一种更适合黄种人群的微生态制剂制造技术

本发明专利技术提供一种更适合黄种人群的微生态制剂，属于微生物制剂领域，由益生菌活菌、复合培养基、载体以及中药提取物组成，所述益生菌活菌包括乳杆菌发酵液、双歧杆菌发酵液、链球菌发酵液、芽孢杆菌发酵液和酵母菌发酵液；所述双歧杆菌包括两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、长双歧杆菌和短双歧杆菌；所述微生态制剂制备方法为：以第一培养基分别对各类菌种进行活化并扩大培养，再分别接种到第二培养基中分别发酵培养12

【技术实现步骤摘要】
一种更适合黄种人群的微生态制剂


[0001]本专利技术涉及功能性微生物制剂领域，具体涉及一种更适合黄种人群的微生态制剂。

技术介绍

[0002]正常人体肠道内寄居着数量庞大、种类繁多的微生物，以细菌为主，统称为肠道菌群， 肠道菌群与人体之间的关系错综复杂，贯穿于人体各种生理活动和病理过程，已成为人体不 可或缺的一部分。正常情况下，肠道各菌种与宿主相互依存、相互制约，维持一种动态的生 态平衡一旦受到宿主及外环境变化的影响，平衡状态就会被打破，从而造成肠道菌群失调。 近年来，随着分子生物学技术在肠道菌群检测方面的应用，菌群失调与疾病的相关性研究及 其在发病机制中的作用逐渐引起了人们的广泛重视，因此，研究肠道菌群失调对人体健康的 重要作用无论是对于基础研究还是临床应用，均具有重要的意义。调节肠道菌群的益生保健 食品也具有非常好的社会和经济效益。
[0003]但肠道菌群跟人种有关，不同种的人的生活环境不同，饮食风俗习惯等都有差别，这种 差别会直接影响肠道内的菌群分布。

技术实现思路

[0004]针对上述问题，本专利技术提供一种更适合黄种人群的微生态制剂。
[0005]本专利技术的目的采用以下技术方案来实现：
[0006]一种更适合黄种人群的微生态制剂，由益生菌活菌、复合培养基、载体以及中药提取物 组成，所述益生菌活菌包括乳杆菌发酵液、双歧杆菌发酵液、链球菌发酵液、芽孢杆菌发酵 液和酵母菌发酵液，其中，所述乳杆菌、双歧杆菌、链球菌、芽孢杆菌和酵母菌的活菌数量 比为100：(60
‑
100)：(10
‑
30)：(5
‑
10)：(1
‑
5)；
[0007]所述双歧杆菌包括两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、长双歧杆菌和短双歧 杆菌；
[0008]所述微生态制剂制备方法为：
[0009]以第一培养基分别对乳杆菌、双歧杆菌、链球菌、芽孢杆菌和酵母菌进行活化并扩大培 养，再将培养后的菌种分别接种到第二培养基中，分别发酵培养12
‑
24h，以各菌种发酵液按 活菌数量比例混合得到混合发酵液，加入冻干保护剂，混合均匀后再加入所述载体，所述载 体经浸泡后滤出，冷冻干燥制得负载的载体，再与所述中药提取物混合后制得所述微生态制 剂；其中，所述第一培养基的组成为大豆蛋白胨、牛肉蛋白粉、酵母膏、醋酸钠、葡萄糖、 吐温80、柠檬酸铵、硫酸镁和水；所述第二培养基包括所述第一培养基和大豆多肽粉。
[0010]优选的，所述中药提取物包括山药30份、苍术15份、砂仁10份、人参8份、当归8份、 甘草4份、党参5份、茯苓8份、黄精4份、山楂10份，其制备方法是：
[0011]依次称取各组分，加入重量/体积比10倍的蒸馏水，浸泡4h后，并于100℃提取1h，
过 滤，再向滤渣中加入重量/体积比8倍的蒸馏水，100℃提取1h后，过滤后合并滤液，离心， 浓缩干燥制得所述中药提取物；
[0012]所述中药提取物与所述负载的载体的混合比例为(1
‑
100)：10。
[0013]优选的，所述乳杆菌为卷曲乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、詹氏乳杆菌、加氏乳 杆菌、唾液乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌中的至少一种。
[0014]优选的，所述链球菌包括嗜热链球菌、消化链球菌、粪链球菌中的至少一种。
[0015]优选的，所述芽孢杆菌包括凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的至少一种。
[0016]优选的，所述冻干保护剂为甘油和低聚木糖，添加量分别为所述混合发酵液质量的0.1
‑
1％。
[0017]优选的，所述大豆多肽粉的制备方法为：
[0018]s1、将经过清洗的大豆破碎粉磨，制得大豆匀浆，将所述大豆匀浆升温至80
‑
90℃保温 5
‑
30min，经高速冷冻离心后除去上层油层，干燥后制得大豆蛋白粉；
[0019]s2、在所述大豆蛋白粉中滴加浓度为0.2mol/L、pH为7.5的磷酸盐缓冲液，使所述大豆 蛋白粉的含水率提高到50
‑
60％，再在120℃下加热10
‑
20min灭菌，得到培养基；将活化好的 黑曲霉菌液接种至所述培养基中，所述黑曲霉菌液的浓度不小于106CFU/ml，接种量为4
‑
8％， 接种完成后在35
‑
37℃下发酵3
‑
4d，待发酵结束后，加入蒸馏水，搅拌并浸泡后分离滤液， 将滤液浓缩干燥，制得多肽粉；
[0020]s3、称取3
‑
(二乙基氨基)丙基硫代异氰酸酯并溶解在DMSO或DMF中，配制为质量分 数10％的溶液，制得溶液A；将所述多肽粉以料液比1g/100ml超声分散在DMSO或DMF中， 得到悬液A，在室温和搅拌条件下，将所述悬液A缓慢滴加到等体积的所述溶液A中，添加 完毕后继续搅拌反应24
‑
28h，反应完成后分离沉淀，沉淀依次以DMF、二氯甲烷和冷的乙醚 洗涤后冻干制得。
[0021]优选的，所述载体为改性蒙脱石。
[0022]优选的，所述改性蒙脱石的制备方法为：
[0023]将蒙脱石粉碎并筛分，得到粒径在500
‑
1000筛目之间的微粉，将蒙脱石微粉按料液比 1g/100ml悬浮分散在蒸馏水中，得到悬液B，加入所述悬液B体积1
‑
2％的3
‑
(三乙氧基硅基) 丙基琥珀酸酐或3
‑
氨基丙基三乙氧基硅烷，在60
‑
70℃下搅拌回流12
‑
24h，回流完成后滤出 沉淀，沉淀依次以乙醇和蒸馏水洗涤制得。
[0024]优选的，所述改性蒙脱石的制备方法还包括以下步骤：
[0025](1)烯丙基改性6
‑
氨基嘌呤制备
[0026]称取溴乙醇，在冰水浴条件下溶解在二氯甲烷中，加入三乙胺和甲基丙烯酰氯，在室温 条件下搅拌反应12
‑
14h，反应完成后分离滤液，所述滤液依次经冰水洗涤、无水硫酸镁干燥 后蒸去二氯甲烷，得到酯化产物；称取6
‑
氨基嘌呤和氢化钠并溶解在无水DMF中，充分搅 拌均匀后，加入所述酯化产物，在室温条件下搅拌反应12
‑
14h，反应完成后分离滤液，并用 丙酮沉淀数次，真空干燥；其中，
[0027]所述溴乙醇与所述二氯甲烷、所述三乙胺、所述甲基丙烯酰氯的质量比例为1：(6
‑
7)： (0.1
‑
0.15)：(0.9
‑
0.95)；所述6
‑
氨基嘌呤与所述氢化钠、所述无水DMF、所述酯化产物
的 质量比例为1：(0.2
‑
0.22)：(10
‑
12)：(2.4
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，由益生菌活菌、复合培养基、载体以及中药提取物组成，所述益生菌活菌包括乳杆菌发酵液、双歧杆菌发酵液、链球菌发酵液、芽孢杆菌发酵液和酵母菌发酵液，其中，所述乳杆菌、双歧杆菌、链球菌、芽孢杆菌和酵母菌的活菌数量比为100：(60
‑
100)：(10
‑
30)：(5
‑
10)：(1
‑
5)；所述双歧杆菌包括两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、长双歧杆菌和短双歧杆菌；所述微生态制剂制备方法为：以第一培养基分别对乳杆菌、双歧杆菌、链球菌、芽孢杆菌和酵母菌进行活化并扩大培养，再将培养后的菌种分别接种到第二培养基中，分别发酵培养12
‑
24h，以各菌种发酵液按活菌数量比例混合得到混合发酵液，加入冻干保护剂，混合均匀后再加入所述载体，所述载体经浸泡后滤出，冷冻干燥制得负载的载体，再与所述中药提取物混合后制得所述微生态制剂；其中，所述第一培养基的组成为大豆蛋白胨、牛肉蛋白粉、酵母膏、醋酸钠、葡萄糖、吐温80、柠檬酸铵、硫酸镁和水；所述第二培养基包括所述第一培养基和大豆多肽粉。2.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述中药提取物包括山药、苍术、砂仁、人参、当归、甘草、党参、茯苓、黄精和山楂，其制备方法是：依次称取各组分，加入重量/体积比10倍的蒸馏水，浸泡4h后，并于100℃提取1h，过滤，再向滤渣中加入重量/体积比8倍的蒸馏水，100℃提取1h后，过滤后合并滤液，离心，浓缩干燥制得所述中药提取物；所述中药提取物与所述负载的载体的混合比例为(1
‑
100)：10。3.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述乳杆菌为卷曲乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、詹氏乳杆菌、加氏乳杆菌、唾液乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌中的至少一种。4.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述链球菌包括嗜热链球菌、消化链球菌、粪链球菌中的至少一种。5.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述芽孢杆菌包括凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的至少一种。6.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述冻干保护剂为甘油和低聚木糖，添加量分别为所述混合发酵液质量的0.1
‑
1％。7.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述载体为改性蒙脱石。8.根据权利要求1所述的一种更适合黄种人群的微生态制剂，其特征在于，所述改性蒙脱石的制备方法为：将蒙脱石粉碎并筛分，得到粒径在500

【专利技术属性】
技术研发人员：沈刚，王国民，
申请(专利权)人：浙江远森健康产业有限公司，
类型：发明
国别省市：