基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针快速定量检测溶液中链霉素的方法技术

本发明专利技术公开了基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针快速定量检测溶液中链霉素的方法，是将发夹结构DNA为模板的铜纳米簇作为荧光探针，利用核酸适配体的识别作用，免标记、快速、高灵敏度、高特异性定量检测复杂体系中链霉素含量。具体来说，以核酸适配体作为识别因子，以聚AT‑TA双链DNA模板合成的铜纳米簇作为荧光探针，通过荧光强度变化特异性检测溶液中链霉素含量。该方法简单、快速，检测线性范围宽，检出限低，具有较好的检测灵敏度和特异性，在食品、药品、化妆品、环境等方面具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针快速定量检测溶液中链霉素的方法
本专利技术涉及一种链霉素检测方法，具体涉及一种基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针快速定量检测溶液中链霉素的方法。属于生物检测

技术介绍
链霉素是最基本的一种氨基糖苷类抗生素，是由灰色链霉菌产生的一种抗菌有机碱，在人类、兽医和农业中都有广泛的应用。在农业上，它用于控制某些水果、蔬菜、种子、大田作物、观赏作物的细菌和真菌病害，在观赏池塘和水族馆中用于控制藻类。其不合理使用会导致其残留于动物体内，并通过食物链富集进入人体从而造成不良影响。由于链霉素及其衍生物有肾毒性和耳前庭毒性，也有研究表明链霉素还具有潜在的致畸作用。食品中的链霉素残留已引起各国高度重视。我国GB3150-2009《食品中兽药最大残留量》中规定，牛奶中链霉素最大残留限量为200μg/kg，畜禽肌肉、脂肪、肝脏中为600μg/kg，肾脏中为1000μg/kg。欧盟规定，乳品中链霉素最大残留限量为200μg/kg，肌肉、脂肪、肝脏中为500μg/kg，肾脏中为1000μg/kg。目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针的制备方法，其特征在于，先将DNA冻干粉利用MOPS缓冲液溶解制成DNA溶液；然后将DNA溶液与第一部分磷酸缓冲盐溶液混合得到混合液，90℃保温10分钟，自然冷却至室温，得到发夹结构DNA；接着将发夹结构DNA与第二部分磷酸缓冲盐溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸溶液混匀室温避光反应3分钟，得到荧光铜纳米簇溶液，即为所述的荧光探针。/n

【技术特征摘要】
1.基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针的制备方法，其特征在于，先将DNA冻干粉利用MOPS缓冲液溶解制成DNA溶液；然后将DNA溶液与第一部分磷酸缓冲盐溶液混合得到混合液，90℃保温10分钟，自然冷却至室温，得到发夹结构DNA；接着将发夹结构DNA与第二部分磷酸缓冲盐溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸溶液混匀室温避光反应3分钟，得到荧光铜纳米簇溶液，即为所述的荧光探针。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，DNA的序列如下：
5’-ATATATATATATGGCCCGTTTAAAGTAGTTGAGAGTATTCCGTTTCTTTGTGTCATATATATATAT-3’，如SEQIDNO.1所示。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，MOPS缓冲液包含：3-吗啉丙磺酸20mmol/L，氯化钠300mmol/L，pH＝7.5。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，DNA溶液、第一部分磷酸缓冲盐溶液、第二部分磷酸缓冲盐溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸溶液的体积比...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丽霞，易姿，汪胜，黄小贝，谢芳云，曾希珂，钟菲菲，袁圆，邱志鹏，周金沙，
申请(专利权)人：长沙市食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：湖南;43