状况的发展。21.根据权利要求20所述的方法，其中与RANKL/RANK信号传递途径活化相关的所述状况选自骨质减少性紊乱、肌病和癌症。22.一种治疗剂组合，所述治疗剂组合包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：根
据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子和至少一种抗ICM抗原结合分子。23.根据权利要求22所述的治疗剂组合，其中所述RANK拮抗性抗原结合分子和所述至少一种抗ICM抗原结合分子为单一组合物(例如，混合物)的形式。24.根据权利要求22所述的治疗剂组合，其中所述RANK拮抗性抗原结合分子和所述至少一种抗ICM抗原结合分子为单独组合物中的独立组分的形式。25.根据权利要求22至24中任一项所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子拮抗选自由以下组成的组的ICM：程序性死亡1受体(PD
‑
1)、程序性死亡配体1(PD
‑
L1)、程序性死亡配体2(PD
‑
L2)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA
‑
4)、A2A腺苷受体(A2AR)、A2B腺苷受体(A2BR)、B7
‑
H3(CD276)、含V
‑
set结构域的T细胞活化抑制因子1(VTCN1)、B和T淋巴细胞弱化因子(BTLA)、吲哚胺2,3
‑
双加氧酶(IDO)、杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)、淋巴细胞活化基因3(LAG3)、T细胞免疫球蛋白结构域和黏蛋白结构域3(TIM
‑
3)、T细胞活化的V结构域Ig抑制因子(VISTA)、5'
‑
核苷酸酶(CD73)、tactile(CD96)、脊髓灰质炎病毒受体(CD155)、DNAX辅助分子
‑
1(DNAM
‑
1)、脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白2(CD112)、细胞毒性和调节性T细胞分子(CRTAM)、肿瘤坏死因子受体超家族成员4(TNFRS4；OX40；CD134)、肿瘤坏死因子(配体)超家族成员4(TNFSF4；OX40配体(OX40L))、自然杀伤细胞受体2B4(CD244)、CD160、糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白(GITR)、糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白配体(GITRL)、诱导型共刺激因子(ICOS)、半乳凝素9(GAL
‑
9)、4
‑
1BB配体(4
‑
1BBL；CD137L)、4
‑
1BB(4
‑
1BB；CD137)、CD70(CD27配体(CD27L))、CD28、B7
‑
1(CD80)、B7
‑
2(CD86)、信号调节蛋白(SIRP
‑
1)、整合素相关蛋白(IAP；CD47)；B淋巴细胞活化标志物(BLAST
‑
1；CD48)、自然杀伤细胞受体2B4(CD244)；CD40、CD40配体(CD40L)、疱疹病毒进入介质(HVEM)、跨膜和含免疫球蛋白结构域蛋白2(TMIGD2)、HERV
‑
HLTR
‑
相关蛋白2(HHLA2)、血管内皮生长抑制因子(VEGI)、肿瘤坏死因子受体超家族成员25(TNFRS25)、诱导型T细胞共刺激因子配体(ICOLG；B7RP1)和具有Ig和ITIM(免疫受体酪氨酸基抑制基序)结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)。26.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子选自PD
‑
1拮抗性抗原结合分子、PD
‑
L1拮抗性抗原结合分子和CTLA4拮抗性抗原结合分子。27.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子包括PD
‑
1拮抗性抗原结合分子。28.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子包括PD
‑
L1拮抗性抗原结合分子。29.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子包括CTLA4拮抗性抗原结合分子。30.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子包括PD
‑
1拮抗性抗原结合分子和PD
‑
L1拮抗性抗原结合分子。31.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子包括PD
‑
1拮抗性抗原结合分子和CTLA4拮抗性抗原结合分子。32.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述至少一种抗ICM抗原结合分子包括PD
‑
L1拮抗性抗原结合分子和CTLA4拮抗性抗原结合分子。
33.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述抗ICM抗原结合分子拮抗Treg细胞缺乏表达或以低水平表达的ICM。34.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述抗ICM抗原结合分子拮抗在Treg上以比CTLA4低的水平表达的ICM(例如，PD
‑
1或PD
‑
L1)。35.根据权利要求25所述的治疗剂组合，其中所述抗ICM抗原结合分子拮抗在免疫效应细胞(例如，效应T细胞、巨噬细胞、树突细胞、B细胞等)上以比Treg上高的水平表达的ICM(例如，PD
‑
1或PD
‑
L1)。36.根据权利要求27所述的治疗剂组合，其中所述抗PD
‑
1抗原结合分子是MAb，所述MAb的非限制性实例包括纳武单抗、派姆单抗、pidilizumab和MEDI
‑
0680(AMP
‑
514)、AMP
‑
224、JS001
‑
PD
‑
1、SHR
‑
1210、Gendor PD
‑
1、PDR001、CT
‑
011、REGN2810、BGB
‑
317或其抗原结合片段，或者所述抗PD
‑
1抗原结合分子是与纳武单抗、派姆单抗、pidilizumab或MEDI
‑
0680竞争结合PD
‑
1的分子。37.根据权利要求27或权利要求36所述的治疗剂组合，其中所述抗PD
‑
1抗原结合分子特异性地结合SEQ ID NO:9(即，SEQ ID NO:10中列出的天然PD
‑
1序列的残基62至86)、SEQ ID NO:11(即，SEQ ID NO:10中列出的天然PD
‑
1序列的残基118至138)和SEQ ID NO:12(即，对应于SEQ ID NO:10中列出的天然PD
‑
1序列的残基66至97)中列出的氨基酸序列的一个或更多个氨基酸。38.根据权利要求28所述的治疗剂组合，其中所述抗PD
‑
L1抗原结合分子是MAb或其抗原结合片段，所述MAb的非限制性实例包括德瓦鲁单抗(MEDI4736)、阿特朱单抗(Tecentriq)、阿维鲁单抗、BMS
‑
936559/MDX
‑
1105、MSB0010718C、LY3300054、CA
‑
170、GNS
‑
1480和MPDL3280A。39.根据权利要求28或权利要求38所述的治疗剂组合，其中所述抗PD
‑
L1抗原结合分子特异性地结合SEQ ID NO:13(即，SEQ ID NO:14中列出的全长天然PD
‑
L1氨基酸序列的残基279至290)中列出的氨基酸序列中的一个或更多个氨基酸，所述抗PD
‑
L1抗原结合分子是与德瓦鲁单抗(MEDI4736)、阿特朱单抗(Tecentriq)、阿维鲁单抗、BMS
‑
936559/MDX
‑
1105、MSB0010718C、LY3300054、CA
‑
170、GNS
‑
1480和MPDL3280A中的任一种竞争结合PD
‑
L1的分子。40.根据权利要求29所述的治疗剂组合，其中所述抗CTLA4抗原结合分子是MAb或其抗原结合片段，所述MAb的代表性实例包括伊匹单抗和tremelimumab，或者所述抗CTLA4抗原结合分子是与伊匹单抗或tremelimumab竞争结合CTLA4的分子。41.根据权利要求29或权利要求40所述的治疗剂组合，其中所述抗CTLA4抗原结合分子特异性地结合选自SEQ ID NO:15(即，SEQ ID NO:16中列出的全长天然CTLA4氨基酸序列的残基25至42)、SEQ ID NO:17(即，SEQ ID NO:16中列出的天然CTLA4序列的残基43至65)和SEQ ID NO:18(即，SEQ ID NO:16中列出的天然CTLA4序列的残基96至109)中任一种中列出的序列的氨基酸序列中的一个或更多个氨基酸。42.根据权利要求22至41中任一项所述的治疗剂组合，其中所述RANK抗原结合分子或所述ICM抗原结合分子连接到免疫球蛋白恒定链(例如，IgG1恒定链、IgG2a恒定链、IgG2b恒定链、IgG3恒定链或IgG4恒定链)。43.根据权利要求42所述的治疗剂组合，其中所述免疫球蛋白恒定链可以包括选自κ轻
链或λ轻链的轻链；以及选自γ1重链、γ2重链、γ3重链和γ4重链的重链。44.根据权利要求22至43中任一项所述的治疗剂组合，其中所述治疗剂组合包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：根据权利要求1至4中任一项所述的RANK拮抗性抗原结合分子和两种或更多种不同的抗ICM抗原...

【专利技术属性】
技术研发人员：B，
申请(专利权)人：昆士兰医学研究所理事会，
类型：发明
国别省市：