【技术实现步骤摘要】
大肠杆菌L
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谷氨酸脱羧酶突变体的制备及应用
[0001]本专利技术涉及大肠杆菌L
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谷氨酸脱羧酶突变体的制备及应用,属于基因工程和酶工程
技术介绍
[0002]γ
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氨基丁酸(γ
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aminobutyric acid,GABA)是一种天然的、四碳非蛋白氨基酸,也称γ
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氨酪酸,分子式为C4H9NO2,相对分子质为103.12,由谷氨酸(Glutamic acid,Glu)经谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)催化而来。由于具有降血压、抗抑郁、抗焦虑、改善脑机能等多种生理功能。近来发现GABA还具有抑制肿瘤细胞增殖、改善脑血栓、降低1型糖尿病等功能。尽管GABA具有诸多功能性,但是人体内GABA含量会随着人的年龄以及外界环境压力的增加而日益减少,因此在日常饮食中补充GABA对改善人体健康具有要意义。
[0003]GABA生产方法主要有3种,分别是化学合成法、植物富集法、微生物发 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.大肠杆菌L
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谷氨酸脱羧酶突变体,其特征在于,所述突变体以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的L
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谷氨酸脱羧酶为亲本,在亲本第125位、126位、273位或276位的一个或多个位点突变。2.根据权利要求1所述的L
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谷氨酸脱羧酶突变体,其特征在于,所述突变体是在亲本的基础上,进行突变,所述突变包括(a)~(l)所示任一:(a)将第125位甘氨酸突变为苯丙氨酸;(b)将第126位丝氨酸突变为谷氨酸;(c)将第273位丝氨酸突变为苯丙氨酸;(d)将第273位丝氨酸突变为谷氨酸;(e)将第276位赖氨酸突变为精氨酸;(f)将第125位甘氨酸突变为苯丙氨酸,并将第273位丝氨酸突变为苯丙氨酸;(g)将第273位丝氨酸突变为苯丙氨酸,并将第276位赖氨酸突变为精氨酸;(h)将第276位丝氨酸突变为苯丙氨酸,并将第125位甘氨酸突变为苯丙氨酸;(i)将第125位甘氨酸突变为苯丙氨酸,并将第273位丝氨酸突变为苯丙氨酸、将第276位丝氨酸突变为苯丙氨酸。3.编码权利要求1或2所述大肠杆菌谷氨酸脱羧酶突变体的基因。4.携带权利要求3所述基因的表达载体。5.表达权利要求1或2所述突变体,或含有权利要求3所述基因的微生物细胞。6.一种产大肠杆菌L
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谷氨酸脱羧酶的方法,其特征在于,将权利要求5所述的微生物细胞在TB培养基中培养...
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