过表达CTLA-4Ig/PD-L1的宫内膜干细胞在制备治疗肺纤维化的药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了过表达CTLA

【技术实现步骤摘要】
过表达CTLA
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4Ig/PD
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L1的宫内膜干细胞在制备治疗肺纤维化的药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物药物
，具体涉及过表达CTLA
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4Ig/PD
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L1的宫内膜干细胞在制备治疗肺纤维化的药物中的应用。

技术介绍

[0002]肺纤维化是一种以肺部永久性损伤为特征的、伴随着高死亡率的严重疾病，通常是由于严重的外部创伤、自发免疫反应或药物不良副反应等因素引起肺的永久性损伤。研究表明，肺纤维化的进程大致分为以下3个阶段：第一阶段，肺脏受到损伤或其他有害刺激，成纤维细胞的细胞外基质(ECM)产生细胞被活化；第二阶段，活化的ECM产生细胞发生结构和表型的改变，产生大量ECM，胞内的促分裂素原活化蛋白激酶和核转录因子通路被激活，同时T细胞被激活，产生各种细胞因子；第三阶段，损伤因素持续存在，成纤维细胞继续被激活，产生更多的ECM，细胞因子持续不断的引起组织炎症和胶原过度表达，ECM不断沉积，肺纤维化逐渐形成，最终导致特发部位肺功能丧失
[1]。
[本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.过表达CTLA
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4Ig/PD
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L1的宫内膜干细胞在制备预防和/或治疗肺纤维化的药物中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述过表达CTLA
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4Ig/PD
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L1的宫内膜干细胞的构建方法，包括以下步骤：1)提取动物脾脏的RNA，经反转录得到cDNA；2)以所述cDNA为模板，分别扩增CTLA
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4Ig基因和PD
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L1基因，得到CTLA
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4Ig基因片段和PD
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L1基因片段；3)将所述CTLA
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4Ig基因片段和PD
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L1基因片段克隆至pLenti CMV GFP Puro(658
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5)载体上，得到重组载体pLenti CMV CTLA
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4Ig IRES PD
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L1 Puro；4)将所述重组载体pLenti CMV CTLA
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4Ig IRES PD
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L1 Puro、PMD2和PSPAX2混合，在转染试剂的作用下处理真核细胞，经培养，收集上清；5)将所述上清感染宫内膜干细胞，经细胞培养得到过表达CTLA
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4Ig/PD
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L1的宫内膜干细胞。3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，步骤2)中所述扩增CTLA
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4Ig基因的引物为核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示的反...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐洋，
申请(专利权)人：苏州珈安华钰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：