一种小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法技术

本发明专利技术公开了一种小柴胡颗粒退热作用靶点确证的方法。本发明专利技术筛选得到小柴胡颗粒化学成分及潜在作用靶点，并利用chEMBL数据库对潜在作用靶点进行功能分类；通过疾病数据库获取发热靶点，将小柴胡颗粒潜在作用靶点与发热症状靶点取交集，构建小柴胡颗粒退热靶点数据库；通过对靶点进行功能分析，筛选小柴胡颗粒退热的关键靶点；结合干酵母致热大鼠试验，明确小柴胡颗粒的降温药效作用，验证小柴胡颗粒对关键靶点NF

【技术实现步骤摘要】
一种小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法


[0001]本专利技术涉及生物医学领域，具体涉及一种小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法。

技术介绍

[0002]名优中药大品种小柴胡颗粒源于东汉医圣张仲景《伤寒杂病论》中的千古名方——“小柴胡汤”,现由柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草、大枣七味中药组成，具有解表散热，疏肝和胃的功效。现代药理及临床研究表明，小柴胡组方具有解热抗炎、调节免疫、抗肝纤维化、抗过敏等多方面功效，在治疗感冒、流感及各种变异流感等伤寒疫症方面疗效显著，但是其发挥药效作用的机制尚不明确，特别是退热机制或者是其作用靶点依然不明确。本专利技术的申请人前期发表的文章《小柴胡颗粒生物靶标网络及潜在作用机制解析》及《小柴胡颗粒基于网络药理学的组方配伍规律解析》通过网络药理学技术探究了小柴胡颗粒的潜在作用靶点，但该研究依然没有能够确认到小柴胡颗粒的退热作用靶点。
[0003]复方中药具有多靶点、多途径协同作用的特点，讲究组方的辨证及药材的配伍，其作用的本质与组方的内涵密切相关。小柴胡颗粒的活性成分复杂，且发热靶点也是众多，如何找到小柴胡颗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，包括以下步骤：对小柴胡颗粒提取液进行液质联用检测，对小柴胡颗粒化学成分进行分析，获得小柴胡颗粒的活性化学成分；根据获得的小柴胡颗粒的活性化学成分，预测各活性化学成分的作用靶点，并对作用靶点进行分类；构建活性成分
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靶点
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靶点分类网络：通过GeneCard数据库、DisGeNET数据库检索人类发热相关靶点，分别选择GeneCard数据库中Relevance score≥5.9以及DisGeNET数据库中score≥0.3的靶点，作为发热靶点；采用Bioinformatics&Evolutionary对活性成分的作用靶点与发热靶点取交集，获得小柴胡颗粒退热潜在作用靶点；通过STRING平台分析小柴胡颗粒退热潜在作用靶蛋白相互作用；将小柴胡颗粒退热潜在作用靶基因导入DAVID数据库，进行GO功能分析及信号通路富集分析；筛选到小柴胡颗粒退热关键作用靶点；验证：对小柴胡颗粒退热关键靶点通过酵母致热大鼠模型对其进行验证，获得确证后的小柴胡颗粒退热作用靶点。2.根据权利要求1所述的小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，所述小柴胡颗粒提取液的制备方法包括：取小柴胡颗粒研细，精密称取每1.0g加入70％乙醇10mL，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，得到小柴胡颗粒提取液。3.根据权利要求1所述的小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，所述液质联用进行检测包括分别在正模式和负模式下，同时进行一级和二级扫描，获得活性化学成分66种。4.根据权利要求1所述的小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，所述液质联用中色谱条件包括：C18色谱柱；柱温40℃；流速0.25mL/min；进样量1μL；流动相采用乙腈
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0.1％甲酸水溶液的梯度洗脱。5.根据权利要求1所述的小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，所述液质联用中质谱条件包括：电喷雾正、负离子模式扫描；离子源电压：5500V、
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4500V；离子源温度：600℃、500℃；去簇电压：100V、100V；碰撞能量：35eV、
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35eV；碰撞能量扩展：15eV、15eV；雾化辅助气1为60PSI，辅助气2为50PSI，气帘气为40PSI。6.根据权利要求1所述的小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，通过Swiss数据库预测各活性成分的作用靶点，并采用chEMBL数据库对作用靶点进行分类。7.根据权利要求1
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6任一项所述的小柴胡颗粒退热作用靶点的确证方法，其特征在于，所述构建活性成分
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏，郑如文，毕聪，蒋研风羊，江志强，张俊华，杜海泳，
申请(专利权)人：广州白云山光华制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：