一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸及其制备方法，属于医学检验技术领域。该试纸条是由基片和固定在基片上的滤纸组成的，所述滤纸中浸有染液，所述染液由A液和B液组成，所述A液组成为缓冲液、表面活性剂；所述B液组成为有机溶剂、酚磺酞染料和抗氧化剂。本发明专利技术制作的尿微量白蛋白检测试纸能够与尿液中的微量白蛋白迅速发生反应，当微量白蛋白浓度在0

【技术实现步骤摘要】
一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸及其制备方法


[0001]本专利技术属于尿液分析检测领域，具体涉及一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸及其制备方法。

技术介绍

[0002]1982年，Viberti等发现糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围内，而尿白蛋白排泄增加的现象，首先提出了尿微量白蛋白（ALB）的概念。
[0003]微量白蛋白尿，即指在尿中出现了微量白蛋白。白蛋白是血液中含量最多的蛋白质，关于白蛋白在肾小球中的滤过情况，一般认为在正常情况下其量甚微，约为血浆中白蛋白的0.04%，按此计算每天从肾小球滤过液中排出的白蛋白即可达3.6g，为终尿中蛋白质排出量的30
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40倍，可见滤过液中多数白蛋白是可被肾小管重新吸收的。有实验证实白蛋白在近曲小管中吸收，在小管细胞中被溶酶体中的水解酶降解为小分子片段而进入血循环。
[0004]由于白蛋白的分子量较大（约为66458g/mol），不能通过肾小球基膜，因此，在健康人尿液中仅含有浓度很低的白蛋白，健康成人每24小时排泄总蛋白不超过100mg，具体到每升尿白蛋白不超过20mg。但是在疾病时，肾小球基膜受到损害致使通透性发生改变，任何能够引起肾小球基膜通透性增高的病变，均可导致白蛋白的排出。这个时候白蛋白即可进入尿液中，尿白蛋白浓度即可出现持续升高。因此及时对尿液中微量白蛋白检测就会尽早发现早期肾病及肾损伤情况。
[0005]微量白蛋白尿是全身内皮细胞包括肾脏内皮细胞损害的生物学标志，出现微量白蛋白尿标志着高血压糖尿病全身早期损害的开始，同时也是高血压肾病、糖尿病肾病的早期指标，此时进行干预，微量白蛋白尿可以下降甚至转阴，高血压肾病或糖尿病肾病肾功能损害也可以延缓甚至逆转。如错过这个时期，微量白蛋白尿持续进展至显性蛋白尿甚至大量蛋白尿，此时蛋白尿较难控制，肾功能持续恶化将不可避免。
[0006]同时尿微量白蛋白检测作为全身性或局部炎症反应的肾功能指标，如尿路感染等原因引起的肾脏早期病变；急性胰腺炎并发症的预测指标；服用对肾功能有影响的药物者也可检测尿微量白蛋白，便于早期观察肾功能情况及早采取措施。
[0007]测定白蛋白的方法有很多，早期多采用免疫电泳法和放射免疫扩散等方法，但由于操作繁杂，误差因素多，精密度差，目前已趋于淘汰。后又相继建立了免疫荧光法、酶免疫法、放射免疫法、免疫比浊法、干化学检验法等检测方法。免疫荧光法及酶免疫法操作复杂、耗时长，且试剂及设备昂贵，不适合广泛临床应用；放射免疫法灵敏度高，特异性强，但具有放射性污染，会对操作人员造成伤害，而且试剂保存期短等缺点。免疫比浊法具有操作简单，测定周期短，精密度高在生化分析仪上使用较为广泛。但是，由于免疫比浊法的检测原理是反应生成不溶性抗原—抗体复合物，并产生一定的浊度，浊度的高低反映样品中微量白蛋白的含量，导致现有的尿微量白蛋白试剂盒不可避免的出现灵敏度较低的不足。干化学检验法可以提供定性或半定量的结果，操作简单，价格便宜，且检测结果快速准确。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是提供一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸及其制备方法，该试纸条制作成本低、稳定性好，检测结果快速、准确。
[0009]为实现以上技术目的，本专利技术具体方法如下：A液包括：缓冲液
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1000mL表面活性剂
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0.16g。
[0010]所述缓冲液包括磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和Tris
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盐酸缓冲液中的一种。
[0011]所述缓冲液pH为2.0~4.0。
[0012]优选地，所述缓冲液为0.5mol/L柠檬酸缓冲液，pH值为2.3。
[0013]所述表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮、十二烷基硫酸钠、多库酯钠和聚乙二醇中的一种。
[0014]优选地，所述表面活性剂为多库酯钠。
[0015]B液包括：有机溶剂
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1000mL酚磺酞染料
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0.4g抗氧化剂
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0.8g。
[0016]所述有机溶剂为甲醇、乙醇和丙酮中的一种。
[0017]优选地，所述有机溶剂为丙酮。
[0018]所述酚磺酞染料为四溴酚磺酞、溴甲酚绿、溴甲酚紫中的一种。
[0019]优选地，所述酚磺酞染料为四溴酚磺酞。
[0020]所述抗氧化剂为琥珀酸、柠檬酸、顺丁烯二酸中的一种。
[0021]优选地，所述抗氧化剂为顺丁烯二酸。
[0022]本专利技术还提供一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸的制备方法，该方法包括：步骤一：将滤纸浸入A液后，在80～100℃条件下进行第一次干燥，时间为20～30分钟；步骤二：将第一次干燥后的滤纸浸入B液后，在40～60℃条件下进行第二次干燥，时间为10～20分钟；步骤三：将第二次干燥后的滤纸裁剪后与基板固定，得到一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸。
[0023]所述的A液包括：缓冲液和表面活性剂。
[0024]所述的B液包括：有机溶剂、酚磺酞染料和抗氧化剂。
[0025]所述基片为PVC胶片。
[0026]所述滤纸是普通的定性滤纸。
[0027]制备好的试纸能够迅速与尿液中的微量白蛋白发生反应，随着微量白蛋白浓度的逐渐升高，试纸颜色从白色到浅蓝色再到深蓝色，色阶明显，易于目测和仪器读值。同时，本专利技术所述微量白蛋白试纸体系中表面活性剂和抗氧化剂的加入，使测定结果更准确，稳定性好。
[0028]下面列举具体数据进行说明尿微量白蛋白试纸的准确性及稳定性。
[0029]检测样本：临床样本40支。
[0030]试纸：市售某试纸，1筒（100条），批号：2020.10.16，效期2年；本专利技术所述试纸，1筒（100条），批号：2020.08.05，效期2年。
[0031]检测设备：迪瑞HC
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900型全自动尿液分析仪；日立7100型全自动生化分析仪。
[0032]检测过程：准确性：在日立7100型全自动生化分析仪上使用尿微量白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）对20支临床样本进行测试，记录测试结果做为标准值。
[0033]使用迪瑞HC
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900型全自动尿液分析仪测试两种试纸，分别为：市售试纸和本专利技术试纸（两种试纸均在效期内），并将测试结果与标准值对比。
[0034]结果与讨论：从上述数据可知，20支样本中，样本1、3、8、9、18，市售试纸测值测值与生化测值不符，试纸测值比生化测值偏高。以生化测值作为比对标准值，市售试纸检测准确率为75%；而本专利技术所述试纸20支样本中，样本14与生化测值不符，其余样本测值完全相符，准确率为95%。
[0035]稳定性：将市售试纸和本专利技术试纸（两种试纸均在效期内）密封条件下，放置于恒温箱中，设置恒温本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸，由基片和固定在基片上的滤纸组成，其特征在于，所述基片为PVC胶片；所述滤纸为普通的定性滤纸。2.根据权利要求1所述的一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸，其特征在于，所述的滤纸是先浸入到A液中，然后再浸入到B液中得到的。3.根据权利要求2所述的一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸，其特征在于，所述A液包括：缓冲液、表面活性剂。4.根据权利要求3所述的一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸，其特征在于，所述的缓冲液包括磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和Tris
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盐酸缓冲液中的一种。5.根据权利要求3所述的一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸，其特征在于，所述的表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮、十二烷基硫酸钠、多库酯钠和聚乙二醇中的一种。6.根据权利要求2所述的一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸，其特征在于，所述B液包括：有机溶剂、酚磺酞染料和抗氧化剂。...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐李鹏，尹志超，刘玲，陈凯丽，刘凯，
申请(专利权)人：吉林基蛋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：