基于质谱技术的核酸检测方法技术

本发明专利技术提供了基于质谱技术的核酸检测方法，所述基于质谱技术的核酸检测方法为：根据待测核酸设计对应的核酸探针；使用金属离子标记所述核酸探针；标记有金属离子的核酸探针进入细胞内，与细胞内的待测核酸片段杂交；使用质谱技术检测单细胞，获得细胞中金属离子的含量，得到待测核酸的信息。本发明专利技术具有检测准确度高、快速等优点。快速等优点。快速等优点。

【技术实现步骤摘要】
基于质谱技术的核酸检测方法


[0001]本专利技术涉及核酸检测，特别涉及基于质谱技术的核酸检测方法。

技术介绍

[0002]基因支持着生命的基本构造和性能，储存着生物体的全部遗传信息，生物的各种性状几乎都是基因相互作用的结果。基因虽然十分稳定，但这种稳定性是相对的，在一定条件或外在环境影响下，基因序列可能会发生改变。比如常见的病毒感染，当病毒侵入人体细胞时，就会利用人体细胞内的营养和遗传物质，将其基因组整合于细胞的基因组完成复制和增殖，因此及时检测病毒感染对于疾病的早期筛查、诊断及预后具有重要意义。
[0003]目前最常用的病毒核酸检测方法为荧光定量PCR，需要提取细胞内DNA，再进行PCR扩增，样本前处理繁杂，时间成本高。流式荧光原位杂交技术，不需要进行DNA提取和PCR扩增，实验周期短，能迅速得到检测结果。但其需要使用各种荧光基团作为待测物标签，检测过程中不同通道之间容易出现荧光串色问题，这导致流式荧光技术的检测通道受到限制，且在进行多参数检测时，调节荧光补偿则变得异常复杂。

技术实现思路

[0004]为解决上述现有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于质谱技术的核酸检测方法，所述基于质谱技术的核酸检测方法为：根据待测核酸设计对应的核酸探针；使用金属离子标记所述核酸探针；标记有金属离子的核酸探针进入细胞内，与细胞内的待测核酸片段杂交；使用质谱技术检测单细胞，获得细胞中金属离子的含量，得到待测核酸的信息。2.根据权利要求1所述的基于质谱技术的核酸检测方法，其特征在于，标记所述核酸探针的方式为：在交联剂的作用下，金属离子和金属螯合剂集合；对核酸探针进行巯基修饰；在缓冲液作用下，结合了金属螯合剂的金属离子与巯基修饰后的核酸探针结合。3.根据权利要求1所述的基于质谱技术的核酸检测方法，其特征在于，所述细胞的获得方式为：获得血样，分离后选取外周血细胞，制成单细胞悬液；对细胞进行固定，细胞保持完整形态；对细胞进行通透，提高细胞膜的通透性。4.根据权利要求3所述的基于质谱技术的核酸检测方法，其特征在于，所述细胞的获得方式还包括：通透后的细胞中加入封闭剂，之后去除封闭剂。5.根据权利要求1所述的基于质谱技术的核酸检测方法，其特征在于，核酸探针和待测核酸片段的杂交方式为：在杂交缓冲液作用下，标记金属离子的核酸探针与待测核酸片段杂交；使用包含柠檬酸钠的缓冲液洗涤杂交后的细胞，去除非特异性杂交，之后使用PBS重悬细胞。6.根据权利要求4所述的基于质谱技术的核酸检测方法，其特征在于，在单细胞的质谱检测中，离子化单细胞的具体方式为：马达转动，转换模块将马达的转动转换为滑动件的直线移动；将所述滑动件的直线移动转换为转换件的竖直移动，从而带动与所述转换件连接的承载件沿着多个导向件竖直移动，设置在所述承载件上的承载单元随着所述承载件竖直移动；炬管竖直地设置在所述承载单元上，线圈固定在所述承载单元上，并与所述炬管保持相对静止；在水平方向上二维调节所述承载单元的位置，所述承载单元设置在二维调节单元上，所述二维调节单元设置在所述承载件上；细胞逐个进入所述炬管内，通过所述线圈激发成等离子体，从而形成离子；所述离子穿过采样锥后进入质谱分析单元。7.根据权利要求1所述的基于质谱技术的核酸检测方...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑宁宁，俞晓峰，李锐，吕聪，李艳晓，卓王涛，韩双来，
申请(专利权)人：聚光科技杭州股份有限公司，
类型：发明
国别省市：