一种基于HPLC-MS/MS检测铜绿假单胞菌代谢物的检测及应用制造技术

本发明专利技术公开一种基于HPLC‑MSMS检测铜绿假单胞菌代谢物的方法及应用。通过优化样品液的前处理条件，采用高效液相色谱串联三重四极杆质谱可以高效检测样品中的铜绿假单胞菌代谢物，该方法具有灵敏度高、特异性强、选择性好、准确性好、检测效率高等优点。该方法能用于化妆品等可能被铜绿假单胞菌或其代谢物污染的产品的质量控制；还能应用于铜绿假单胞菌的代谢分析，且只需接种一环便可检测到増菌培养基和选择性培养基中铜绿假单胞菌代谢物的含量。此外，筛选出的代谢物绿脓菌素、2‑庚基‑4‑喹啉酮、吩嗪‑1‑羧酸和1‑羟基吩嗪有作为铜绿假单胞菌特异性生物标志物的潜力，可用于铜绿假单胞菌的检测及代谢组学研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化妆品分析，具体涉及一种基于hplc-ms/ms检测铜绿假单胞菌代谢物的方法及应用。

技术介绍

1、铜绿假单胞菌是广泛分布于自然界的革兰氏阴性菌，能产生绿脓菌素。它是一种常见的机会致病菌，在一定情况下可引起人和动物感染，尤其是对于免疫系统较弱的人，可能引发如急性肠炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病。此外铜绿假单胞菌还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐。因此，化妆品中的铜绿假单胞菌及其产生的代谢物不仅会危及消费者的健康，同时也会影响产品本身的质量。

2、目前，微生物培养是化妆品中铜绿假单胞菌的主要检测方法，《化妆品安全技术规范》(2015)中关于铜绿假单胞菌的检验方法(第五章微生物检验方法)包括增菌培养、分离培养、染色镜检、氧化酶试验、绿脓菌素试验、明胶液化试验、42℃生长试验等。该方法步骤多，耗时长，且可能漏检，因此这也一直是化妆品中铜绿假单胞菌检测的难点和痛点。如中国专利文献cn109762772 a公开一种水溶性化妆品中铜绿假单胞菌定性标准样品及其制备方法，该方案中提供一种绿脓菌素培养基，将化妆品样品采用增菌液进行增菌培养后，用本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于HPLC-MSMS检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，所述的铜绿假单胞菌代谢物包括绿脓菌素、4-羟基喹啉、2,6-二羟基喹啉、2-甲基-8-羟基喹啉、6,7-二甲氧基-4-羟基喹啉、2-庚基-4-羟基喹啉-N-氧化物、2-庚基-4-喹啉酮、2-氨基-4-羟基喹啉水合物、2-羟基喹喔啉、1-羟基吩嗪、吩嗪-1-羧酸、吩嗪-1-甲酰胺、藤黄绿菌素中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的基于HPLC-MSMS检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，...

【技术特征摘要】

1.一种基于hplc-msms检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于hplc-msms检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，所述的铜绿假单胞菌代谢物包括绿脓菌素、4-羟基喹啉、2,6-二羟基喹啉、2-甲基-8-羟基喹啉、6,7-二甲氧基-4-羟基喹啉、2-庚基-4-羟基喹啉-n-氧化物、2-庚基-4-喹啉酮、2-氨基-4-羟基喹啉水合物、2-羟基喹喔啉、1-羟基吩嗪、吩嗪-1-羧酸、吩嗪-1-甲酰胺、藤黄绿菌素中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的基于hplc-msms检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，步骤s3中待检测的目标化合物的质谱参数如下：

4.根据权利要求1所述的基于hplc-msms检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，步骤s4中定性分析的方法为：在相同试验条件下，样品液中被测组分的质量色谱峰保留时间与标准溶液中对应组分的质量色谱峰保留时间一致；且样品色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比的偏差在如下范围，则可以判断样品中存在对应的组分：

5.根据权利要求1所述的基于hplc-msms检测铜绿假单胞菌代谢物的方法，其特征在于，步骤s4中定量分析的方法为：通过基质标准溶液进行外标定量，通过浓度与峰面...

【专利技术属性】
技术研发人员：冉丹，李奔，杨丽霞，秦寄军，钟菲菲，汪辉，黎英，胡丽俐，崔晓娇，李晰晖，王璐，邓楠，李尚科，曹雯婷，
申请(专利权)人：长沙市食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：