【技术实现步骤摘要】
一种中药中美白活性成分的筛选方法
[0001]本专利技术涉及天然药物筛选领域,尤其涉及一种中药中美白活性成分的筛选方法。
技术介绍
[0002]酪氨酸酶是合成黑色素最主要的限速酶,同时具有单酚酶活性和二酚酶活性。主要底物L
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tyrosine(L
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酪氨酸)在酪氨酸酶单酚酶作用下被羟基化生成L
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DOPA(左旋多巴),L
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DOPA在酪氨酸酶存在下可继续发生氧化反应,生成多巴醌,多巴醌在一系列复杂的氧化反应后生成黑色素。可以通过抑制酪氨酸酶活性、清除自由基来减少黑色素的形成而达到美白的功效。因此,酪氨酸酶抑制效果和自由基清除活性可以作为评价活性物质美白效果的指标。
[0003]白芍,毛茛科植物芍药(Paeonia lactiflora Pall.)的干燥根,是中国传统美白药方中的一味重要中药材,有研究表明,白芍中没食子酰芍药苷和五没食子酰葡萄糖等成分具有酪氨酸酶抑制活性。
[0004]现有市场上的美白活性成分主要分为化学、生物和天然植物类 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种中药中美白活性成分的筛选方法,所述的美白活性成分包括酪氨酸酶抑制活性成分和抗氧化活性成分,其特征在于,所述的中药中美白活性成分的筛选方法包括以下步骤:(1)样品分析对待测中药进行预处理,得到粗提物,将粗提物复溶,得到粗提物溶液,再进行HPLC分析得到样品色谱图;(2)美白活性谱的构建将粗提物溶液利用HPLC进行色谱分离,流出液微馏分化处理,收集馏分到孔板中,浓缩干燥得到干燥馏分;在装有干燥馏分的孔板中进行酪氨酸酶抑制活性评价实验,计算各孔中馏分的酪氨酸酶抑制率,绘制酪氨酸酶抑制率随保留时间的变化曲线;在装有馏分的孔板中进行自由基清除活性评价实验,计算各孔中馏分的自由基清除率,绘制自由基清除率随保留时间的变化曲线;结合步骤(1)的样品色谱图、酪氨酸酶抑制率随保留时间的变化曲线和自由基清除率随保留时间的变化曲线,构建美白活性谱,筛选出美白活性成分的目标峰;(3)美白活性成分的结构鉴定利用HPLC
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Q
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TOF/MS鉴定步骤(2)筛选出的美白活性成分的结构。2.根据权利要求1所述的中药中美白活性成分的筛选方法,其特征在于,还包括有美白活性验证步骤,分离纯化步骤(2)筛选出的美白活性成分,体外验证美白活性。3.根据权利要求1所述的中药中美白活性成分的筛选方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的粗提物溶液的浓度为10
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80mg/mL,所述的HPLC进样量为2
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20μL,收集保留时间≥3min的馏分,分辨率为8.8
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10.08point/min。4.根据权利要求1所述的中药中美白活性成分的筛选方法,其特征在于,所述的酪氨酸酶抑制活性评价实验包括酪氨酸酶单酚酶抑制活性评价实验和酪氨酸酶二酚酶抑制活性评价试验;所述的酪氨酸酶抑制活性评价实验...
【专利技术属性】
技术研发人员:楚楚,李璟,杨斐,李家旭,童胜强,陈素红,王平,
申请(专利权)人:浙江工业大学,
类型:发明
国别省市:
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