【技术实现步骤摘要】
一种白菜型油菜再生体系建立及花药培养方法
本专利技术属于植物培养
，尤其涉及一种白菜型油菜再生体系建立及花药培养方法。
技术介绍
目前，油菜属于十字花科(Cruciferae)芸薹属(Brassica)芸薹种(B.campestrisL.)中的栽培亚种群，是我国重要的油料作物之一，也是世界第二大油料作物。在我国种植的油料作物中，油菜是潜力、希望最大的品种，是保障和提高我国食用油自给率的最优选择，中国作为世界油料生产和消费大国，自给率不足35％，因此当今育种学家把提高油菜产量和品质，培育抗病和抗逆油菜新品种作为重要内容来研究，在已有的研究报道中油菜可用下胚轴、子叶、子叶柄、根、茎、花药、小孢子等作为外植体来进行组织培养。现在已经建立起较为完善的油菜离体培养再生体系，并且得到了大量优质种质资源。然而，在油菜组织培养中，由于基因型和外植体的不同使油菜组织培养的最佳再生条件存在巨大差异，尤其在对白菜型油菜再生体系的研究报道甚少。白菜型冬油菜不仅是一种多功能作物还具有抗寒性强、病虫害少、还具有保肥保土等功能。因此，以Nebi为例...
【技术保护点】
1.一种白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述白菜型油菜再生体系建立方法包括：/n通过单因素实验分析不同浸泡时间、不同消毒方式及不同时间暗培养对种子萌发指标及生长指标的影响，得出最佳的浸泡时间、消毒方式及暗处理时间；通过比较不同激素组合对不同外植体愈伤组织的诱导和分化率的影响，筛选出白菜型油菜Neib下胚轴、带柄子叶最佳预培养基、下胚轴最佳分化培养基和带柄子叶最佳分化培养基。/n
【技术特征摘要】
1.一种白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述白菜型油菜再生体系建立方法包括：
通过单因素实验分析不同浸泡时间、不同消毒方式及不同时间暗培养对种子萌发指标及生长指标的影响，得出最佳的浸泡时间、消毒方式及暗处理时间；通过比较不同激素组合对不同外植体愈伤组织的诱导和分化率的影响，筛选出白菜型油菜Neib下胚轴、带柄子叶最佳预培养基、下胚轴最佳分化培养基和带柄子叶最佳分化培养基。
2.如权利要求1所述的白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述浸泡时间为6h的无菌水浸泡，所述消毒方式为3％次氯酸钠溶液消毒10min，所述暗处理时间为3d。
3.如权利要求1所述的白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述白菜型油菜Neib下胚轴、带柄子叶最佳预培养基为：MS+1mg/L2,4-D+2mg/L6-BA。
4.如权利要求1所述的白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述下胚轴最佳分化培养基为：MS+0.1mg/LIBA+2mg/L6-BA+5mg/LAgNO3。
5.如权利要求1所述的白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述带柄子叶最佳分化培养基为：MS+0.1mg/LIBA+3mg/L6-BA+5mg/LAgNO3。
6.如权利要求1所述的白菜型油菜再生体系建立方法，其特征在于，所述白菜型油菜再生体系建立方法具体包括：
(1)种子浸泡处理：选取无虫害且颗粒饱满种子，先用无菌水浸泡0、3、6、12、24h，共5个处理方式，分别进行种植培养，每个处理方式重复三次，每个重复20粒种子，记录7d内种子每天的发芽数，7d后计算发芽势、发芽率和发芽指数、活力指数；
(2)种子消毒：选取无虫害且颗粒饱满种子并且提前编号，无菌水浸泡，浸泡方式同步骤(1)中最佳浸泡方法；
(3)种子暗处理培养：选取无虫害且颗粒饱满种子，浸泡方式同步骤(1)最佳浸泡方法，消毒方式同步骤(2)最佳消毒方法，种植方式同步骤(1)，将种子置于培养箱中进行黑暗培养，设置4个处理，分别暗培养1、2、3、4d，再将种子置于光照培养箱中，每处理3次重复，记录7天种子每天发芽数，7d后计算发芽势、发芽率和发芽指数、活力指数及成苗率；
(4)外植体的切取：选取5-6d苗龄的无菌苗，切取带柄子叶和下胚轴，将所有外植体均平铺于愈伤培养基中；
...
【专利技术属性】
技术研发人员：王旺田，武军艳，马骊，孙万仓，李学才，杨晨，方彦，刘丽君，浦媛媛，刘博，
申请(专利权)人：甘肃农业大学，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
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