一组用于酿酒酵母多拷贝整合的质粒工具包制造技术

本发明专利技术公开了一组用于酿酒酵母多拷贝整合的质粒工具包，属于基因和代谢工程领域。本发明专利技术构建和验证的多拷贝整合质粒工具包，可以通过一次转化在酿酒酵母基因组上实现多个外源基因的多拷贝、稳定的、整合型表达。并且可以通过选择不同的筛选标签在不同的Ty位点，实现多批次、多基因、稳定的、整合型表达外源基因。整合型表达外源基因。整合型表达外源基因。

【技术实现步骤摘要】
Multiple Genomic Integrations in Saccharomyces cerevisiae[J].PloS One 2016,11(3),e0150394.(公开于2016年)
[0015]在一种实施方式中，所述终止子T
RFC5
‑
T
POL30
、T
SEC13
‑
T
PNP1
、T
MTD1
‑
T
RPF2
、T
LEU2
‑
T
NFS1
、T
DSF1
‑
T
HXT13
、T
TIM21
‑
T
GSC2
、T
RRP12
‑
T
TAF3
、T
RNA14
‑
T
BUB2
、T
ADH1
、和T
CYC1
的序列分别如SEQ ID NO.31～40所示；所述终止子序列公开于文献Promo本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.酿酒酵母多拷贝整合基因表达框，其特征在于，所述表达框由弱启动子序列和带有降解标签deg的筛选基因序列组成；所述弱启动子包括P
ADE6
、P
LEU2
、P
URA3
、P
PMA1
、P
ZWF1
、P
ARO7
、P
PYC1
、P
ADE3
、P
YEF3
、P
ERG1
，所述筛选基因包括ScTRP1、KlLEU2、KlURA3、ScMET15、SpHIS5、natMX、hphMX、kanMX、patMX、bleMX。2.根据权利要求1所述的基因表达框，其特征在于，所述弱启动子P
ADE6
、P
LEU2
、P
URA3
、P
PMA1
、P
ZWF1
、P
ARO7
、P
PYC1
、P
ADE3
、P
YEF3
、P
ERG1
，的核苷酸分别如SEQ ID NO.1～10所示；所述筛选基因带有降解标签，与降解标签共同组成的核苷酸序列如SEQ ID NO.11～20所示。3.酿酒酵母多拷贝整合质粒，其特征在于，由权利要求1或2所述的基因表达框和预整合表达框组成；所述预整合表达框由Ty转座子的上下游同源臂序列、终止子序列及绿色荧光蛋白表达框组成。4.根据权利要求3所述的酿酒酵母多拷贝整合质粒，其特征在于，所述Ty转座子序列包括Ty1Cons、Ty2Cons、Ty3Cons、Ty4Cons和Ty5Cons；所述终止子包括T
RFC5
‑
T
POL30
、T
SEC13
‑
T
PNP1
、T
MTD1
‑
T
RPF2
、T
LEU2
‑
T<...

【专利技术属性】
技术研发人员：周景文，高松，曾伟主，陈坚，沐万孟，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：